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一种提升建立CRISPR核酸检测一步法的效率和检测灵敏度的方法
本发明提供了一种提升建立CRISPR核酸检测一步法的效率和检测灵敏度的方法, 具体的, 本发明提供了用于构成gRNA的同向重复(Direct Repeat, DR)序列, 以及含有所述同向重复序列的向导RNA, 本发明首次发现, 在一步法的...
利用循环置换II类内含子核酶生产环形RNA的方法及应用
本发明提供了利用循环置换(CP)II类内含子核酶生产环形RNA的方法及应用。具体地, 本发明人提供了一种重组的用于制备环形RNA的多核苷酸, 利用天然或改造后的CP II类内含子构建了生成环形RNA的前体, 可用于目标RNA序列的环化。由C...
引导编辑系统
本发明涉及引导编辑系统, 具体涉及一种pegRNA、pegRNA组合、用于表达该pegRNA或pegRNA组合的载体、用于表达PE蛋白的载体、工具细胞、引导编辑系统、引导编辑方法、试剂盒, 及其在制备治疗遗传疾病的药物中的用途。pegRNA...
引物探针组、检测试剂盒及其应用
本发明涉及生物检测领域, 尤其涉及引物探针组、检测试剂盒及其应用。本发明提供了引物探针组, 包括:外引物‑F1、外引物‑R1、内引物‑F2、内引物‑R2和探针;外引物‑F1、外引物‑R1、内引物‑F2、内引物‑R2和探针均修饰有锁核酸。本发...
一种一管式多重扩增子建库方法
本申请提供一种多重扩增子建库方法, 属于生物技术领域。本申请提供的方法将基因特异性多重扩增引物和文库扩增引物通过连接生成长引物, 该长引物可在一管内一步完成多重扩增子文库的构建。进一步地, 本申请在前述方法的基础上拓展了通过酶切使基因特异性...
CMV卫星RNA生防型突变体的构建方法及其在番茄上的应用
本发明属于植物保护领域, 具体涉及CMV卫星RNA生防型突变体的构建方法及其在番茄上的应用。本发明提供一种CMV卫星RNA生防型突变体的构建方法:改变卫星RNA中诱导番茄坏死的关键碱基, 从而降低卫星RNA转变成坏死型卫星RNA的风险。与亲...
一种级联催化酶MOF-919-GOx及其制备方法和应用
本发明公开了一种级联催化酶MOF‑919‑GOx及其制备方法和应用, 涉及纳米酶技术领域。本通过戊二醛负载法合成了MOF‑919‑GOx, 经检测, GOx在MOF‑919的负载量为372.20 μg/mg;在添加2 mg/mL MOF‑9...
细胞微球通过抵抗剪切力实现细胞活性维持及其在疾病治疗中的应用
本发明涉及细胞生物学技术领域, 具体涉及细胞微球通过抵抗剪切力实现细胞活性维持及其在疾病治疗中的应用。本发明提出了一种新型策略, 通过海藻酸钠水凝胶微球包裹细胞, 尤其是间充质干细胞(MSCs), 能够有效保护细胞免受外部力学刺激的影响, ...
删除一个天冬酰胺残基所致大豆ACS双酶失活突变体及应用
本发明适用于植物基因工程技术领域, 提供了删除一个天冬酰胺残基所致大豆ACS双酶失活突变体及应用, 所述大豆ACS双酶失活突变体为GmAH4Δ209N, 所述GmAH4Δ209N的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。通过利用大豆乙烯合成...
一种防治水稻白叶枯病的裂解酶制剂及其制备方法和应用
本发明公开了一种防治水稻白叶枯病的裂解酶制剂及其制备方法和应用, 涉及农业生物技术领域, 所述裂解酶制剂包括黄单胞菌噬菌体GRNXOP1的裂解酶LysXO1或黄单胞菌噬菌体GRNXOP5的裂解酶LysXO5或黄单胞菌噬菌体GRNXOP6的裂...
