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龙图腾网恭喜山东海化集团有限公司申请的专利一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测的试剂盒的制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118169385B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2024-09-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410598308.4，技术领域涉及：G01N33/543；该发明授权一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测的试剂盒的制备方法是由王栋;张丽娜;朱鸣笛设计研发完成，并于2024-05-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测的试剂盒的制备方法在说明书摘要公布了：本发明涉及抗原检测技术领域，提供了一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测的试剂盒的制备方法。采用C‑AuAg‑Janus纳米球马达替代传统的捕获载体颗粒，尺寸更小，催化动力更强，从而运动效果得到显著提升，有效降低了单颗粒捕获分析对帧率观测仪器的依赖，达到降低使用成本的效果；表面负载捕获抗体的纳米球马达在捕获抗原后，纳米球马达运动范围变化和抗原浓度会存在一定线性关系，通过标定标准曲线，借助运动范围变化实现对抗原浓度检测，此种方式不仅实现了单颗粒捕获分析在定性方面的应用，也实现了对标志物的定量检测。

本发明授权一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测的试剂盒的制备方法在权利要求书中公布了：1.一种利用单颗粒捕获分析抗原浓度的检测方法，其特征在于，包括半球修饰捕获抗体-Janus纳米球马达的磷酸盐悬浮液和表面负载氨基-聚乙二醇-巯基的石英玻片；所述半球修饰捕获抗体-Janus纳米球马达的制备过程，包括以下步骤：S1.用硫酸和过氧化氢按照体积比7:3配制水虎鱼酸溶液，将载玻片浸泡到水虎鱼酸溶液中，得到亲水性玻片；S2.将体积分数为50%的SiO2纳米球乙醇水悬浮液滴加到制得的亲水性玻片表面，使用电子束蒸发镀膜机在负载有SiO2纳米球的玻片基底上依次蒸镀厚度为5～6nm的银层和厚度为4～5nm的金层；镀膜完成后，将玻片放入乙醇溶液中，进行超声收集，得到AuAg-Janus纳米球乙醇悬浮液；S3.将巯基十一烷酸加入到制得的AuAg-Janus纳米球乙醇悬浮液中，振荡反应6～10小时，离心、洗涤，得到负载巯基十一烷酸的AuAg-Janus纳米球乙醇悬浮液；S4.用1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、超纯水按照1mol：2mol：1～2ml的比例配制混合液，将制得的负载巯基十一烷酸的AuAg-Janus纳米球乙醇悬浮液与混合液按照体积比1:4～5混合，振荡反应0.4～0.6小时，离心、洗涤，得到沉淀物，将沉淀物加入浓度为2～3mgmL的过氧化氢酶溶液中孵育1～2小时，离心、洗涤，得到修饰过氧化氢酶的C-AuAg-Janus纳米球马达水悬浮液；S5.取制备的修饰过氧化氢酶的C-AuAg-Janus纳米球马达水悬浮液按照体积比1:1加入到含有3%体积分数的戊二醛磷酸盐缓冲液，振荡反应1～2小时，离心得到沉淀物，并用超纯水洗涤，然后将沉淀物加入含有抗体的磷酸盐缓冲液中反应1～2小时，所述抗体在磷酸盐缓冲液中的浓度为10～30mM，得到半球修饰捕获抗体-Janus纳米球马达磷酸盐悬浮液；所述表面负载氨基-聚乙二醇-巯基的石英玻片的制备过程，包括以下步骤：A1.将石英玻片用氢氧化钠的乙醇溶液浸泡1～2小时，取出用超纯水清洗，再放入体积分数为1%的（3-氨丙基）三甲氧基硅烷的丙酮溶液反应30～40分钟，取出，依次用丙酮和超纯水超声清洗，再放入3%戊二醛磷酸盐混合液在45～55℃反应1～2小时，取出，依次用超纯水、丙酮超声清洗，得到醛基玻片；A2.取氨基-聚乙二醇-巯基、乙醇胺、磷酸盐缓冲溶液按照3mol：8mol：20～40ml的比例配制混合液，取混合液滴加在步骤A1制得的醛基玻片表面反应1～2小时，磷酸盐缓冲液冲洗，得到表面负载氨基-聚乙二醇-巯基的石英玻片；利用单颗粒捕获分析抗原浓度检测方法：石英玻片加入在表面滴加浓度为10mM、20mM、30mM的癌胚抗原，滴加入半球修饰10mM、20mM、30mM浓度捕获抗体-Janus纳米球马达磷酸盐悬浮液孵育，观测其运动范围变化；纳米球马达在加入过氧化氢前后运动范围的变化采用运动范围变化率来表示：运动范围变化率=（过氧化氢后运动范围-过氧化氢前运动范围）过氧化氢前运动范围30mmol封闭抗体纳米球马达运动范围变化率随着捕获抗原浓度提升呈现逐渐衰减的状态，当捕获抗原浓度低于捕获抗体浓度时，运动范围变化率和抗原浓度存在一定的线性关系，由此得到标准曲线。

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