恭喜上海海洋大学颜娟获国家专利权
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龙图腾网恭喜上海海洋大学申请的专利一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN112462046B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202011263829.2,技术领域涉及:G01N33/53;该发明授权一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法是由颜娟;赵婷婷;张彤;陶晴;张倩雯设计研发完成,并于2020-11-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法在说明书摘要公布了:本发明属于食品安全检测领域,具体为一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法,包括以下步骤:1磁性颗粒复合物、目标抗生素的适配体与待测样品或标准液混合孵育后,磁分离,取结合适配体的磁性颗粒复合物;所述的磁性纳米复合物为连接有待测的目标抗生素的磁珠;2结合适配体的磁性颗粒复合物用脱氧核苷酸及生物素修饰的脱氧核苷酸进行TdT扩增反应,在适配体的3’‑OH端延伸,磁分离取经过TdT扩增的磁性纳米复合物;3步骤2产物与亲和素修饰的辣根过氧化酶连接得到比色适配体传感器;4比色适配体传感器中加入过氧化氢和TMB,避光反应后磁分离,取上清液检测吸光度。该方法可以放大比色检测信号,从而提高检测灵敏度。
本发明授权一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于比色适配体传感器快速检测抗生素的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)磁性颗粒复合物、目标抗生素的适配体与待测样品或标准液混合孵育后,磁分离,取结合适配体的磁性颗粒复合物;所述的磁性颗粒复合物为连接有待测的目标抗生素的磁珠;(2)结合适配体的磁性颗粒复合物用脱氧核苷酸及生物素修饰的脱氧核苷酸进行TdT扩增反应,在适配体的3’-OH端进行单核苷酸链的延伸,磁分离,取经过TdT扩增的磁性颗粒复合物;(3)步骤(2)产物与亲和素修饰的辣根过氧化酶连接得到比色适配体传感器;(4)比色适配体传感器中加入过氧化氢和TMB,避光反应后磁分离,取上清液检测吸光度;其中,所述抗生素为卡那霉素或链霉素;用于卡那霉素的适配体序列为:5′-TGGGGGTTGAGGCTAAGCCGAGTCAC-3′;用于链霉素的适配体序列为:5′-TAGGGAATTCGTCGACGGATCCGGGGTCTGGTGTTCTGCTTTGTTCTGTCGGGTCGTCTGCAGGTCGACGCATGCGCCG-3′;步骤(1)所述磁性颗粒复合物制备方法为:表面带氨基的四氧化三铁磁珠表面经过醛基化处理,用MES和EDC偶联,连接待测的目标抗生素;步骤(1)的孵育条件为,取磁性颗粒复合物与目标抗生素的适配体、待测样品或者标准溶液混合充分,35~38℃恒温孵育0.5~2h;在孵育之前,用蛋白封闭磁性颗粒复合物;步骤(2)TdT扩增反应条件为:结合适配体的磁性颗粒复合物中加入缓冲液、TdT酶、脱氧核苷酸及生物素修饰的脱氧核苷酸,混合后35~38℃恒温孵育0.5~1h。
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