合肥工业大学;山东立新制药有限公司张心钰获国家专利权
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龙图腾网获悉合肥工业大学;山东立新制药有限公司申请的专利定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D及其制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120366352B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510577149.4，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D及其制备方法和应用是由张心钰;肖钰燕;刘嘉荔;杨静文;李宜明设计研发完成，并于2025-05-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D及其制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明提供了定向催化D‑邻氯苯甘氨酸转化为L‑邻氯苯甘氨酸的融合酶L‑2FL‑D及其制备方法和应用，属于酶工程技术领域。本发明使用无缝克隆技术将线性化载体与插入片段进行同源重组，获得融合酶L‑2FL‑D原核表达载体。将融合酶L‑2FL‑D表达载体在宿主细胞中表达，获得融合酶L‑2FL‑D。本发明以D‑邻氯苯甘氨酸和L‑谷氨酸钠盐为底物，在辅酶的作用下，D‑邻氯苯甘氨酸向L‑邻氯苯甘氨酸的定向转化效果十分显著，底物转化率达到98％，在生产L‑邻氯苯甘氨酸方面具有极高的应用价值。
本发明授权定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D及其制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： S1.以pET28a-DAAO-6×His质粒为模板，以引物对FR为引物进行扩增，获得插入片段； S2.以pET28a-LAspAT-6×His质粒为模板，以载体引物V-FV-R进行扩增，获得线性化克隆载体； S3.将线性化载体与插入片段进行同源重组，获得融合酶L-2FL-D原核表达载体； S4.将融合酶L-2FL-D原核表达载体在宿主细胞中表达，获得所述定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D； 定向催化D-邻氯苯甘氨酸转化为L-邻氯苯甘氨酸的融合酶L-2FL-D的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示； 所述引物V-F的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，所述引物V-R的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示； 上游引物F的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示，下游引物R的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示。
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