中国科学院成都生物研究所周燕获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院成都生物研究所申请的专利分离人血清中脂溶性维生素并检测各组分含量的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116609446B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310280434.0,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权分离人血清中脂溶性维生素并检测各组分含量的方法是由周燕;谭雨;李敏;夏兵设计研发完成,并于2023-03-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本分离人血清中脂溶性维生素并检测各组分含量的方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物化学分析技术领域,具体涉及一种分离人血清中脂溶性维生素并检测各组分含量的方法。该方法为:采用正相固相萃取法对血清样品进行前处理,包括使用硅藻土、弗罗里硅土、硅胶、氧化铝或氨基键合的硅胶装填成的固相小柱进行洗脱;然后利用LC‑MSMS法实现人血清中维生素A,维生素E,维生素K1,25‑羟基维生素D2和25‑羟基维生素D3的分离测定;色谱柱以C18、C8或五氟苯基为填充剂,采用甲酸和乙酸铵水溶液的混合溶液为流动相A,甲酸和乙酸铵甲醇溶液的混合溶液为流动相B进行梯度洗脱,再采用串联四级杆质谱进行检测。本发明的检测方法,操作简便,时间短、效率高,更易于高通量操作,便于临床推广和应用。
本发明授权分离人血清中脂溶性维生素并检测各组分含量的方法在权利要求书中公布了:1.基于LC-MSMS法分离血清中脂溶性维生素的方法,其特征在于,被分离的组分包括维生素A、维生素E、维生素K1、25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3;所述方法为:采用正相固相萃取法对血清样品进行前处理,并利用高效液相色谱进行分离;所述高效液相色谱中的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱,流动相包括流动相A和流动相B,所述流动相A为体积分数为0.01-0.2%的甲酸和浓度为0.5-5.0mM的乙酸铵水溶液的混合溶液,所述流动相B为体积分数为0.01-0.2%的甲酸和浓度为0.5-5.0mM的乙酸铵甲醇溶液的混合溶液;通过梯度洗脱依次将25-羟基维生素D3、25-羟基维生素D2、维生素A,维生素E,维生素K1进行分离; 所述前处理包括以下步骤: 1采用正相固相萃取法,用极性材料装填成的固相小柱; 2所述血清样品加入脂溶性维生素氘代内标物和抗氧化剂混匀后上样,静置; 3洗脱分离,收集洗脱液; 4氮吹,复溶,获得待测样品; 所述极性材料为硅藻土、弗罗里硅土、硅胶、氧化铝和或氨基键合的硅胶中的任一种或多种; 所述梯度洗脱包括以下设置: 洗脱时间0.00min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为30:70; 洗脱时间0.50min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为30:70; 洗脱时间3.50min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为0:100; 洗脱时间6.50min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为0:100; 洗脱时间6.51min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为30:70; 洗脱时间9.00min,设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为30:70。
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