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龙图腾网获悉华南农业大学;岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心申请的专利一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116482065B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310254641.9，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法是由罗林;康瑞瑶;徐振林;贾宝珠;何镇熹;王弘;沈玉栋;雷红涛;杨继国设计研发完成，并于2023-03-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法，其包括以下步骤：S1.合成红色荧光牛血清蛋白包被金纳米簇：S2.微孔板的包被；S3.标准曲线的建立；S4.样品中丁香酚类物质的测定。本发明基于两个荧光材料发射峰荧光强度的比值变化进行免疫分析，由于两个荧光材料受到的外界的干扰是一样的，两者的荧光强度比值一定程度上抵消了温度、极性、荧光团浓度等外界因素的干扰，具有自带内标效应，因此具有更高精密度、信噪比及灵敏度。该方法较传统仪器方法，更为简单快捷，检出限低至0.50pgmL，可用于测定水产品中丁香酚、异丁香酚、丁香酚甲醚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚6种麻醉剂，应用前景广阔。

本发明授权一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法在权利要求书中公布了：1.一种广谱检测丁香酚类物质的比率荧光免疫分析方法，其特征在于，其包括以下步骤： S1.合成牛血清蛋白包被金纳米簇：将一定浓度的氯金酸溶液与等量牛血清蛋白溶液混合，加入适量的氢氧化钠溶液，将溶液pH调至碱性，加热反应过夜，反应完成后得到红色荧光牛血清蛋白包被的金纳米簇水溶液，于冰箱避光保存，使用时稀释； S2.微孔板的包被：将丁香酚包被原加入微孔板中，在冰箱静置一段时间，洗去包被液；将板拍干，加入一定体积封闭液，温育一段时间后，将板拍干，于烘箱中烘干，储存备用； S3.标准曲线的建立：将不同浓度的丁香酚类物质标准溶液与丁香酚单克隆抗体同时加入步骤S2得到的微孔板中，温育一定时间后，洗板，加入辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗，温育一段时间后洗板，加入H2O2和OPD溶液温育，随后加入步骤S1制备的红色荧光牛血清蛋白包被的金纳米簇水溶液，温育，在360nm激发下，记录400～750nm范围内的荧光发射光谱；计算荧光强度比值F570F670，以丁香酚类物质浓度为横坐标，F570F670为纵坐标绘制标准曲线； S4.样品中丁香酚类物质浓度的测定：将等体积处理好的样品替代丁香酚类物质标准品溶液，按照步骤S3的步骤操作，将测到的F570F670代入所述步骤S3得到的标准曲线，以得到样品中丁香酚类物质浓度； 所述步骤S1中，氯金酸溶液的浓度为10~20mM，牛血清蛋白溶液的浓度为50~60mgmL； 所述步骤S1中，氯金酸溶液与牛血清蛋白溶液的加热温度为37℃，反应10～14h； 所述步骤S2中，丁香酚包被原体积100μL，静置12～15h； 所述步骤S2中，封闭液需100～200μL，封闭1～3h； 所述步骤S3中，丁香酚单克隆抗体的浓度为1～5μgL，温育的时间为30～40min； 所述步骤S3中，H2O2和OPD溶液浓度为0.5mM~5mM，温育的时间为30～40min。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人华南农业大学;岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心，其通讯地址为：510642 广东省广州市天河区五山街五山路483号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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