浙江工业大学项宁获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江工业大学申请的专利一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP-1类似物的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119219759B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411474369.6,技术领域涉及:C07K14/605;该发明授权一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP-1类似物的方法是由项宁;邢醴天;余亚希;邹子楠;徐绍兴;王旭东设计研发完成,并于2024-10-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP-1类似物的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及生物分离纯化技术领域,公开了一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP‑1类似物的方法。针对GLP‑1类似物发酵液,本发明通过调节亲水性有机溶剂和可溶性无机盐之间的比例,形成两个水相层,从而实现了GLP‑1类似物的高效富集,为GLP‑1类似物的分离纯化提供了一条全新的技术途径,进一步地,高效富集后的粗产物可以通过反向制备液相色谱法进行纯化处理,得到高纯度的GLP‑1类似物。本发明提供的方法简单高效,适合工业化生产,填补了发酵液中GLP‑1类似物分离纯化的技术空白。
本发明授权一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP-1类似物的方法在权利要求书中公布了:1.一种双水相萃取耦合反相柱层析分离纯化发酵液中GLP-1类似物的方法,其特征在于:包括以下步骤: 在0~30℃下,往GLP-1类似物发酵液中添加无机盐和亲水性有机溶剂,混悬均匀,调节pH为8.5~10.5,离心使体系分相,取上相通过肠激酶酶切后采用反向制备液相色谱法进行纯化处理;其中: 以体系的总质量计,无机盐的添加量为10%~35%,亲水性有机溶剂的添加量为15%~40%; 所述无机盐和亲水性有机溶剂选自为异丙醇与硫酸铵的组合、异丙醇与磷酸氢二钾的组合、异丙醇与柠檬酸钠的组合、乙醇与硫酸铵的组合、乙醇与磷酸氢二钾的组合中的任意一种组合; GLP-1类似物发酵液的蛋白浓度为9~13mgmL; 所述GLP-1类似物为司美格鲁肽前体,所述司美格鲁肽前体的氨基酸序列为:EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGRG。
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