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龙图腾网获悉无锡多宁生物科技有限公司申请的专利一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116042535B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211581529.8，技术领域涉及：C12N5/20；该发明授权一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺是由王龙;冯慧慧;王猛设计研发完成，并于2022-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺在说明书摘要公布了：本发明公开了一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺，包括以下步骤：1复苏培养，2静止扩增培养，3悬浮驯化和扩大培养；本发明的杂交瘤细胞悬浮培养方法相对于杂交瘤细胞半贴壁培养方法具有以下优点：细胞传代时无需胰酶消化；细胞活率更高，易于放大培养。

本发明授权一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺在权利要求书中公布了：1.一种杂交瘤细胞悬浮培养生产重组抗体蛋白的生产工艺，其特征在于，包括下列步骤: 1复苏培养，将冻存的杂交瘤细胞苏后接种于含5%FBS的RPMI1640中放置二氧化碳培养箱中进行复苏培养； 2静止扩增培养，将复苏后状态良好的杂交瘤细胞使用0.05%胰酶37℃消化45s后用含5%FBS的RPMI1640终止，细胞悬液收集以600rpmmin离心5min，弃上清直接使用Hybrid01无血清培养基重悬按照1:5的比例接种于T75的细胞培养瓶中，按1:5比例进行后续的静止扩增传代； 所述Hybrid01无血清培养基为自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基，所述自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基中脂类组为0.000008gL亚油酸、1.0gL胆固醇；所述自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基中无机盐组分为1.6gL氯化钾、0.6gL氯化钙、3.0gL磷酸二氢钠、1.0gL磷酸氢二钠、6.5gL氯化钠、1.0gL硫酸镁、3.0gLP188；所述自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基中氨基酸及糖类组分为1.2gL天冬酰胺、0.2gL蛋氨酸、0.3gL组氨酸、0.9gL天冬氨酸、0.2gL丝氨酸、0.9gL甘氨酸、1.3gL精氨酸、0.3gL异亮氨酸、1.3gL亮氨酸、1.2gL谷氨酸、1.4gL缬氨酸、1.0gL赖氨酸、0.5gL苯丙氨酸、0.2gL脯氨酸、0.1gL苏氨酸、1.4gL谷氨酰胺、0.4gL酪氨酸、0.5gL丙氨酸、6gL葡萄糖；所述自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基中维生素组分为0.0001gL维生素B6、0.00003gL维生素B1、0.00008gL生物素、0.00004gL维生素B12、0.000001gL泛酸、0.00004gL叶酸、0.0008gL烟酸、0.00004gL核黄素、0.004gL氯化胆碱、0.00004gL肌醇；所述自主研发的杂交瘤细胞无血清、无动物源成分的基础培养基中微量元素组分为0.00004gL氯化铜、0.0001gL氯化锌、0.0004gL硫酸亚铁、0.000001gL钼酸铵、0.00002gL氯化锰； 3悬浮驯化和扩大培养，将静止在T75瓶中培养的杂交瘤细胞轻轻拍打使洗细胞悬浮，收集细胞600rpmmin，5min，弃上清加入3mL杂交瘤细胞无血清培养基Hybrid01进行重悬，以1.0×105～3.0×105cellsmL细胞密度按照15～20mL体积接种到125mL摇瓶中按照Tm:37℃，CO2浓度：5%，摇床转速：90～120rpm振幅50mM，进行细胞悬浮培养，培养5天每天进行取样计数及活率分析，第五天进行表达量测定。

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