买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉南京歆佳医药科技有限公司申请的专利一种斑马鱼中条件性诱导kdrl基因敲除用于研究血管生长的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN112111512B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202010718925.5，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权一种斑马鱼中条件性诱导kdrl基因敲除用于研究血管生长的方法是由顾珊烨设计研发完成，并于2020-07-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种斑马鱼中条件性诱导kdrl基因敲除用于研究血管生长的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种斑马鱼中条件性诱导用于研究kdrlvegfr2基因在血管生长研究的方法，包括如下步骤：1利用非同源末端连制备kdrl条件性敲除品系；2利用标记血管内皮细胞的转基因品系与kdrl条件性敲除品系杂交，建立双转基因品系；3CremRNA注射至上述双转基因品系内交产生的胚胎中实现kdrl敲除，并通过荧光观察和评价血管生长的异常。

本发明授权一种斑马鱼中条件性诱导kdrl基因敲除用于研究血管生长的方法在权利要求书中公布了：1.一种斑马鱼中条件性诱导kdrl基因敲除用于研究血管生长的方法，其特征在于包括如下步骤： 1在斑马鱼kdrl的第12个外显子两端寻找两个核酸酶的特异识别位点，所述的特异识别位点为sgRNA1靶点和sgRNA2靶点； 2构建非同源末端连接的敲入质粒，敲入质粒含有左同源臂序列和左同源臂序列中，左臂含有这其中一个核酸酶识别位点sgRNA1，右臂含有另一个核酸酶识别位点sgRNA2，左右臂之间含有需要置换的外源基因的核苷酸序列，包括第12个外显子两侧的loxP位点和可用于筛选的心肌细胞标记红色荧光蛋白；sgRNA1的靶点序列为：Gtaaacagtctgtgaacccc；sgRNA2的靶点序列为：Gtgagaggggtacagtacgg；所述的左同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO：1中的第7-692位所示，所述的右同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO：1中的第2577-3873位所示，所述的右臂之间含有需要置换的外源基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1中的第693-2576位所示；所述的构建非同源末端连接的敲入质粒的左同源臂、右同源臂，以斑马鱼基因组为模板，并在PCR引物加入酶切位点和保护碱基扩增获得；第四个外显子两个loxP位点间的序列，以斑马鱼基因组为模板，以loxP和frt融合序列PCR引物扩增获得loxP-kdrl_exon12-frt融合序列，PCR引物加入酶切位点和保护碱基；可用于筛选的心肌细胞标记红色荧光蛋白序列，以loxP和frt融合序列PCR引物扩增获得loxP-myl7-DsRed-pA-frt融合序列，PCR引物加入酶切位点和保护碱基； 3将核酸酶体系显微注射到斑马鱼受精卵中，所述核酸酶体系包括Cas9蛋白或产生Cas9蛋白的mRNA、sgRNA1、sgRNA2和kdrl敲入质粒； 4将注射后的受精卵培养成鱼，通过荧光和基因型鉴定确认kdrl条件性敲除斑马鱼； 5利用现有技术中已知的标记斑马鱼血管内皮细胞的转基因品系Tgflk1:EGFP与上述条件性敲除品系杂交，通过荧光筛选获得双转基因品系； 6将CremRNA注射至上述的双转基因内交产生的胚胎中，3天后斑马鱼胚胎用于鉴定kdrl的删除、整体表型观察和血管生长的表型观察。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人南京歆佳医药科技有限公司，其通讯地址为：211100 江苏省南京市江宁区芝兰路18号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。