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龙图腾网恭喜中国科学院过程工程研究所;河北华北制药华恒药业有限公司申请的专利一种强化硫氧化功能的工程菌及其构建方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118185977B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410621232.2，技术领域涉及：C12N15/74；该发明授权一种强化硫氧化功能的工程菌及其构建方法与应用是由杨茂华;李贺;邢建民;宋斌;张婉玉;曹子甲;王月然;吕永健;夏昊设计研发完成，并于2024-05-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种强化硫氧化功能的工程菌及其构建方法与应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种强化硫氧化功能的工程菌及其构建方法与应用。所述构建方法包括：在硫碱弧菌细胞中异源表达硫醌氧化还原酶Sqr，敲除聚硫化物跨膜转运蛋白YilD和硫氧化酶SoxB，即得所述强化硫氧化功能的工程菌。其中，表达硫醌氧化还原酶Sqr可以提高硫化物氧化为单质硫的速率，敲除聚硫化物跨膜转运蛋白YilD和硫氧化酶SoxB有助于减弱单质硫继续氧化为硫酸根，从而提高单质硫的产率。本发明的工程菌相比野生菌，在气升式反应器中的最适氧化还原电位情况下，硫化钠氧化速率提高29.2%，单质硫产率提高18%。

本发明授权一种强化硫氧化功能的工程菌及其构建方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种强化硫氧化功能的硫碱弧菌工程菌的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：在硫碱弧菌中异源表达硫醌氧化还原酶Sqr，敲除聚硫化物跨膜转运蛋白YilD和敲除硫氧化酶SoxB；所述硫碱弧菌为多能硫碱弧菌D301菌株；所述硫醌氧化还原酶Sqr的核酸序列为SEQIDNO.11所示的序列；所述敲除聚硫化物跨膜转运蛋白YilD包括：使用引物yilDF1yilDR1和yilDF2yilDR2分别扩增聚硫化物跨膜转运蛋白yilD上下游同源臂，使用引物yilDF1yilDR2经重叠PCR扩增连接上下游同源臂，用限制性内切酶酶切同源臂片段和CRISRAsCpf1质粒后T4连接过夜，将连接产物转化至E.coliTop10中，采用多寡核苷酸突变的方法，获得连接有yilD基因sgRNA序列的基因编辑质粒，将基因编辑质粒电转化至大肠杆菌Sm10中，利用接合转移将质粒转化至硫碱弧菌中完成敲除；所述敲除硫氧化酶SoxB包括：使用引物soxBF1soxBR1和soxBF2soxBR2分别扩增硫氧化酶SoxB上下游同源臂，再使用引物soxBF1soxBR2经重叠PCR扩增连接上下游同源臂，用限制性内切酶酶切同源臂片段和CRISRAsCpf1质粒后T4连接过夜，将连接产物转化至E.coliTop10中，采用多寡核苷酸突变的方法，获得连接有硫氧化酶SoxB基因sgRNA序列的基因编辑质粒，将基因编辑质粒电转化至大肠杆菌Sm10中，利用接合转移将质粒转化至硫碱弧菌中完成敲除；所述引物yilDF1yilDR1的序列如SEQIDNO.1-SEQIDNO.2所示；所述引物yilDF2yilDR2的序列如SEQIDNO.3-SEQIDNO.4所示；所述yilD基因的sgRNA序列如SEQIDNO.5所示；所述引物soxBF1soxBR1的序列如SEQIDNO.6-SEQIDNO.7所示；所述引物soxBF2soxBR2的序列如SEQIDNO.8-SEQIDNO.9所示；所述soxB基因的sgRNA序列如SEQIDNO.10所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人中国科学院过程工程研究所;河北华北制药华恒药业有限公司，其通讯地址为：100190 北京市海淀区中关村北二街1号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。