恭喜郑州轻工业大学杨雪鹏获国家专利权
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龙图腾网恭喜郑州轻工业大学申请的专利一种重组大肠杆菌静息细胞催化异戊烯醇高效制备冷杉醇的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115820702B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211494822.0,技术领域涉及:C12N15/70;该发明授权一种重组大肠杆菌静息细胞催化异戊烯醇高效制备冷杉醇的方法是由杨雪鹏;王光路;刘兰茜;胡仙妹;钟桂芳;王冰洋;王梦圆;李乾设计研发完成,并于2022-11-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种重组大肠杆菌静息细胞催化异戊烯醇高效制备冷杉醇的方法在说明书摘要公布了:冷杉醇降解产生龙涎香香气物质,可改善烟草香味品质,广泛应用于香料工业。本发明开发了一种低成本、高效的静息细胞催化制备冷杉醇新方法。通过敲除去磷酸化酶编码基因phoA、ybjG、pgpB及外膜脂蛋白编码基因nlpⅠ,组成型过表达脂肪酸代谢转录调节子编码基因fadR和甘油代谢操纵子基因glpFK,过表达羟乙基噻唑激酶、异戊烯基磷酸激酶、异戊烯基二磷酸δ‑异构酶、双功能二磷酸法呢基合酶、香叶基香叶基二磷酸合酶、赖百当‑13‑烯‑8‑醇二磷酸合酶和冷杉醇合酶获得重组大肠杆菌。采用静息细胞催化工艺可于24h催化3.0gL异戊烯醇生成1.80gL冷杉醇,转化率达71.15%,远高于目前文献及专利报道水平。静息细胞可重复使用5‑6次,操作简单、经济性好,相比发酵法有更佳的规模制备冷杉醇潜力。
本发明授权一种重组大肠杆菌静息细胞催化异戊烯醇高效制备冷杉醇的方法在权利要求书中公布了:1.一种重组大肠杆菌静息细胞的制备方法,其特征在于,敲除大肠杆菌宿主中磷酸酶编码基因phoA、ybjG、pgpB及外膜脂蛋白编码基因nlpⅠ,脂肪酸代谢转录调节子编码基因fadR的组成型过表达,即置换脂肪酸代谢转录调节子编码基因fadR启动子为组成型强启动子Ptac,甘油代谢操纵子基因glpFK的组成型过表达,即置换甘油激酶编码基因glpFK启动子为组成型强启动子Ptac,构建大肠杆菌工程菌株LSC-06;在所述大肠杆菌工程菌株LSC-06的基础上构建共表达来自E.coliK-12W3110的羟乙基噻唑激酶编码基因EcThiM,来自Methanothermobacterthermautotrophicusstr.DeltaH的异戊烯基磷酸激酶编码基因MthIPK,来自S.cerevisiaeS288c的异戊烯基二磷酸δ-异构酶编码基因ScIDI,引入F96C高活性突变的来自S.cerevisiaeS288c的双功能二磷酸法呢基合酶编码基因ScERG20,来自Taxuscanadensis的香叶基香叶基二磷酸合酶编码基因TcGGPPS,来自Cistuscreticus的赖百当-13-烯-8-醇二磷酸合酶编码基因CcCLS和来自Nicotianatabaccum的冷杉醇合酶编码基因NtABS的大肠杆菌工程菌株LSC-07,对大肠杆菌工程菌株LSC-07进行培养获得重组大肠杆菌静息细胞。
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