买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉广东省农业科学院农业生物基因研究中心申请的专利一种同时检测蛋白质磷酸化和S-亚硝基化的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120084919B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510570306.9，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种同时检测蛋白质磷酸化和S-亚硝基化的方法是由张文洋;晏石娟;王炎姣;李文燕;黄文洁;叶明洋;谭国督设计研发完成，并于2025-05-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种同时检测蛋白质磷酸化和S-亚硝基化的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种同时检测蛋白质磷酸化和S‑亚硝基化的方法，利用磷酸亲和标签标记S‑亚硝基化的蛋白质，将S‑亚硝基化修饰转化为磷酸化模拟型标签，从而能够使用常规的磷酸化蛋白质组学技术同时富集并分析S‑亚硝基化和磷酸化这两种修饰，且通过对模型蛋白和复杂生物样品的测试，我们验证了该方法灵敏度高、重复性好，具有广泛的蛋白质覆盖范围，与传统单独富集方法相当，克服了分析不同化学性质修饰的技术挑战，为综合研究PTM交叉对话提供了可靠的工具。

本发明授权一种同时检测蛋白质磷酸化和S-亚硝基化的方法在权利要求书中公布了：1.一种同时检测蛋白质磷酸化和S-亚硝基化的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 1蛋白质标记前用碘乙酰胺封闭游离硫醇，接着通过沉淀蛋白去除杂质，具体步骤如下：蛋白重悬于HENS缓冲液中，加入碘乙酰胺至终浓度100mM，随后在37°C下振荡孵育1小时，将混合物涡旋，加入丙酮沉淀蛋白，或使用酚抽提蛋白后加入甲醇沉淀蛋白，离心后，蛋白质沉淀洗涤并在空气中干燥；再用抗坏血酸钠还原S-亚硝基化修饰，并用磷酸亲和标签标记S-亚硝基化的蛋白质，将S-亚硝基化修饰转化为磷酸化模拟型标签；所述磷酸亲和标签由三个关键部分组成：具有硫醇反应性的碘乙酰基、烷基间隔段和特定的磷酸标签；所述磷酸亲和标签为碘乙酰胺基-LC-膦酸，其结构为：；随后用丙酮沉淀蛋白以去除多余的6C-CysPAT试剂；复溶蛋白后用三2-羧乙基膦2-氯乙酰胺还原并封闭二硫键，最后蛋白质被胰蛋白酶酶解成肽段，得到磷酸化肽、PAT标记肽和未修饰肽的混合物； 2使用常规的磷酸化蛋白质组学技术同时富集并分析步骤1标记后蛋白质被胰蛋白酶酶解的酶解物中S-亚硝基化肽和磷酸化肽段，所述常规的磷酸化蛋白质组学技术包括通过固定化金属离子亲和层析实现S-亚硝基化肽和磷酸化肽的同时富集，然后借助液相色谱-串联质谱进行联合检测；固定化金属离子亲和层析采用磷酸捕获柱； 在富集和分析前，采用高pH反相高效液相色谱对混合肽段进行分馏，使用WatersXBridgeBEH130C18柱和Ultimate3000HPLC系统在1mLmin流速下对3.6mg肽段进行分馏，分离采用pH10的10mM甲酸铵缓冲液A和pH10的含90%乙腈的10mM甲酸铵缓冲液B，梯度为60分钟：1%到25%缓冲液B在48分钟内，5分钟内增加到60%，2分钟内增加到70%，保持70%5分钟，然后回到1%；在214和280nm处监测UV吸光度，前60分钟每分钟收集一次馏分，然后将60个馏分等间隔合并为12个馏分组，随后真空干燥。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人广东省农业科学院农业生物基因研究中心，其通讯地址为：510640 广东省广州市天河区金颖路20号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。