中国科学院水生生物研究所郑劲松获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院水生生物研究所申请的专利双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN121450816B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202512037150.0，技术领域涉及：C12Q1/6888；该发明授权双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法及应用是由郑劲松;梅志刚;薛梦涵;范飞设计研发完成，并于2025-12-31向国家知识产权局提交的专利申请。
本双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法及应用在说明书摘要公布了：本发明属于生物检测技术领域，具体公开了一种双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法及应用。该方法通过设计两对特异性引物探针，实现在单一反应体系中对两个靶点的同步鉴别及拷贝数精确定量，与单靶标相比增大了长江江豚环境DNA检出率，具有极高的物种特异性、灵敏性和准确性。本发明为开展野外长江江豚分布现状的调查提供了技术支撑和理论依据，对长江江豚保护工作具有重要意义。该方法特异性强且检测灵敏度高，能够实现对痕量长江江豚环境DNA的精准捕捉。实验数据显示，本方法的最低检出限可达0.2copiesμL，且在此浓度下的检出率为100%，即便是在0.1copiesμL的极低浓度下，检出率仍不低于80%。
本发明授权双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种双靶标数字化检测长江江豚环境DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤： 采集环境样本并提取环境DNA； 以环境样本中的环境DNA为模板，在单一反应体系中利用第一引物探针组合和第二引物探针组合进行液滴数字PCR扩增； 根据液滴数字PCR产生的荧光信号，通过数据阅读设备根据泊松分布统计公式计算得出绝对拷贝数，判断样本中是否存在长江江豚DNA； 所述第一引物探针组合包括： 上游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示； 下游引物，其核苷酸序列SEQIDNO.4所示； 探针，其核苷酸序列如SEQIDNO.11所示； 所述第二引物探针组合包括： 上游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.7所示； 下游引物，其核苷酸序列SEQIDNO.8所示； 探针，其核苷酸序列如SEQIDNO.12所示； 所述液滴数字PCR扩增的退火温度为64℃，各探针在所述单一反应体系中的终浓度均为200nM。
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