中国肉类食品综合研究中心王守伟获国家专利权
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龙图腾网获悉中国肉类食品综合研究中心申请的专利实时荧光定量PCR检测猪肌肉调节因子的引物组及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN111826451B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202010955451.6,技术领域涉及:C12Q1/6888;该发明授权实时荧光定量PCR检测猪肌肉调节因子的引物组及其应用是由王守伟;李雨爽;李石磊;李莹莹设计研发完成,并于2020-09-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本实时荧光定量PCR检测猪肌肉调节因子的引物组及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了实时荧光定量PCR检测猪肌肉调节因子的引物组及其应用,属于生物技术领域。本发明提供能够检测猪肌肉调节因子MyoD、MyoG的特异性引物对以及内参引物对,通过提取样品RNA并进行反转录得到cDNA,利用提供的引物进行实时荧光PCR,能够快速、特异、灵敏、稳定的同时检测猪肌肉调节因子MyoD、MyoG的mRNA表达量,可用于检测猪肌肉干细胞分化前后调节因子表达水平的变化,从而对猪培育肉的分化情况进行判断。
本发明授权实时荧光定量PCR检测猪肌肉调节因子的引物组及其应用在权利要求书中公布了:1.一种用于检测猪肉肌肉调节因子表达量的引物组在检测猪培育肉中肌肉干细胞增殖分化程度中的应用,其特征在于,所述引物组包括MyoD和MyoG两个调节因子的引物对和内参引物对,所述引物对序列如下所示: 1用于检测MyoD的特异性引物对: MyoD-F:5'-CACTACAGCGGTGACTCAGA-3'; MyoD-R:5'-GCTGTAATAGGTGCCGTCGT-3'; 2用于检测MyoG的特异性引物对: MyoG-F:5'-CTTCTACCAGGAACCCCACTTCT-3'; MyoG-R:5'-GTCCCCAGCCCCTTATCTTC-3'; 3内参引物: GAPDH-F:5'-ACTCACTCTTCTACCTTTGATGCT-3'; GAPDH-R:5'-TGTTGCTGTAGCCAAATTCA-3'; 所述检测猪培育肉中肌肉干细胞增殖分化程度的步骤为: 1从待测样品中提取总RNA,进行反转录反应,得到待测cDNA; 2以所述待测cDNA作为模板,用所述的引物组在Roche480荧光定量PCR仪上进行实时荧光定量PCR反应; 3反应结束后,根据Roche480荧光定量PCR仪自带软件计算所述待测样品中肌肉调节因子的表达量; 4通过检测样品中MyoD和MyoG相对于培养首日的相对表达量来判断样品的增殖分化程度; 当MyoD、MyoG的表达量相对于肌肉干细胞增殖分化前开始升高,说明细胞开始分化,如果MyoG的相对表达量高于MyoD,说明细胞已经分化为肌肉细胞。
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