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龙图腾网恭喜湖北冠众通科技有限公司申请的专利一种产法尼醇基因工程菌及其构建方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113969288B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202111273441.5，技术领域涉及：C12N15/54；该发明授权一种产法尼醇基因工程菌及其构建方法与应用是由陈强;刘登辉;向景;刘传春设计研发完成，并于2021-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种产法尼醇基因工程菌及其构建方法与应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种产法尼醇基因工程菌的构建方法，是利用同源重组的方式在酿酒酵母中整合表达MVA途径限速酶‑截短形式的HMG‑CoA还原酶编码基因（tHMG1）和整合融合表达FPP合酶编码基因（ERG20）与酿酒酵母内源性磷酸酶编码基因（PAH1），以增强MVA途径代谢强度，增强法尼醇的表达。同时使用铜离子诱导启动子pCUP1替换角鲨烯合酶编码基因ERG9启动子，下调麦角固醇竞争途径，提高法尼醇产量；最终获得产法尼醇的基因工程菌株。该基因工程菌的法尼醇的摇瓶发酵产量可达到约573mgL，发酵罐产量可达到约21gL，完全具备商业化生产水平，具有良好的工业应用前景。

本发明授权一种产法尼醇基因工程菌及其构建方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种产法尼醇基因工程菌的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、构建酿酒酵母MVA途径相关基因表达模块：过表达tHMG1模块，包括诱导型双向强启动子pGAL1-10和MVA途径限速酶编码基因tHMG1，所述pGAL1-10的核苷酸序列如SEQNO.1所示，所述tHMG1的核苷酸序列如SEQNO.2所示；S2、构建法尼醇生产相关基因表达模块：ERG20-Linker-PAH1模块，包括FPP合酶的编码基因ERG20和酿酒酵母内源性磷酸酶的编码基因PAH1，所述ERG20的核苷酸序列如SEQNO.3所示，所述PAH1的核苷酸序列如SEQNO.4所示；S3、构建敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因表达的工程菌：将步骤S1所述酿酒酵母MVA途径相关基因表达模块和步骤S2所述法尼醇生产相关基因表达模块整合至半乳糖调节蛋白GAL80基因位点，同时敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因，得到敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因表达模块，将所述敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因表达模块转化至宿主菌酿酒酵母中，经多次基因工程操作，获得敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因表达的基因工程菌；所述宿主菌酿酒酵母为酿酒酵母30000B、酿酒酵母S.cerevisiaeCEN.PK2-1D或者酿酒酵母BY4741中任一种；S4、构建角鲨烯合酶途径下调表达质粒，包括将铜离子诱导启动子pCUP1替换为角鲨烯合酶基因ERG9启动子，所述pCUP1的核苷酸序列如SEQNO.5所示；所述角鲨烯合酶基因ERG9启动子取至ERG9基因起始密码子前450bp，其核苷酸序列如SEQNO.6所示；S5、将步骤S5所述角鲨烯合酶途径下调表达质粒转化至步骤S3所述的敲除半乳糖调节蛋白GAL80基因表达的基因工程菌中，依次经抗生素抗性筛选，然后通过菌落PCR验证，获得高产法尼醇基因工程菌；所述构建方法还包括两个终止子tCYC1和tERG20，所述终止子tCYC1的核苷酸序列如SEQNO.7所示，所述终止子tERG20的核苷酸序列如SEQNO.8所示。

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