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龙图腾网获悉广东省奥干诺伊德生物科技有限公司申请的专利肝脏类器官高速和大量制备方法、以及使用其筛选药物功效和毒性的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116179470B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211489353.3，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权肝脏类器官高速和大量制备方法、以及使用其筛选药物功效和毒性的方法是由金南衡;韩东旭;郭浩;姚雪瑞;金哲龙设计研发完成，并于2022-11-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本肝脏类器官高速和大量制备方法、以及使用其筛选药物功效和毒性的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及肝脏类器官的高速大量制备方法，且利用这些方法筛选肝脏疾病相关药物的方法、筛选药物体外毒性的方法等。根据上述制备方法，在同一微孔板上连续经过三维分化过程，可以高速大量制备肝脏类器官。用上述制备方法制备的大量制备肝脏类器官包含肝细胞solidcorepart，hepatocytes、胆管细胞cysticpart，cholangiocytes、肝星状细胞hepaticstellatecell、库珀细胞kupffercell等，具有与实际肝脏组织相似水平的细胞组成、结构、功能性，可在体外稳定增殖。另外，利用本发明的肝脏类器官的药物体外毒性筛选方法，可以事先筛选出可能具有肝毒性的药物，缩短新药开发的时间和费用，改善其效率。

本发明授权肝脏类器官高速和大量制备方法、以及使用其筛选药物功效和毒性的方法在权利要求书中公布了：1.肝脏三维细胞集合体的高速大量制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1从人类分离的干细胞中形成胚胎体的步骤，该步骤是在DMEMF12培养基中加入血清替代物20%，FBS3%、L-谷氨酰胺1%、青霉素链霉素溶液1%、ROCK抑制剂10μM和碱性成纤维细胞生长因子10ngmL；其中放入初始起始细胞数为100个至250个； 2从所述胚胎体诱导分化为肝脏组织，在20至30天内形成肝脏三维细胞集合体的步骤；形成肝脏三维细胞集合体的步骤是在DMEMF12培养基中加入FBS10%、NEAA1%、L-谷氨酰胺1%、胰岛素-转铁蛋白-硒培养基补充剂0.1%、地塞米松10μM、肝细胞生长因子50ngmL、抑瘤素M20ngmL、表皮细胞生长因子50ngmL、烟酰胺0.5%和A83-014ngmL，进行6-10天培养； 3所述肝脏三维细胞集合体进一步分化的步骤，该步骤在分化培养液中进行，在分化培养液中培养10-15天；其中，所述分化培养液是在DMEMF12培养基中加入B271%、N21%、L-谷氨酰胺1%、肝细胞生长因子25ngmL、表皮细胞生长因子50ngmL、N-乙酰半胱氨酸1mM、胃泌素10nM、A83-010.5μM、γ分泌酶抑制剂10μM和骨成型蛋白725ngmL； 其中，所述步骤1至3是在同一微孔板上连续非振荡培养，在连续非振荡培养时，直接将基质胶添加到培养液中，使用体积百分比浓度为0.5%或1%的基质胶； 所述微孔板是一种具有凹口的多微孔板，所述具有凹口的多微孔板为96孔板； 其中，所述干细胞为hESC或hiPSC，所述hESC为未经过体内发育的受精14天以内的人类胚胎分离或获取的干细胞。

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