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柠檬酸合酶基因AtCS调控种子抗老化能力的应用以及筛选种子抗老化剂的方法
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及柠檬酸合酶基因AtCS调控种子抗老化能力的应用以及筛选种子抗老化剂的方法。本发明提供了柠檬酸合酶基因AtCS在种子抗老化中的应用,所述柠檬酸合酶基因AtCS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明...
一种莱茵衣藻源高倍甜味诱导蛋白变体工程藻株的构建方法及其应用
本发明公开了一种莱茵衣藻源高倍甜味诱导蛋白变体工程藻株的构建方法及其应用。首先对甜味诱导蛋白Miraculin与Neoculin的蛋白编码序列进行修饰与优化,得到优化的CrMiraculin与CrNeoculin基因序列。随后克隆至表达载体...
抗虫耐除草剂转基因玉米事件JZL22k-1及其检测方法
本发明公开了一种抗虫耐除草剂转基因玉米事件JZL22k‑1及其检测方法。所述转基因玉米事件JZL22k‑1核酸序列包含SEQ ID NO : 1或其互补序列、和/或SEQ ID NO : 2或其互补序列;本发明转基因玉米植物JZL22k‑1...
PtEXPB2相关的生物制品在提高植物干旱胁迫耐受性中的应用
本发明属于植物分子生物学和基因工程技术领域,具体涉及PtEXPB2相关的生物制品在提高植物干旱胁迫耐受性中的应用,所述PtEXPB2基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明从半夏中分离、克隆得到PtEXPB2基因,通过农杆菌介导的...
一种基因组大片段定点插入的PE-重组酶整合系统及其应用
本发明属于动物分子生物技术领域,公开了一种基因组大片段定点插入的PE‑重组酶整合系统及其应用,包括靶向猪高活性重组酶的筛选、在猪ROSA26位点区域高效插入重组酶识别位点(RS)、PE‑重组酶一步整合法的建立与优化。本发明所建立的靶向猪等大...
一种抗Vimentin自身抗体检测的细胞基质及其制备方法和应用
本发明名称为一种抗Vimentin自身抗体检测的细胞基质及其制备方法和应用,属于抗体检测技术领域。所要解决的技术问题为:现有抗Vimentin抗体检测中非特异背景高、判读一致性差、病理相关修饰复现不足及缺乏标准化基质制备体系。技术方案要点为...
一种设计和构建猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库的方法
本发明提供了一种设计和构建猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库的方法。具体地,本发明首次开发一种针对猪全基因组水平蛋白编码基因、lincRNA和miRNA设计特异性sgRNA,并由此构建CRISPR/Cas9的慢病毒敲除文库的方法,可利...
一种体内筛选T细胞膜蛋白基因的转基因小鼠的构建方法及应用
本发明属于生物工程领域,具体涉及一种体内筛选T细胞膜蛋白基因的转基因小鼠的构建方法及应用。针对传统T细胞膜蛋白基因体内筛选研究效率低、文库不稳定、组织适用性局限等问题,本发明通过设计T细胞膜蛋白靶基因与对照基因的sgRNA,构建sgRNA文...
人I型胶原蛋白细胞株构建方法和胶原蛋白制备及其应用
本发明提供了人I型胶原蛋白细胞株构建方法和胶原蛋白制备及其应用。具体地,本发明方法通过在细胞中同时导入人I型胶原蛋白和不同辅酶组合的基因序列,从而直接在细胞内对表达的人I型胶原蛋白进行折叠,并分泌出具有三螺旋结构的人I型胶原蛋白。所述方法能...
一种体内筛选组织细胞膜蛋白的转基因小鼠的构建方法及应用
本发明属于生物工程领域,具体涉及一种体内筛选组织细胞膜蛋白的转基因小鼠的构建方法及应用。针对传统膜蛋白基因体内研究通量低、文库不稳定、组织适用性局限等问题,本发明通过设计膜蛋白靶基因与对照基因的sgRNA,构建sgRNA文库质粒;经胚胎显微...
