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恭喜中国科学技术大学张青川获国家专利权

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龙图腾网恭喜中国科学技术大学申请的专利基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114216958B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111582439.6,技术领域涉及:G01N29/00;该发明授权基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法是由张青川;梅开男;吴尚犬设计研发完成,并于2021-12-22向国家知识产权局提交的专利申请。

基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法在说明书摘要公布了:本发明涉及生物传感器领域,特别涉及基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法。本发明提供的检测方法及其外加磁场的微悬臂阵列梁传感平台,可以克服传统检测上的一些限制,外加磁场后由于每个外泌体上结合的磁纳米颗粒在磁场中受到的较大的磁场作用力,可以将种微小的分子间作用力等效转换为磁场力。这种方案操作简便,可大大降低样本消耗量,检测灵敏度为小于10个外泌体mL,使检测时间缩短为10~30min,在基于免疫测定的现场及时诊断工具的开发中显示巨大潜力。

本发明授权基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法在权利要求书中公布了:1.生物传感组合物,其特征在于,包括磁颗粒、外泌体和阵列梁;所述磁颗粒与所述外泌体结合;还包括探针;所述探针修饰到所述阵列梁上,且所述外泌体的表面蛋白与所述探针结合;所述阵列梁的处理方法为:(1)阵列梁放置于酶孔板中,加入VH2SO4:VH2O2=3:1的食人鱼溶液清洗悬臂梁表面10min,去离子水清洗三次,氮气吹干;四根毛细管分别插入1,3,5,7号梁表面修饰上探针分子EGFR2h,所述探针分子EGFR为N-SH-C6-GCCTTAGUAACGTGCTTTGATGTCGATTCGACAGGAGGC-C,取出放入酶孔板,PBST溶液清洗3次,氮气吹干;由于探针分子一端已经修饰了巯基,与梁的金表面发生反应化学反应形成Au-S键结合到梁表面;(2)加入封闭试剂6-巯基-1-己醇室温放置30min,PBST清洗3次,氮气吹干;目的是将金表面未结合探针分子的空白位点占据,防止非特异性吸附对偏转检测结果带来影响;(3)磁颗粒浓缩富集后的外泌体溶液加入到上一步修饰好的阵列梁中,让外泌体表面蛋白EGRG与修饰到梁上的探针分子结合90min,PBS清洗一次;所述磁颗粒浓缩富集后的外泌体溶液的制备方法包括:步骤1、适配体CD63偶联磁颗粒:1)取5mL浓度为1mgmL、粒径为10nm的Fe3O4溶液至100KD超滤管,4000g离心,弃下清,加入15mMMES洗涤两次,并用MES重悬定容至4.7mL;2)分别涡旋加入5OD适配体、2mgEDC,迅速颠倒混匀后于37℃震荡反应过夜,转速150rpmmin,反应时间20h;3)反应结束后,将反应液取出,采用100KD超滤,收集下清,用于检测偶联率;4)使用纯化水超滤洗涤样品3次,并定容至5mL,即为偶联适配体的10nmFe3O4;步骤2、将偶联适配体的磁颗粒稀释到12.5μgml与外泌体混合,室温放置2h,让偶联适配体的磁颗粒充分结合外泌体。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国科学技术大学,其通讯地址为:230026 安徽省合肥市包河区金寨路96号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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