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云南农业大学;山东中医药大学武鑫获国家专利权

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龙图腾网获悉云南农业大学;山东中医药大学申请的专利一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119751188B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411636038.8,技术领域涉及:C07B63/00;该发明授权一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法及其应用是由武鑫;武毅;陈月茹;张莹;周洪雷;沈鸿;魏乾飞;李建芹;舒相华;宋春莲;张杨子;刘红梅设计研发完成,并于2024-11-15向国家知识产权局提交的专利申请。

一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法及其应用。本发明首次基于活性导向谱效分离技术对构树树枝中的抗氧化和抗炎的活性部位进行了系统筛选和分离。上述技术方案有效精简分离操作的步骤,减少分离中化合物的损失,降低分离流动相和填料的消耗。同时,活性导向分离能提高发现活性化合物的概率,降低测定获取化合物活性的成本,具有良好的实际应用之价值。

本发明授权一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种抗炎和抗氧化活性的构树枝提取物的筛选制备方法,其特征在于,所述筛选制备方法包括: S1、将构树枝粉碎后加入80%乙醇进行加热回流提取,药液浓缩、干燥得浸膏; S2、将浸膏加水分散后,分别使用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,得不同部位的萃取物; S3、测定各部位萃取物中的抗炎和抗氧化活性,筛选活性最好的乙酸乙酯部位; S4、采用波谱手段测定乙酸乙酯活性部位的主要化合物结构; S5、对乙酸乙酯部位的化合物成分进行分离,包括采用硅胶、聚酰胺、反相ODS、葡聚糖凝胶多种柱色谱对乙酸乙酯部位进行分离,并通过制备高效液相色谱纯化,得到单体成分,最终获得39个活性化合物; 所述39个化合物分别为:4-methyl-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one1、糠酸甲酯2、对羟基苯甲醛3、香草醛4、对羟基苯乙酮5、对苯二酚6、3,4-dihydroxy-acetophenone7、ω-hydroxypropioguaiacone8、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸9、5,4'-dihydroxydihydrostilbene-3-O-β-D-glucopyranoside10、肉桂酸11、琥珀酸12、苯乙酸13、原儿茶酸14、对羟基苯乙酸15、methy-5-hydroxy-2-pyridinecarboxylate16、3-2-formyl-1H-pyrrol-1-ylpropanoicacid17、胸腺嘧啶18、3-吲哚乙酰胺19、Indole-3-carboxamide20、烟酰胺21、1H-indole-3-carboxaldehyde22、3-Hydroxy-5α,6α-epoxy-β-ionone23、地芰普内酯24、吐叶醇25、1,3,5-三甲氧基苯26、苄基-β-D-葡萄糖苷27、槲皮素28、木犀草素29、芹菜素-7-葡萄糖苷30、江户樱花苷31、鹅掌楸树脂醇A32、3-4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenylpropane-1,2-diol34、--7R,7'R,7''R,8S,8'S,8''S-4',4''-dihydroxy-3,3',3'',5,5'-pentamethoxy-7,9':7',9-diepoxy-4,8''-oxy-8,8'-sesquineolignan-7'',9''-diol35、HedyotolC36、去氢双松柏醇37、simulanol38、β-谷甾醇39、胡萝卜苷40; 所述步骤S5中,所述乙酸乙酯部位的分离方法,包括以下步骤:取乙酸乙酯部位提取物,100-200目硅胶拌样,硅胶柱装柱,先以石油醚:乙酸乙酯79:1,49:1,29:1,19:1,14:1,9:1,5:1,3:1,1:1,1:4,1:9,0:1,再以乙酸乙酯:甲醇79:1,39:1,19:1,9:1,4:1,2:1,0:1梯度洗脱,薄层色谱检测,合并相同流分,得E1-E12; E5及E8经反复重结晶得到了化合物39与化合物40; E7上凝胶柱色谱,甲醇洗脱纯化,再经制备高效液相色谱纯化,所述制备高效液相色谱纯化的条件为:3mLmin,MeOH:H2O=32:68,得到化合物3、化合物4、化合物5、化合物11; E8经ODS柱色谱,以甲醇:水0:10,1:9,2:8,3:7,4:6,5:5,6:4,7:3,8:2,9:1,10:0梯度洗脱,得到E8a-E8f6个流分,E8a经制备高效液相色谱再纯化,所述E8a经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=15:85,得到化合物6与化合物12; E8b经制备高效液相色谱再纯化,所述E8b经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=20:80,得到化合物1与化合物7;E8d经制备高效液相色谱再纯化,所述E8d经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=36:65,得到化合物23与化合物24; 用200-300目的硅胶湿法装柱,E9上样,以石油醚:乙酸乙酯50:1,25:1,9:1,8:1,7:1,6:1,5:1,4:1,3:1,2:1,1:1,0:1梯度洗脱,利用薄层色谱合并流分,得E9a-E9k11个流分;E9h经制备高效液相色谱再纯化,所述E9h经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=45:55,得到化合物25与化合物26;E9k经制备高效液相色谱再纯化,所述E9k经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=8:92,17:83,50:50,得到化合物9、化合物17、化合物18与化合物37;E9i经ODS柱色谱,以甲醇:水0:10,1:9,2:8,3:7,4:6,5:5,6:4,10:0,梯度洗脱,纯化得到4个流分即E9i1-E9i4;E9i2经制备高效液相色谱再纯化,所述E9i2经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=85:15,70:30,得到化合物2、化合物13、化合物14;E9i3经制备高效液相色谱再纯化,所述E9i3经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=65:35,55:45,40:60,得到化合物8、化合物16、化合物32; E10经聚酰胺色谱分离,以石油醚:二氯甲烷9:1,4:1,3:1,2:1,1:1,1:5,1:8,0:1,二氯甲烷:甲醇10:1,9:1,7:1,5:1,2:1,1:1,0:1为流动性梯度洗脱,利用薄层色谱检测,合并流分,得E10a-E10j共10个流分;E10c经制备高效液相色谱再纯化,所述E10c经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=82:18,得到化合物34、化合物35、化合物36;E10d经制备高效液相色谱再纯化,所述E10d经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=60:40,48:52,得到化合物19、38;E10e经制备高效液相色谱再纯化,所述E10e经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=55:45,得到化合物27;E10f经制备高效液相色谱再纯化,所述E10f经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=17:83,35:65,得到化合物15、化合物20;E10i经制备高效液相色谱再纯化,所述E10i经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=70:30,得到化合物29; E11经聚酰胺柱色谱分离,以石油醚:二氯甲烷1:0,9:1,3:1,2:1,1:1,0:1,二氯甲烷:甲醇90:1,70:1,50:1,25:1,20:1,15:1,10:1,9:1,5:1,2:1,1:1,0:1梯度洗脱,利用薄层色谱检测,合并流分,得E11a-E11j10个流分;E11b经制备高效液相色谱再纯化,所述E11b经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=10:90,得到化合物21;E11g经制备高效液相色谱再纯化,所述E11g经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=50:50,得到化合物28、化合物30、化合物31;E11h经制备高效液相色谱再纯化,所述E11h经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=58:42,45:55,得到化合物10;E11i经制备高效液相色谱再纯化,所述E11i经制备高效液相色谱再纯化的条件为3mLmin,MeOH:H2O=50:50,得到化合物22。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人云南农业大学;山东中医药大学,其通讯地址为:650201 云南省昆明市盘龙区金黑公路95号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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