沈阳化工大学张宇红获国家专利权
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龙图腾网获悉沈阳化工大学申请的专利一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118458940B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410533710.4,技术领域涉及:C02F3/30;该发明授权一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法是由张宇红;蔡佳诚;许家琪;王佳宝设计研发完成,并于2024-04-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法在说明书摘要公布了:一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法,涉及一种Zn2+废水脱氮方法,本发明提供了一株具有耐重金属Zn2+的异养硝化好氧反硝化假单胞菌及其应用,该假单胞菌为pseudomonassp.SK‑4,菌株保藏编号为CCTCCNO:2024163。本发明通过综合分析菌株SK‑4的富集、分离、筛选以及鉴定,不同环境因素对于菌株脱氮性能的影响,菌株的脱氮性能的测定以及Zn2+对菌株脱氮性能的影响证实了该菌具有优秀的脱氮能力且对Zn2+具有较强的耐受能力。该菌在高浓度重金属离子Zn2+的影响下仍能够保持对氨氮和硝态氮较高的去除率,为在重金属胁迫作用下废水的生物脱氮提供了新的选择。
本发明授权一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法在权利要求书中公布了:1.一种异养硝化好氧反硝化假单胞菌对Zn2+废水脱氮方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤: 1培养异养硝化好氧反硝化假单胞菌 S1、在好氧池中取回的泥水混合物样品于2~5℃的环境下保存,在无菌操作台移取1~6ml样品接种到装有富集培养基的锥形瓶中,充分摇匀后于30~40℃,120~160rpmmin的恒温摇床中培养1~3天;培养完成后移取1~6ml菌液于装有富集培养基的锥形瓶中,并重复以上操作转接三次; S2、采用梯度稀释法对上述富集所得到的种子液进行稀释,稀释得到10-1~10-9浓度梯度的细胞稀释液,取0.1~0.3ml各浓度梯度的菌液均匀涂布于好氧反硝化培养基上,于30~40℃的恒温培养箱中培养2-3天;培养后选取菌落附近培养基由黄绿变为蓝色的菌落再接种至异养硝化培养基中进行多次三分区划线培养,从而提高其纯度;最后将纯化后所得的菌株接种至异养硝化培养基于2~5℃保存; S3、用接种环接取1~3环培养所得单菌落于异养硝化液体培养基中培养12~20h后得到种子液,移取1ml种子液于异养硝化液体培养基中于30~40℃,120~160rpmmin的条件下培养12~20h,测量其对氨氮的去除效率,最后筛选出对氨氮去除效率大于90%的菌株进一步筛选; S4、移取上述去除效率大于90%的菌株的种子液于加有50~80mgL的Zn2+异养硝化培养基中于30~40℃,120~160rpmmin的条件下培养12~20h,筛选得到对Zn2+耐受能力最强的假单胞菌pseudomonassp.SK-4,并进行冷冻保存;所述假单胞菌pseudomonassp.SK-4保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,其菌株保藏编号为CCTCCNO:M2024163; 上述培养所得的假单胞菌pseudomonassp.SK-4在含Zn2+废水中的脱氮应用 假单胞菌pseudomonassp.SK-4在含Zn2+废水中的脱氮,分别取上述异养硝化液体培养基,一次加入0mgL、5mgL、10mgL、30mgL、50mgL、80mgL的Zn2+,接取1%~3%的菌株种子液,在0~24h测量异养硝化培养基中氨氮的浓度该菌在高浓度重金属离子Zn2+的影响下仍能够保持对氨氮较高的去除率,为重金属胁迫作用下废水的生物脱氮提供了选择。
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