吉林大学罗全获国家专利权
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龙图腾网获悉吉林大学申请的专利基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116087185B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310215181.9,技术领域涉及:G01N21/78;该发明授权基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法是由罗全;黄宜兵;陈瑾;李雨恒;王佳淳设计研发完成,并于2023-03-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法在说明书摘要公布了:本发明适用于农药检测技术领域,提供了基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法,以多肽为保护剂,合成金纳米酶,基于金纳米酶的荧光和类过氧化物酶活性的双重性质,并结合酶抑制剂法,建立检测方法,具体步骤如下:步骤一:合成金纳米酶,并保存备用;步骤二:制备海藻酸钠水凝胶块,并通过浸泡将金纳米酶物理吸附至海藻酸钠水凝胶中保存备用;步骤三:建立乙酰胆碱酯酶胆碱氧化酶级联反应,生成H2O2;步骤四:以步骤三产生的H2O2为基础,并结合步骤二中制备的海藻酸钠水凝胶实现对OPs的快速可视化定量检测,本发明的双信号输出检测结果具有自校正性,能够抵御干扰,提升检测准确性,扩大检测的实际应用范围。
本发明授权基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法在权利要求书中公布了:1.基于金纳米酶双信号检测有机磷农药痕量残留的方法,其特征在于,以多肽为保护剂,合成金纳米酶,基于金纳米酶的荧光和类过氧化物酶活性的双重性质,并结合酶抑制剂法,建立检测方法,具体步骤如下: 步骤一:合成金纳米酶,并保存备用; 步骤二:制备海藻酸钠水凝胶块,并通过浸泡将金纳米酶物理吸附至海藻酸钠水凝胶中保存备用; 步骤三:建立乙酰胆碱酯酶胆碱氧化酶级联反应,利用OPs对乙酰胆碱酯酶的抑制作用,影响乙酰胆碱酯酶胆碱氧化酶双酶级联反应终产物H2O2的产生; 步骤四:以步骤三产生的H2O2为基础,利用金纳米酶的类过氧化物酶活性,催化H2O2氧化TMB形成蓝色氧化产物,产生比色信号;同时,Fe2+通过芬顿反应催化H2O2产生·OH,使金纳米酶的荧光猝灭,产生荧光信号,并结合步骤二中制备的海藻酸钠水凝胶实现对OPs的快速可视化定量检测; 在步骤一中,合成金纳米酶的具体步骤为: 称取2mg多肽至1.5mL的EP管中,加入591的纯净水,使多肽水溶液的浓度为2mM,充分溶解后,加入浓度为4mM且体积为295的HAuCl4水溶液,将混合溶液放置于小型振荡器中旋转搅拌均匀,加入20的NaOH水溶液,使溶液体系pH值为13,并将混合溶液放置于小型振荡器中旋转搅拌均匀,将搅拌后的溶液置于37℃摇床中反应10h,而后将制备得到的金簇置于截留分子量为3.5KDa的透析袋中透析,再使用截留分子量为2KDa的超滤离心管离心40min,最后除去未反应小分子,得到金纳米酶; 在步骤二中,海藻酸钠水凝胶的制备步骤为: 使用HAC-AC缓冲液,配制25mgmL的海藻酸钠溶液,并在室温下缓慢溶解一天后,取7.5mL上述溶液,均匀的平铺在塑料培养皿中,后引入7.5mL使用HAC-AC缓冲液配制的CaCl210mgmL,放置1h后成胶,制得海藻酸钠水凝胶; 在步骤三中,建立酶级联反应的具体步骤为: 将OPs稀释至0.001-2mL,取8OPs与2的乙酰胆碱酯酶在37℃下反应25min,使OPs对其产生抑制作用,进一步抑制整个酶级联反应,之后继续加入10的乙酰胆碱以及10的胆碱氧化酶在总体积为60的Tris-HCl中反应25min,生成终产物H2O2; 所述透析时间为24h; 所述旋转搅拌处理的转速均为1000rmp; 所述乙酰胆碱酯酶的浓度为14UmL; 所述乙酰胆碱的浓度为600mM,胆碱氧化酶的浓度为28UmL; 所述Tris-HCl的浓度为100mM,pH为7.4; 所述金纳米酶和海藻酸钠水凝胶的保存温度均为4℃; 所述多肽的序列为CCYGGYRFKYRFK。
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