郑州大学;中国农业科学院棉花研究所袁佳辰获国家专利权
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龙图腾网获悉郑州大学;中国农业科学院棉花研究所申请的专利一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116087167B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310195503.8，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术是由袁佳辰;刘醒醒;葛晓阳;王少龙设计研发完成，并于2023-03-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术在说明书摘要公布了：本发明公开了一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术，先采用前处理缓冲液对愈伤组织进行孵育，再用PBS缓冲液过渡后，采用MDC染色液进行染色，制备细胞悬液，观察。本发明通过前处理诱导增加细胞自噬水平，显著提高荧光染色强度，提高特异染色的自噬小体与背景的对比度，使细胞内自噬情况更容易被观察到；同时前处理缓冲液具有维持渗透压、保持液体环境pH稳定以及提供基本营养的作用，能显著提高染色的稳定性。本发明使用PBS缓冲液洗涤可以避免染色过度，降低背景杂乱程度。本发明染色步骤更加简洁，染色层次分明，细胞对比度清晰，使植物体细胞胚胎发生过程中的自噬现象高效可视化。
本发明授权一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术在权利要求书中公布了：1.一种棉花愈伤细胞自噬活性可视化检测技术，其特征在于，包括以下步骤： 1取同一时期的待检测愈伤组织样品，洗涤，然后加入前处理缓冲液浸没样品，孵育诱导细胞自噬发生； 2弃去前处理缓冲液，加入PBS缓冲液，过渡； 3弃去PBS缓冲液，加入MDC染色液浸没样品，染色； 4弃去MDC染色液，洗涤；再加入PBS缓冲液，吹打分散，得到愈伤细胞悬液； 5制作愈伤细胞临时装片，利用荧光显微镜观察绿色荧光，分析愈伤细胞自噬活性； 前处理缓冲液包括以下浓度的组分：234.48mMNaCl、10.66mMKCl、52.38mMNaHCO3、2.02mMNaH2PO4、11.12mMD-Glucose。
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