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龙图腾网获悉四川省三物科技有限公司申请的专利一种快速检测深部感染曲霉菌的方法及试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116064899B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211065765.4，技术领域涉及：C12Q1/6895；该发明授权一种快速检测深部感染曲霉菌的方法及试剂盒是由雷成刚;张俊彦;崔岚设计研发完成，并于2022-09-01向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种快速检测深部感染曲霉菌的方法及试剂盒在说明书摘要公布了：本发明公开了一种快速检测深部感染曲霉菌的方法及试剂盒，将待测样本与核酸直裂提取液混合后于60～65℃加热8～20min，再于93～98℃加热5～10min，获得待测样本的DNA提取液，将所述DNA提取液加入含有深部感染曲霉菌的组合物的PCR预混液中，制得PCR反应液，将所述PCR反应液进行以下PCR扩增反应：控制温度在90～100℃时，进行变性，停留时间为0～5s，控制温度在50～70℃时，进行退火延伸，停留时间为0～5s，循环35～50次，该方法不仅提供了能够区分黄曲霉、黑曲霉和烟曲霉的特异性引物探针组合物，还可实现待测样本从核酸提取到核酸扩增反应等一系列过程的快速检测，节约检测时间。

本发明授权一种快速检测深部感染曲霉菌的方法及试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种以非诊断为目的快速检测深部感染曲霉菌并分型的方法，其特征在于：将待测样本与核酸直裂提取液混合后于65℃加热10min，再于95℃加热5min，获得待测样本的DNA提取液，将所述DNA提取液加入含有深部感染曲霉菌的组合物的PCR预混液中，制得PCR反应液，将所述PCR反应液进行以下PCR扩增反应： 通过引物和探针特异性扩增待测基因靶序列，设置PCR扩增程序为：50℃UDG酶消化120s，95℃60s，95℃0s，60℃0s，循环40次， 所述核酸直裂提取液包括三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、十二烷基磺酸钠以及蛋白酶； 所述PCR预混液包括UDG酶、深部感染曲霉菌的组合物、DNA聚合酶以及核酸直裂提取液； 所述深部感染曲霉菌的组合物包括以下组分： 如SEQIDNO:1所示的黄曲霉上游引物、如SEQIDNO:2所示的黄曲霉下游引物，和如SEQIDNO:3所示的黄曲霉探针； 如SEQIDNO:4所示的黑曲霉上游引物、如SEQIDNO:5所示的黑曲霉下游引物，和如SEQIDNO:6所示的黑曲霉探针； 如SEQIDNO:7所示的烟曲霉上游引物、如SEQIDNO:8所示的烟曲霉下游引物，和如SEQIDNO:9所示的烟曲霉探针； 如SEQIDNO:10所示的内标上游引物； 如SEQIDNO:11所示的内标下游引物； 以及如SEQIDNO:12所示的内标探针， 所述深部感染曲霉菌的组合物中引物的用量为600nM；所述深部感染曲霉菌的组合物中探针的用量为200nM； 结果分析： 1目的检测信号为FAM-黄曲霉，HEX-黑曲霉，ROX-烟曲霉，内参为CY5通道； 2Baseline的设置：Baseline设置为3-15个循环，Threshold的设置：取扩增斜率13-12处； 3分析内标在CY5通道是否有扩增曲线，且Ct≤40，若有，表示本次检测有效，继续进行后续分析； A若FAM通道检测到典型的S型扩增曲线，且Ct≤40，表示黄曲霉为阳性，若Ct＞40或无Ct，则为阴性; B若VIC通道检测到典型的S型扩增曲线，且Ct≤40，表示黑曲霉为阳性，若Ct＞40或无Ct，则为阴性; C若ROX通道检测到典型的S型扩增曲线，且Ct≤40，表示烟曲霉为阳性，若Ct＞40或无Ct，则为阴性; D若内在CY5通道没有检测到Ct或Ct＞40，表示本次检测样本浓度太低或者有干扰物质抑制反应，需重新准备实验; F对于阳性样本及细菌培养物，内标检测结果不作要求。

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