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龙图腾网获悉中国科学院遗传与发育生物学研究所申请的专利一种在基因组中定点插入外源序列的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117126876B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310599213.X，技术领域涉及：C12N15/82；该发明授权一种在基因组中定点插入外源序列的方法是由高彩霞;孙超设计研发完成，并于2023-05-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种在基因组中定点插入外源序列的方法在说明书摘要公布了：本发明属于基因工程领域。具体而言，本发明涉及一种在基因组中定点插入外源序列的方法。具体而言，本发明基于引导编辑系统PE，使用逆转录模板上带有部分重叠序列的两个相邻的pegRNA，在基因组特别是植物基因组中实现了高效且精准的外源序列定点插入。进一步将该系统与重组酶系统如CreLox或FLPFRT等相偶联，在基因组特别是植物基因组中实现了大片段外源序列定点插入。

本发明授权一种在基因组中定点插入外源序列的方法在权利要求书中公布了：1.一种用于在植物基因组中插入外源核苷酸序列的基因组编辑系统，其包含： iaCRISPR核酸酶和或含有编码所述CRISPR核酸酶的核苷酸序列的表达构建体，和逆转录酶和或含有编码所述逆转录酶的核苷酸序列的表达构建体，或 b引导编辑融合蛋白和或含有编码所述引导编辑融合蛋白的核苷酸序列的表达构建体，其中所述引导编辑融合蛋白包含CRISPR核酸酶和逆转录酶； ii第一pegRNA和或含有编码所述第一pegRNA的核苷酸序列的表达构建体， iii第二pegRNA和或含有编码所述第二pegRNA的核苷酸序列的表达构建体， iv重组酶和或含有编码所述重组酶的核苷酸序列的表达构建体，和 v包含一或多个所述重组酶的识别位点RS和待插入基因组中的第二外源核苷酸序列的供体构建体； 其中所述第一pegRNA从5’至3’方向包含第一引导序列、第一支架scaffold序列、第一逆转录模板RT序列和第一引物结合位点PBS序列， 其中所述第二pegRNA从5’至3’方向包含第二引导序列、第一支架scaffold序列、第二逆转录模板RT序列和第二引物结合位点PBS序列， 其中所述第一pegRNA靶向植物基因组DNA有义链上的第一靶序列，所述第二pegRNA靶向植物基因组DNA反义链上的第二靶序列， 其中所述第一RT序列和所述第二RT序列用于插入第一外源核苷酸序列，所述第一外源核苷酸序列包含一或多个重组酶的识别位点RS； 其中所述重组酶是Cre重组酶或FLP重组酶。

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