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龙图腾网获悉河北平朴生物科技合伙企业(有限合伙)申请的专利一种A型重组肉毒素的纯化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118126144B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410292943.X，技术领域涉及：C07K14/33；该发明授权一种A型重组肉毒素的纯化方法是由郝威;刘昊;殷休;武子浩;崔孟璞;白东伟;刘金豆;闫烁;孙颖娇;王乐;关磊;刘卿;李允;孟新悦;赵钰涵;郭文;徐玉平;楼素芬;蒋睿峰设计研发完成，并于2024-03-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种A型重组肉毒素的纯化方法在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种A型重组肉毒素的纯化方法。所述纯化方法包括以下步骤：收集发酵液，破碎菌体后，得到破碎液；向破碎液中加入絮凝剂进行澄清，澄清后离心除杂质，得到澄清液；将澄清液加入到离子层析柱中进行离子层析，得到离子层析液；向离子层析液中加入凝血酶进行酶切，得到酶切液；将酶切液加入到疏水层析柱中进行疏水层析，得到疏水层析液；对疏水层析液进行超滤浓缩，得到超滤浓缩液；将超滤浓缩液加入到分子筛层析柱进行分子筛层析，得到纯化的A型重组肉毒素。所述纯化方法与现有技术相比可有效去除杂质蛋白，且不影响轻链和重链的完整性，氨基酸序列覆盖率为100％，也不影响氨基酸序列覆盖率为100％。

本发明授权一种A型重组肉毒素的纯化方法在权利要求书中公布了：1.一种A型重组肉毒素的纯化方法，其特征在于，所述A型重组肉毒素由大肠杆菌BL21DE3表达；编码所述A型重组肉毒素的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示； 所述纯化方法包括以下步骤： 1收集发酵液，破碎菌体后，得到破碎液； 2向所述破碎液中加入絮凝剂进行澄清，澄清后离心除杂质，得到澄清液；所述的絮凝剂为0.1%vvPDADMAC； 3向所述澄清液加入NaCl溶液，直至澄清液中NaCl的浓度为0.07-0.10molL，调节pH至8.0后，加入到阳离子层析柱中进行阳离子交换层析，得到离子层析液，所述阳离子层析柱为SP柱，所述SP柱为MaXtarSPHR，所述离子层析的缓冲液为20mMTris-HCl，pH8.0，洗脱液为20mMTris-HCl，1molLNaCl，pH8.0； 4向离子层析液中加入凝血酶进行酶切，得到酶切液； 5向所述酶切液中加入NH42SO4至1molL后，调节pH至7.0后，加入到疏水层析柱中进行疏水层析，平衡液为20mMTris-HCl，1molLNH42SO4，pH7.0；洗脱液为20mMTris-HCl，pH7.0，平衡液和洗脱液的体积比为50%洗杂，平衡液和洗脱液的体积比为60%洗脱，得到疏水层析液，所述疏水层析柱为PhenylChromstarHP； 6对所述疏水层析液进行超滤浓缩，得到超滤浓缩液，所述超滤浓缩采用30KD超滤膜包； 7将所述超滤浓缩液加入到分子筛层析柱进行分子筛层析，得到纯化的A型重组肉毒素；所述分子筛层析柱为HiLoadSuperdex200pg。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人河北平朴生物科技合伙企业(有限合伙)，其通讯地址为：065500 河北省廊坊市固安县新兴产业示范区肽谷生物医药孵化产业园1期孵化楼2层215室；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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