一种催化果糖和无机铵制备氨基葡萄糖的耐热耐酸酶
本发明公开了一种催化果糖和无机铵制备氨基葡萄糖的耐热耐酸酶, 属于酶工程和生物制造领域。本发明对来源于嗜热菌Thermoclostridium stercorarium的6‑磷酸氨基葡萄糖脱氨酶进行改造, 得到了可以利用氨基供体将果糖转化为...
一种菠萝蛋白酶冻干保护剂及其制备方法
本发明属于生物酶保存技术领域, 具体涉及一种菠萝蛋白酶冻干保护剂及其制备方法。其组成包括下述组分:30~50份海藻糖、8~10份普鲁兰、3~10份麦芽糊精、12~22份甘露醇、1~4份山梨醇、4~12份甘氨酸、0.05~0.2份聚山梨酯‑2...
一种真菌来源内切半乳糖醛酸酶及其制备方法和应用
本发明涉及酶生物工程技术领域, 具体涉及一种真菌来源内切半乳糖醛酸酶及其制备方法和应用, 其中内切半乳糖醛酸酶的编码序列来源于污叉丝孔菌, 内切半乳糖醛酸酶Dsendo‑PGI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示, 内切半乳糖醛酸酶Ds...
一种优化的MmeFz2蛋白及其基因编辑应用
本发明属于基因编辑技术领域, 具体涉及一种优化的MmeFz2蛋白及其基因编辑应用。所述优化的MmeFz2蛋白是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型MmeFz2蛋白进行如下任一种突变获得:1)将所述野生型MmeFz2蛋白第69位的...
一种重组核酸内切酶mpHNHE及其制备方法
本申请提出一种重组核酸内切酶mpHNHE及其制备方法, 制备方法包括如下步骤:经密码子优化后合成mpHNHE的编码基因, 并构建至原核表达载体获得重组质粒;将重组质粒转入原核宿主菌中, 获得具备表达重组核酸内切酶mpHNHE的重组表达菌株;...
一种用于治疗青光眼的gRNA、AAV表达载体、CRISPR-CasRx系统
本发明提供了一种用于治疗青光眼的gRNA、AAV表达载体、CRISPR‑CasRx系统, 具体地, 本发明提供了(a)基因编辑蛋白或其表达载体, 所述基因编辑蛋白包括VI型Cas蛋白;和(b)gRNA或其表达载体, 所述gRNA为引导所述基...
一种米黑根毛霉工程酶的高效表达方法
本发明公开了一种米黑根毛霉工程酶的高效表达方法。发明人首先构建了RML脂肪酶的重组表达载体, 在此基础上, 再构建在成熟肽和前导肽之间添加Kex2切割位点的重组表达载体, 将此改造后的重组表达载体转化毕赤酵母。之后, 将实验室保存的带有Er...
一种塑料降解酶变体及其在降解聚酯塑料中的应用
本发明属于合成生物学和酶工程技术领域, 具体涉及一种塑料降解酶变体及其在降解聚酯塑料中的应用。本发明通过蛋白质工程技术改造现有酶, 通过分子动力学模拟研究聚酯水解酶LCC‑A2蛋白质的全局柔性, 重点关注底物结合的关键环区。通过设计突变体提...
用于长链非天然核酸合成的聚合酶筛选进化及长单链非天然核酸的分离纯化
本发明公开了用于长链非天然核酸合成的聚合酶筛选进化及长单链非天然核酸的分离纯化, 属于生物技术领域。本发明的2'‑氟阿拉伯核酸聚合酶突变体为将氨基酸序列如SEQID NO .1所示的2'‑氟阿拉伯核酸聚合酶的第471位的异亮氨酸突变为谷氨酸...
天冬氨酸激酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用
本发明公开了天冬氨酸激酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用, 包括, 所述的天冬氨酸激酶突变体为lysCS317A, 将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的亲本氨基酸序列的317位丝氨酸突变成丙氨酸得到。能有效缓解L‑赖氨酸对天冬氨...
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