华派生物技术(集团)股份有限公司向军获国家专利权
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龙图腾网获悉华派生物技术(集团)股份有限公司申请的专利一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119780429B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411952715.7,技术领域涉及:G01N33/569;该发明授权一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法是由向军;田丽梅;徐静;邱文英;易洁设计研发完成,并于2024-12-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法,属于兽用制品技术领域。该方法如下:1将猪圆环病毒2a、2b、2d型三价病毒样颗粒疫苗接种仔猪,再分离血清,获得猪圆环病毒2a、2b、2d型三价高免血清;2制备高盐琼脂板;3用高盐稀释液分别稀释三价高免血清和猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原,然后将稀释后的三价高免血清和猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原加入至琼脂板的孔洞中,35~37℃孵育20~24h完成检测。本发明使用高免血清及改进的琼扩方法来定量PCV2Cap蛋白含量的方法,避免了常用BCA或Bradford蛋白含量检测法对缓冲试剂耐受度低、检测特异性差等弊端。
本发明授权一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法在权利要求书中公布了:1.一种提高猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原琼扩检测灵敏度的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将猪圆环病毒2a、2b、2d型三价病毒样颗粒疫苗接种仔猪,再分离血清,获得猪圆环病毒2a、2b、2d型三价高免血清; 2制备高盐琼脂板; S1、以浓度为10~15gL的十二水磷酸氢二钠溶液作为甲液,浓度为1~3gL的磷酸二氢钾溶液作为乙液; S2、将甲液和乙液以1:2~5的比例混合,加入琼脂糖和氯化钠,获得混合液,并调节混合液体系pH值为中性,使混合液中的氯化钠浓度为70~80gL,加热至琼脂糖完全融化,再加入抗菌剂,倒入平皿,然后使其冷却凝固,打孔,再加热封闭孔底,制得高盐琼脂板; 3用高盐稀释液分别稀释三价高免血清和猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原,然后将稀释后的三价高免血清和猪圆环病毒2型Cap蛋白抗原加入至琼脂板的孔洞中,35~37℃孵育20~24h完成检测。
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