买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉中国农业大学;山东省农业科学院申请的专利月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116083339B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211026025.X，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法是由马男;王成鹏;周晓锋;高俊平;程晨霞;李扬;王娜;俞芹设计研发完成，并于2022-08-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法，月季细胞的快速悬浮培养方法包括1愈伤组织的诱导；2悬浮细胞的制备；3悬浮细胞的继代培养与保存；一种月季细胞的高效遗传转化方法包括1使用月季细胞的快速悬浮培养方法获得的月季悬浮细胞；2载体转化农杆菌；3农杆菌侵染月季悬浮细胞；4对已转染的悬浮细胞进行共培养和筛选培养；5遗传转化结果检测。本发明解决了现有技术尚未建立月季悬浮细胞遗传转化体系的问题，能在短时间快速培养大量的月季悬浮细胞，高效遗传转化月季悬浮细胞，快速实现在月季本体进行基因功能验证、亚细胞定位、蛋白表达、合成生物学研究等。

本发明授权月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法在权利要求书中公布了：1.一种月季悬浮细胞的遗传转化方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 1载体转化农杆菌：将质粒转化到农杆菌菌株中，挑选转化成功的单菌落，接种于LB液体培养基中培养，离心去除上清液，收集阳性农杆菌； 2用MS重悬溶液重悬步骤1离心收集的阳性农杆菌，从而获得侵染液；所述MS重悬溶液为：4.40g•L-1-4.45g•L-1MSsalt、8mM-12mMMES、8mM-12mMMgCl2、3%Glucose、180μM-220μMAS； 3使用400目的滤布过滤收集继代培养14d的月季悬浮细胞； 4将步骤3继代培养14d的月季悬浮培养细胞置于步骤2获得的侵染液中进行侵染，获得已转染的悬浮细胞；所述侵染具体为：在28℃黑暗条件下，置于摇床中以180rpmmin摇动30min，过滤收集转染的悬浮细胞，使用ddH2O洗涤两次，洗去侵染液，获得已转染的悬浮细胞； 5共培养：取步骤4获得的已转染的悬浮细胞，置于共培养培养基中在25℃黑暗条件下，共培养2-3d；所述共培养培养基的成分为：4.40g•L-1-4.45g•L-1MSsalt、0.8mg•L-1-1.2mg•L-12,4-D、0.8mg•L-1-1.2mg•L-16-BA、4.5%Glucose、0.3%Gel； 6筛选培养：取步骤5共培养结束的悬浮细胞，置于选择增殖培养基中进行选择培养，2周获得月季悬浮细胞团；所述选择增殖培养基的成分为：4.40g•L-1-4.45g•L-1MSsalt、0.8mg•L-1-1.2mg•L-12,4-D、0.8mg•L-1-1.2mg•L-16-BA、4.5%Glucose、0.3%Gel、280mg•L-1-300mg•L-1Cef、8mg•L-1-12mg•L-1Hygromyci； 所述月季悬浮细胞的制备方法为： ①愈伤组织的诱导：选取月季幼嫩叶片，将选取的月季幼嫩叶片接种到诱导培养基中，进行愈伤组织诱导培养；将诱导的愈伤组织转移至增殖培养基中，进行增殖培养； ②悬浮细胞的制备：选取步骤①增殖培养1个月的愈伤组织；将选取的愈伤组织接种到无凝胶的增殖培养基中；将该培养基置于恒温震荡培养箱中进行培养，获得稳定的初代悬浮细胞； ③悬浮细胞的继代培养：选取步骤②获得的初代悬浮细胞再接种于无凝胶的增殖培养基上；将该无凝胶增殖培养基置于恒温震荡培养箱中培养，进而获得继代培养的月季悬浮细胞； ④继代培养悬浮细胞的保存：对步骤③获得的含有继代培养的月季悬浮细胞的无凝胶增殖培养基进行过滤，获得继代培养的月季悬浮细胞，取该细胞置于含凝胶的增殖培养基上进行继代保存； 所述诱导培养基成分为：4.40g•L-1-4.45g•L-1MSsalt、2.5mg•L-1-3.5mg•L-12,4-D、0.05mg•L-1KT、30g•L-1Glucose、0.3%Gel；所述增殖培养基为4.40g•L-1-4.45g•L-1MSsalt、0.8mg•L-1-1.2mg•L-12,4-D、0.8mg•L-1-1.2mg•L-16-BA、6%Glucose、0.3%Gel。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人中国农业大学;山东省农业科学院，其通讯地址为：100193 北京市海淀区马连洼西路中国农业大学西校区；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。