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龙图腾网获悉深圳大学申请的专利一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120102529B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510191379.7，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法是由杨梦婷;程怡菲;张振轩;刘焱设计研发完成，并于2025-02-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及水质检测技术领域，尤其涉及一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法。本发明采用荧光光谱、同步荧光光谱及紫外吸收光谱技术，研究七种环状和杂环类卤代消毒副产物与胃蛋白酶、胰蛋白酶的相互作用。通过Stern‑Volmer方程、双对数方程等分析荧光猝灭机制、结合常数及热力学参数，揭示卤代消毒副产物对蛋白酶构象的影响。本申请公开了卤代消毒副产物与蛋白酶的结合力与细胞毒性呈正相关，为卤代消毒副产物毒性评价提供新指标，有助于优化饮用水消毒工艺及制定水质标准。

本发明授权一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于蛋白酶评估卤代消毒副产物毒性水平的方法，其特征在于，包括如下步骤： S1、溶液配置：配置胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液和卤代消毒副产物溶液；所述卤代消毒副产物包含环状和杂环化合物，且至少包含2,6-二氯-1,4-苯醌、2,6-二溴-1,4-苯醌、2-氯苯乙腈、3,4-二氯苯乙腈、5-氯-3-吡啶醇、2-溴-3-吡啶醇和2,6-二溴-3-吡啶醇中的两种； S2、光谱测定：将蛋白酶溶液分别与不同浓度的卤代消毒副产物溶液混合；对混合溶液进行二维荧光光谱、同步荧光光谱及紫外吸收光谱的测定；通过这些光谱数据，获取关于氨基酸残基微环境和蛋白酶结构变化的信息； S3、荧光淬灭分析：用Stern-Volmer方程拟合荧光数据，判定消毒副产物对蛋白酶的淬灭类型为静态或动态，并计算出淬灭常数，据此判断消毒副产物与蛋白酶是否发生结合； S4、结合参数分析：通过双对数方程构建荧光猝灭的对数关系曲线，计算出消毒副产物-蛋白酶复合物的结合位点数和结合常数；对比不同蛋白酶与消毒副产物的亲和力，评估相互作用强度及消毒副产物的毒性水平； S5、热力学参数分析：运用Van'tHoff方程和Gibbs-Helmholtz方程计算焓变、熵变和吉布斯自由能，分析结合过程中的主要作用力类型，所述作用力包括氢键、疏水作用和静电力； S6、结构影响分析：消毒副产物与蛋白酶相互作用形成消毒副产物-蛋白酶复合物，形成过程中改变了色氨酸和酪氨酸残基周围的疏水性环境，进而影响蛋白酶结构的紧致度；据此表征消毒副产物与蛋白酶间的相互作用力； S7、综合分析：根据步骤S4-S7的分析，判断消毒副产物和蛋白酶的相互作用，与消毒副产物的细胞毒性之间是否存在正相关关系。

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