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龙图腾网获悉中国人民解放军军事科学院军事医学研究院申请的专利一种基于免疫磁珠-适配体禽流感病毒H5N1 SERS检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116046747B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211652860.4，技术领域涉及：G01N21/65；该发明授权一种基于免疫磁珠-适配体禽流感病毒H5N1 SERS检测方法是由王凯;李乾学;周博设计研发完成，并于2022-12-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于免疫磁珠-适配体禽流感病毒H5N1 SERS检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于免疫磁珠‑适配体禽流感病毒H5N1SERS检测方法，包括以下步骤：S1、H5N1适配体捕获免疫磁珠的制备将Apt1适配体10μL，1.847μgμL95℃变性15min，随后迅速放置冰上15min，在静置时，将链霉素亲和磁珠通过旋转20s重悬于原瓶中，取0.2mg链霉素亲和磁珠于离心管中，置于磁力架上静置1min，加入500μLPBS洗涤，重复洗涤3次。本发明基于链霉素亲和磁珠捕捉系统联合SERS技术，建立的SERS免疫磁珠原位还原检测禽流感病毒的方法可达到原位、无损、高效、特异性强、灵敏度高、快速、低浓度的检测水平，解决了SERS本身特异性的问题，为H5N1亚型禽流感病毒提供了一种新的检测思路。

本发明授权一种基于免疫磁珠-适配体禽流感病毒H5N1 SERS检测方法在权利要求书中公布了：1.一种基于免疫磁珠-适配体禽流感病毒H5N1SERS检测方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、H5N1适配体捕获免疫磁珠的制备 将10μL浓度为1.847μgμL的Apt1适配体经95℃变性15min，随后迅速放置冰上15min，在静置时，将链霉素亲和磁珠通过旋转20s重悬于原瓶中，取0.2mg链霉素亲和磁珠于离心管中，置于磁力架上静置1min，加入500μLPBS洗涤，重复洗涤3次，取折叠后的Apt1适配体室温孵育30min，磁分离后，未结合的游离适配体用PBS溶液洗涤3次，即可制成适配体捕获免疫磁珠。随后加入200μLH5N1病毒，待充分混匀后置于冰箱中4℃孵育1h，每隔20min重悬一次以保证磁珠始终处于悬浮状态，通过磁性分离，将未偶联的病毒洗脱，从而制备H5N1适配体捕获免疫磁珠； S2、免疫磁珠-适配体夹心免疫复合物的制备 在H5N1适配体捕获免疫磁珠的基础上，加入20μL浓度为1.847μgμL的折叠后的Apt2，待充分混匀后置于冰箱中4℃孵育30min，这此期间保证磁珠处于悬浮状态，随后，将H5N1适配体捕获免疫磁珠偶联上折叠后的Apt2，即可形成共轭的三明治IMBSIs，用移液器将IMBSIs在PBS溶液中进行清洗，并随后进行磁性分离； S3、IMBSIs@AgNPs的合成 采用ShameliK方法通过NaBH4作还原剂对AgNO3还原合成AgNPs，通过在室温条件下调节二者的比例浓度与孵育时间合成最佳的AgNPs，取制备好的IMBSIs，分散到现配制的50μL浓度为10mMAgNO3溶液中，充分混匀，避光4℃孵育10min，孵育期间令溶液始终处于悬浮状态，之后匀速加入50μL现配制的10mMNaBH4溶液，混匀反应1min，立即于1000rpm离心1min，弃掉上清，用50μL无菌去离子水重悬，即可制备成IMBSIs@AgNPs； S4、H5N1亚型禽流感病毒SERS检测方法的建立 检测前使用硅片进行仪器校正，以520.7cm-1处的拉曼峰作为基准峰，拉曼光谱仪参数设置为：拉曼光谱扫描范围为500-2000cm-1，使用532nm的He-Ne激光进行激发，激光功率为13.5mW，激光功率密度为0.214mW⋅um-2，物镜选择50倍，激光衰减参数选择1%，分辨率设置为1cm-1，曝光时间为1min，积分次数为3次，为了提高信噪比，随机检测15到30个点，取10μL待测样品滴至酸液浸泡洗涤并冲洗干净的石英载玻片中央，进行拉曼信号采集，最终数据分析均采用Originsoftware8.5软件。

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