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恭喜石河子大学祝建波获国家专利权

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龙图腾网恭喜石河子大学申请的专利一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116897834B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311085700.0,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法是由祝建波;侯梦娟;孔辉;谢照松;王嘉萌;刘瑞娜设计研发完成,并于2023-08-28向国家知识产权局提交的专利申请。

一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法在说明书摘要公布了:本发明为一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法。一种老汉瓜的再生方法,包括以下步骤:1种子的消毒及无菌外植体的获得;2愈伤组织的诱导培养;3不定芽的诱导培养;4不定芽的伸长;5根的诱导培养。本发明还公开了一种老汉瓜的遗传转化方法。本发明所述的一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法,成功实现了老汉瓜子叶高效离体再生及遗传转化体系的建立,使得遗传转化率在86%以上。

本发明授权一种老汉瓜的再生方法和遗传转化方法在权利要求书中公布了:1.一种老汉瓜的遗传转化方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)种子的消毒及无菌外植体的获得:老汉瓜种子去壳、消毒灭菌后,在萌发培养基中进行培养,至老汉瓜子叶完全展开,真叶未长出时,得子叶为无菌外植体;所述的萌发培养基为:12MS培养基中添加15-20gL蔗糖、8-9gL琼脂条,pH值为5.8-6.0;(2)愈伤组织的诱导培养:将所述的无菌外植体进行预培养、侵染和共培养后,再接入愈伤组织诱导培养基,在25-28℃的培养条件下培养15-20天;所述的预培养过程为:将所述的无菌外植体剪去头部和尾部,接入预培养培养基中,在25-28℃的培养条件下进行暗培养;所述的侵染及共培养过程为:用携带有植物表达载体的根癌农杆菌菌液,侵染所述的预培养后的老汉瓜子叶,再转移至愈伤组织诱导培养基,并用无菌滤纸将外植体与培养基隔开,进行共培养,在25-28℃的培养条件下暗培养2天;所述的根癌农杆菌菌液含有携带有植物表达载体pCAMBIA1302的根癌农杆菌GV3101、50-100mgL乙酰丁香酮,其OD600为0.4-0.6;所述的愈伤组织诱导培养基为:MS培养基中添加30gL蔗糖、9gL琼脂条、0.5-1.0mgL6-BA、0.15-0.3mgLIAA,pH值为5.8-6.0;(3)不定芽的诱导培养:待出现愈伤组织后,将外植体转入到芽诱导培养基中,在25-28℃,光周期为16h光照8h黑暗,光照强度为5000lx的组培室中进行培养,15-20d更换一次培养基,培养至出现不定芽;所述的芽诱导培养基为:MS培养基中添加30gL蔗糖、9gL琼脂条、0.5-1.0mgL6-BA、0.15-0.3mgLIAA、特美汀及抗生素潮霉素,pH值为5.8-6.0;(4)不定芽的伸长:待所述的不定芽长至0.5-1cm时,将带有不定芽的外植体,接入到不定芽伸长培养基中进行培养;培养条件为:在25-28℃,光周期为16h光照8h黑暗,光照强度为5000lx的组培室中进行培养,15-20d更换一次培养基;所述的不定芽伸长培养基为:MS培养基中添加30gL蔗糖、9gL琼脂条、0.5-1.0mgL6-BA、0.15-0.3mgLIAA、0.5-1.0mgLGA3、特美汀及抗生素潮霉素,pH值为5.8-6.0;(5)根的诱导培养:待所述的不定芽伸长至1.5-3cm时,将不定芽切下来,接入到根的诱导培养基中进行培养;培养条件为:在25-28℃,光周期为16h光照8h黑暗,光照强度为5000lx的组培室中进行培养;所述的根的诱导培养基为:12MS培养基中添加15gL蔗糖、9gL琼脂条、0.6-0.9mgLIAA、特美汀及抗生素潮霉素,pH值为5.8-6.0;(6)进行遗传转化苗的鉴定:对所述的根的诱导培养后的遗传转化的老汉瓜苗进行GFP荧光的检测;提取遗传转化的老汉瓜苗基因组DNA,进行PCR阳性检测,筛选阳性遗传转化苗。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人石河子大学,其通讯地址为:832000 新疆维吾尔自治区石河子市北四路221号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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