朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司陈忠平获国家专利权
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龙图腾网获悉朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司申请的专利一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有治疗肝损伤作用的药物中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117100785B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311106377.0,技术领域涉及:A61K31/198;该发明授权一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有治疗肝损伤作用的药物中的应用是由陈忠平设计研发完成,并于2023-08-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有治疗肝损伤作用的药物中的应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有治疗肝损伤作用的药物中的应用,所述含干细胞外泌体的组合物按重量份计包括:0.1‑0.5份脐带间充质干细胞外泌体、3‑6份葛根提取物、0.2‑1份蜂蜜、0.06‑0.32份复合维生素、0.3‑0.7份橄榄油、0.08‑0.2份淀粉、0.03‑0.15份谷氨酸、0.03‑0.15份半胱氨酸、0.03‑0.15份甘氨酸、0.05‑0.35份葡萄糖醛酸内酯、0.05‑0.18份羧甲基纤维素钠、22‑37份去离子水。干细胞外泌体可以通过受体细胞的转录组和蛋白质组,来调节细胞凋亡、生长、增值和分化途径,从而延缓肝脏疾病的发生发展,葛根提取物富含多种黄酮类和异黄酮类物质,可以促进肝细胞再生,协同其他组分为肝脏提供所需营养,有效治疗肝损伤。
本发明授权一种含干细胞外泌体的组合物及其在制备具有治疗肝损伤作用的药物中的应用在权利要求书中公布了:1.一种含干细胞外泌体的组合物,其特征在于,所述含干细胞外泌体的组合物按重量份计包括:0.1-0.5份脐带间充质干细胞外泌体、3-6份葛根提取物、0.2-1份蜂蜜、0.06-0.32份复合维生素、0.3-0.7份橄榄油、0.08-0.2份淀粉、0.03-0.15份谷氨酸、0.03-0.15份半胱氨酸、0.03-0.15份甘氨酸、0.05-0.35份葡萄糖醛酸内酯、0.05-0.18份羧甲基纤维素钠、22-37份去离子水; 所述脐带间充质干细胞外泌体的制备方法为: S1、取脐带组织,放入PBS缓冲液中清洗3次,每次8-10min,去除动静脉得到沃顿胶,将沃尔顿胶剪碎成4-6mm的组织块,用去离子水冲洗15-30min,再用PBS缓冲液清洗5次,每次5-8min,得到组织块; S2、将组织块、胶原酶I溶液按照重量比1:0.2-0.28混合,反应15-30min,得到混合料; S3、将混合料置于800-1200rmin条件下离心20-30min,过0.4μm无菌滤膜,得到细胞沉淀,用PBS缓冲液洗涤3次; S4、用平衡盐缓冲溶液洗涤细胞沉淀3次,再用2倍体积的平衡盐缓冲液重悬细胞,利用密度梯度离心法纯化细胞悬液,得到脐带间充质元代干细胞; S5、将脐带间充质元代干细胞以1×10个ml的密度接种至培养基中,放置于培养箱中培养2-4d,传代次数控制在P10以内,待细胞融合率达到80-90%时,收集培养液上清液,即第一清液; S6、将第一清液于4℃、1800rmin条件下离心10-30min,收集上清液,超滤浓缩去除小分子后,过0.3μm无菌滤膜过滤除菌,得到脐带间充质细胞沉淀; S7、将脐带间充质细胞沉淀用PBS缓冲液洗涤3次,以1×10个ml的密度接种至无血清培养基中,放置于培养箱中培养42-48h,收集培养液上清液,即第二清液; S8、将第二清液移至质量浓度为30%蔗糖重水密度垫上在4℃下,80000-160000g密度梯度离心120min,收集底部缓冲垫; S9、将底部缓冲垫经PBS溶液洗涤3次后,超滤浓缩去除小分子后,过0.25μm无菌滤膜过滤除菌,得到脐带间充质干细胞外泌体; 所述葛根提取物的制备方法为: S21、将葛根用去离子水清洗,100W、20℃下超声处理15min,烘干,粉碎至20-40目,得到葛根粉末; S22、将葛根粉末、65-85%乙醇溶液按照重量比1:5-8混合,40-50℃下浸提30-90min,离心,过滤,得到第一提取液; S23、将第一提取液和活性炭按照重量比为1:0.006-0.018混合后,离心,过滤,得到第二提取液; S24、将第二提取液和1.5%壳聚糖溶液按照重量比为1:0.002-0.01混合,离心,过滤,得到第三提取液; S25、将第三提取液通入填有大孔树脂的吸附柱中,洗脱速度为2-3BVh,用3倍树脂柱体积的去离子水以1.5-2.5Vh、2倍树脂柱体积的50wt%乙醇溶液以1-3BVh的流速冲洗吸附柱,收集乙醇溶液,即得葛根提取物。
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