一种自发性肺癌模型及其制备方法和应用
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种自发性肺癌模型及其制备方法和应用。所述自发性肺癌模型的制备方法,包括以下步骤:条件性定点敲入两个外源基因,使两个外源基因在同一细胞中的共同表达;所述两个外源基因为hEGFR(L858R)基因与hVimen...
心肌细胞条件性敲除SND1基因大鼠模型的构建方法及应用
本发明公开了心肌细胞条件性敲除SND1基因大鼠模型的构建方法及应用。利用CRISPR/Cas9技术获得SND1 flox+/+大鼠,然后与Myh6‑CRE/ERT2大鼠交配,获得SND1flox+/+, Myh6‑CRE 大鼠,最后通过他莫...
一种哺乳动物细胞稳定表达的质粒载体及其构建方法与应用
本发明公开了一种哺乳动物细胞稳定表达的质粒载体及其构建方法与应用,涉及基因工程技术领域,包括一种哺乳动物细胞稳定表达的质粒载体,所述质粒载体包括启动子、多聚腺苷酸化信号、内部核糖体进入位点IRES、复制起始位点、筛选标记基因和特定基因;该哺...
一种高表达human TGF-β3的表达载体、信号肽和方法
本发明提供了一种高表达human TGF‑β3的表达载体、信号肽和方法,该表达载体包含如SEQ ID No.8所示的氨基酸序列,信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。在本发明中发现经过表达序列改造和标签富集后,总蛋白收率提升5倍以...
一种帕金森病家兔模型的构建方法及应用
本发明适用于动物模型构建技术领域,提供了一种帕金森病家兔模型的构建方法及应用,包括以下步骤:设计并制备用于靶向家兔PTRHD1基因目标位点的sgRNA;SpRY‑CBE的转录合成:SpRY‑CBE表达质粒经酶切过夜形成线性DNA,经电泳回收...
一种滇龙胆PDS基因VIGS沉默体系及其应用
本发明涉及一种滇龙胆PDS基因VIGS沉默体系及其应用,属于植物基因工程技术领域。该滇龙胆PDS基因VIGS沉默体系,包含在VIGS沉默载体上插入目的基因得到的重组载体;所述目的基因为SEQ ID NO.2所示。所述的VIGS沉默载体为病毒...
一种高产重组腺相关病毒的辅助质粒及应用
本发明属基因工程技术领域,公开了一种高产重组腺相关病毒的辅助质粒及应用。本发明提供的辅助质粒包括骨架质粒和重组序列;所述重组序列包括:Rep、Cap蛋白编码序列,E2A、E4、VA RNA序列和至少一个启动子序列;所述启动子序列位于所述Re...
一种egeAAV基因编辑体系和应用
本发明提供了一种egeAAV基因编辑体系和应用,涉及基因编辑技术领域;以腺相关病毒大基因包装表达载体和单链单极AAV载体DNA供体组成的高效基因编辑体系基因编辑方法;利用包装元件形成5’端的单个ITR,或,无ITR结构,以及3’端的线性开放...
一种莆田猪皮下前体脂肪细胞永生化细胞系、制备方法及应用
本发明公开了一种莆田猪皮下前体脂肪细胞永生化细胞系、制备方法及应用,涉及永生化细胞技术领域,其技术方案要点是:该方法利用SV40T慢病毒侵染体系建立了永生化的莆田猪皮下前体脂肪细胞系,使其持续保留了前体脂肪细胞的分化能力,并且未出现瘤化倾向...
一种用于提取和递送功能膜蛋白的工程化细胞外囊泡的制备方法
本发明公开了一种用于提取和递送功能膜蛋白的工程化细胞外囊泡的制备方法。本发明工程化细胞外囊泡的制备方法,通过稳定表达目标膜蛋白的细胞系,将细胞转入胶原或纤连蛋白包被的细胞培养皿中贴壁培养,结合连续离心纯化工艺,可直接从细胞膜表面剪切形成新型...
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