浙江工业大学梁现蕊获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江工业大学申请的专利一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物制备及主要活性成分鉴定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116559320B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310459054.3,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物制备及主要活性成分鉴定方法是由梁现蕊;叶琴设计研发完成,并于2023-04-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物制备及主要活性成分鉴定方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物制备及主要活性成分鉴定方法,具体步骤包括:以干燥的黑果枸杞籽粉末为原料,以70%丙酮溶液为提取溶剂,在料液比为1:10的条件下,超声辅助提取3次,超声功率100W,超声时间30min,合并提取液,8000rpm离心10min,上清液经蒸发去除溶剂,经冷冻干燥后得黑果枸杞籽提取物。采用2,2‑二苯基‑1‑三硝基肼DPPH对黑果枸杞籽提取物的抗氧化性活性进行测试,通过离线DPPH‑UPLC法进一步识别提取物中的抗氧化成分,并运用超高效液相色谱‑串联四极杆飞行时间质谱UPLC‑QTOF‑MSMS技术对提取物中的抗氧化活性成分进行了鉴定。本发明方法操作简单、提取率高,为开发和利用黑果枸杞中抗氧化活性成分以及黑果枸杞的综合利用提供新思路。
本发明授权一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物制备及主要活性成分鉴定方法在权利要求书中公布了:1.一种具有抗氧化活性黑果枸杞籽提取物主要活性成分鉴定方法,其中,提取物制备及活性成分鉴定包括以下步骤: 1将黑果枸杞籽干燥后研磨,过筛,得黑果枸杞籽粉末; 2将步骤1所得干燥的黑果枸杞籽粉末为原料,与提取溶剂混合,然后超声提取,重复提取3次,合并上清液,离心,上清液经旋转蒸发除去溶剂,最后放入冷冻干燥机中冷冻干燥得到黑果枸杞籽提取物; 3将步骤2所得黑果枸杞籽提取物进行2,2-二苯基-1-三硝基肼DPPH抗氧化活性测试; 4将步骤2所得黑果枸杞籽提取物经超高效液相色谱UPLC分析,得UPLC色谱图;采用离线DPPH-UPLC联用技术法,对步骤2所得黑果枸杞籽提取物中的抗氧化活性成分进行分析,确定具有抗氧化活性的目标峰; 5进一步采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱UPLC-QTOF-MSMS法对提取物中的抗氧化活性成分进行鉴定,确定步骤4中抗氧化活性目标峰所对应的分子结构; 步骤2所述提取溶剂为丙酮和水的混合溶剂,混合溶剂中丙酮的体积分数为70%;黑果枸杞籽粉末与提取溶剂的料液比为1g:10mL,超声提取温度为25-35℃,超声提取时间为30min; 步骤5鉴定出3种主要的抗氧化活性成分,分别为N1-caffeoyl,N10-dihydrocaffeoylspermidine;N1-dihydrocaffeoyl,N10-caffeoylspermidine和N,N-dicaffeoyl-spermidine,将它们分别记为化合物1、化合物2和化合物3: 所述活性成分的结构式依次为: ; ; ; 步骤4所述黑果枸杞籽提取物的超高效液相色谱分析条件为: 色谱柱是WatersACQUITYUPLCBEHC18,2.1×100mm,1.7µm; 流动相A为0.3%甲酸水溶液,流动相B为乙腈,流动相流速0.3mLmin;采用梯度洗脱的方式,具体为:0~18min,95%~56%A;18~20min,56%~10%A;20~30min,10%~95%A;柱温:35℃;检测波长:280nm;进样量:3μL,进样浓度:12mgmL。
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