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龙图腾网获悉信立泰(苏州)药业有限公司申请的专利一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119410682B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510022774.2，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法是由郭伟;周若飞;邓全宇;王康设计研发完成，并于2025-01-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法，通过两轮不同浓度的抗生素筛选，获得能够高表达特立帕肽的大肠杆菌生产菌株，并且在不添加抗生素的条件下依然有效地维持了在菌种传代过程中质粒的稳定性。本发明的定向筛选方法不仅能够有效提升特立帕肽高产菌的筛选效率，而且克服了生物药在生产过程中需要添加抗生素的技术难点。

本发明授权一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种利用抗生素定向筛选特立帕肽高产菌的方法，其特征在于，所述方法包括： 1质粒构建：构建特立帕肽表达质粒，所述质粒选自pThioHisA且包含特立帕肽编码基因，其中pThioHisA质粒上的氨苄青霉素抗性基因片段被替换为卡那霉素抗性基因片段； 2转化：将步骤1构建的表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞HB101中，培养获得重组菌菌液； 3初筛：取步骤2的菌液涂布于含有70μgml卡那霉素的固体培养基上进行恒温培养至出现单菌落，挑取生长良好的单菌落分别接种到发酵培养基中进行蛋白表达，挑选若干个目的蛋白表达量≥20％的菌株作为初筛菌株； 4复筛：取步骤3各初筛菌株的菌液，每株菌分别涂布于含有125μgml、150μgml、175μgml以及200μgml卡那霉素的固体培养基上进行恒温培养至出现单菌落，挑取生长良好的单菌落接种到发酵培养基中进行蛋白表达，挑选能够同时在4个卡那霉素浓度梯度下生长且目的蛋白表达量≥25％的菌株作为复筛菌株； 5传代稳定性评估：将步骤4的各复筛菌株进行传代，以及每代菌株接种到发酵培养基中进行蛋白表达，检测各代菌株的质粒保有率和目的蛋白表达量，选择多次传代质粒保有率≥90％且表达量高的菌株作为候选的高产菌株； 其中，步骤3-步骤5中，菌株接种到发酵培养基中进行蛋白表达以及复筛菌株进行传代的过程中均不添加卡那霉素；所述传代次数≥15。

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