IMPPC私人基金会;劳伦克·科尔·穆莱特劳伦克·科尔·穆莱特获国家专利权
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龙图腾网获悉IMPPC私人基金会;劳伦克·科尔·穆莱特申请的专利用于产生双链DNA文库的方法和用于鉴定甲基化胞嘧啶的测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN106103743B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201580012375.2,技术领域涉及:C12Q1/6869;该发明授权用于产生双链DNA文库的方法和用于鉴定甲基化胞嘧啶的测序方法是由劳伦克·科尔·穆莱特;米格尔·A·佩纳杜·莫瑞丝设计研发完成,并于2015-01-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本用于产生双链DNA文库的方法和用于鉴定甲基化胞嘧啶的测序方法在说明书摘要公布了:本发明涉及用于鉴定双链DNA分子群体中的甲基化胞嘧啶的方法。本发明还涉及适配子和用于合成所述适配子的试剂盒以及涉及通过本发明的方法获得的双链DNA文库。
本发明授权用于产生双链DNA文库的方法和用于鉴定甲基化胞嘧啶的测序方法在权利要求书中公布了:1.一种用于鉴定双链DNA分子群体中的甲基化胞嘧啶的方法,所述方法包括以下步骤: i使双链DNA衔接子与多个双链DNA分子的链的至少一个末端连接,并且使多个双链DNA分子的链配对以提供多个配对的经衔接子修饰的DNA分子; ii将所述配对的经衔接子修饰的DNA分子中的任何非甲基化胞嘧啶转化成所述配对的经衔接子修饰的DNA分子中的尿嘧啶; iii使用核苷酸A、G、C和T和引物提供配对的且经转化的经衔接子修饰的DNA分子的互补链,所述引物的序列与所述双链DNA衔接子的至少一部分互补以提供部分转化的配对的双链分子; iv任选地,扩增步骤iii中获得的所述部分转化的配对的双链DNA分子以提供扩增的配对的双链DNA分子; v对步骤iii中或步骤iv中获得的所述配对的DNA分子测序, 其中若步骤iii中或步骤iv中获得的所述配对的双链DNA分子的链之一中出现胞嘧啶并且所述配对的双链DNA分子的另一条链中的相应位置中出现鸟嘌呤,则确定给定位置处的甲基化胞嘧啶的存在,和或其中若步骤iii中或步骤iv中获得的所述配对的双链DNA分子的链之一中出现尿嘧啶或胸腺嘧啶并且所述配对的双链DNA分子的另一条链中的相应位置中出现鸟嘌呤,则确定给定位置处的非甲基化胞嘧啶的存在, 其中如下获得步骤i所述的多个配对的经衔接子修饰的DNA分子: a使DNAY-适配子与多个双链DNA分子的链的每个末端连接,所述适配子包含第一DNA链和第二DNA链, 其中所述第一DNA链的3’区和所述第二DNA链的5’区通过序列互补性形成双链区, 其中由所述DNAY-适配子的所述第一DNA链的所述3’区和所述第二DNA链的所述5’区形成的所述双链区的末端与所述双链DNA分子的末端相容, b对于步骤a中获得的DNA分子的每条链,通过使用步骤a中获得的所述DNA分子的每条链为模板从所述DNAY-适配子分子中的所述第二DNA链的3’端进行聚合酶延长合成互补链,从而使步骤a中获得的所述DNA分子的每条链与其合成互补链配对,以提供多个配对的经衔接子修饰的DNA分子, 其中在步骤a中,所述多个双链DNA分子是基因组DNA片段, 其中使所述基因组DNA片段的链配对以提供多个配对的基因组DNA片段, 其中通过使用条形码序列进行所述基因组DNA片段的链的所述配对, 其中使用核苷酸A、G、C和T进行步骤b。
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