新泽西鲁特格斯州立大学F·R·克雷默获国家专利权
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龙图腾网获悉新泽西鲁特格斯州立大学申请的专利检测稀有序列变体的测定方法和试剂盒获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114555829B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202080069243.4,技术领域涉及:C12Q1/6858;该发明授权检测稀有序列变体的测定方法和试剂盒是由F·R·克雷默;D·瓦尔加斯-戈尔德设计研发完成,并于2020-10-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本检测稀有序列变体的测定方法和试剂盒在说明书摘要公布了:本发明涉及分析核酸的方法。本公开提供了引物依赖性扩增的方法和检测方法,所述检测方法能够在存在大量密切相关的非目标靶序列的情况下在样品中扩增和检测少至十个拷贝的至少一种稀有目标靶序列。还提供了用于实施所述方法的反应组合物和试剂盒。
本发明授权检测稀有序列变体的测定方法和试剂盒在权利要求书中公布了:1.对稀有DNA目标靶序列特异但与密切相关的非目标靶序列错配的正向引物和反向引物的引物对在制备用于非对称引物依赖性的扩增和检测方法的试剂盒中的用途,所述方法包括: a制备非对称引物依赖性扩增反应混合物,其包含样品、DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸、扩增缓冲液、用于检测扩增产物的同类荧光检测工具,其中同类荧光检测工具包含针对每种稀有DNA目标靶序列的分子信标探针,以及针对每种稀有DNA目标靶序列的对所述稀有DNA目标靶序列特异但与密切相关的非目标靶序列错配的由正向引物和反向引物组成的引物对, b通过所述非对称引物依赖性的扩增方法重复循环所述非对称引物依赖性扩增反应混合物以扩增所述样品中存在的每种稀有DNA目标靶序列,和 c通过测量来自同类荧光检测工具的荧光强度来检测该稀有DNA目标靶序列; 其中i所述正向引物是超选择性引物,其从5'端到3'端包含长于足序列的第一锚定序列、与稀有DNA目标靶序列和密切相关的非目标靶序列都不互补的第一桥序列和与所述密切相关的非目标靶序列在其3'-末端或3'-倒数第二个核苷酸上错配且与稀有DNA目标靶序列互补的第一足序列,和ii所述反向引物是超选择性引物,其从5'端到3'端包含长于足序列的第二锚定序列、与稀有DNA目标靶序列和密切相关的非目标靶序列的互补物都不互补的第二桥序列和与所述密切相关的非目标靶序列的互补物在其3'-末端或3'-倒数第二个核苷酸上错配且与所述密切相关的非目标靶序列的互补物互补的第二足序列;并且 其中所述方法扩增并检测样品中少至十个拷贝的至少一种稀有DNA目标靶序列,所述稀有DNA目标靶序列处于含有对于每种稀有DNA目标靶序列而言10,000个拷贝的与所述稀有DNA目标靶序列的不同之处在于少至一或两个碱基对的密切相关的非目标靶序列的混合物中。
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