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华南农业大学曹伟胜获国家专利权

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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利产微菌素MccY和MccJ25重组工程益生菌的构建及抗菌应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119955699B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411970967.2,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权产微菌素MccY和MccJ25重组工程益生菌的构建及抗菌应用是由曹伟胜;韩雨;段千禧;冯赛祥;罗鑫杰设计研发完成,并于2024-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。

产微菌素MccY和MccJ25重组工程益生菌的构建及抗菌应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物技术领域,公开了三种微菌素重组整合的工程益生菌,这三种重组整合的工程益生菌分别为微菌素MccJ25重组整合的工程益生菌、微菌素MccY重组整合的工程益生菌以及微菌素MccJ25、MccY重组整合的工程益生菌,本发明的三种工程益生菌共同具有无抗性标记基因、具有良好生长活性、遗传稳定性、抗菌活性的特点。同时,本发明还提供了该工程益生菌的制备方法以及用途。

本发明授权产微菌素MccY和MccJ25重组工程益生菌的构建及抗菌应用在权利要求书中公布了:1.一种微菌素MccJ25重组整合的工程益生菌,其特征在于,所述工程益生菌为整合有微菌素MccJ25基因的大肠杆菌;所述微菌素MccJ25基因的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示;所述的大肠杆菌为大肠杆菌Nissle1917; 所述工程益生菌的制备方法为: 1将pREDCas9质粒转入EcN感受态细胞中,筛选得到阳性转化子EcN-cas9,并将阳性转化子EcN-cas9制备成感受态细胞;所述感受态细胞为EcN-cas9感受态细胞; 2将SD-T7RNP同源臂修复片段和araBsgRNA质粒转入EcN-cas9感受态细胞中,使用壮观霉素和氨苄西林筛选得到重组菌株EcN∆araB-T7RNP-araBsgRNA-cas9;所述araBsgRNA质粒为插入有sgRNA-araB片段的pUC19载体;所述sgRNA-araB片段的核苷酸序列如SEQIDNO:33所示; 3对重组菌株EcN∆araB-T7RNP-araBsgRNA-cas9进行传代培养,筛选出对壮观霉素不敏感、对氨苄西林敏感的菌株以消除菌株中的araBsgRNA质粒,并转入MccJ25E同源臂修复片段和endAsgRNA质粒,使用壮观霉素和氨苄西林筛选得到重组菌株EcN∆araB-T7RNP-cas9-∆endA-MccJ25-endAsgRNA;所述endAsgRNA质粒为插入有sgRNA-endA片段的pUC19载体;所述sgRNA-endA片段的核苷酸序列如SEQIDNO:34所示; 4对重组菌株EcN∆araB-T7RNP-cas9-∆endA-MccJ25-endAsgRNA进行传代培养,筛选出对壮观霉素不敏感、对氨苄西林敏感的菌株以消除菌株中的endAsgRNA质粒,得到重组菌株EcN∆araB-T7RNP-∆endA-MccJ25-cas9; 5对重组菌株EcN∆araB-T7RNP-∆endA-MccJ25-cas9进行42℃传代培养,筛选出对壮观霉素和氨苄西林均敏感的菌株以消除菌株中的pREDCas9质粒,得到微菌素MccJ25重组整合工程益生菌EcN-MccJ25; 所述SD-T7RNP同源臂修复片段的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示;所述MccJ25E同源臂修复片段如SEQIDNO:19所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人华南农业大学,其通讯地址为:510642 广东省广州市天河区五山路483号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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