恭喜中国检验检疫科学研究院陈颖获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国检验检疫科学研究院申请的专利一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115896231B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110934213.1,技术领域涉及:C12Q1/04;该发明授权一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法是由陈颖;姬庆龙;赵贵明;赵勇胜;王娉;赵晓美;杨海荣设计研发完成,并于2021-08-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种对食源致病性气单胞菌菌株的检测和分离方法:包括专用增菌液和显色培养基两部分,增菌液由特殊蛋白胨、胆盐和水组成;显色培养基由蛋白胨、糊精、麦芽糖、甜菜碱、胆盐、氯化钾、碳酸钾、硫酸镁、氨苄青霉素、头孢唑林、β‑半乳糖苷显色底物、溴百里酚蓝、琼脂、聚乙二醇等组成。使用时首先将待测样品在增菌液中培养,然后划线接种至显色培养基上培养,直接观察平板上特征性菌落生长情况,即可获得食源致病性气单胞菌菌株。本发明所述的增菌液和显色培养基成本低廉,配置简单,所述方法能够特异、简便、快速地用于致病性气单胞菌的分离与鉴定,应用前景广泛。
本发明授权一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法在权利要求书中公布了:1.一种非疾病诊断目的食源致病性气单胞菌的检测及分离方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)增菌液制备:将蛋白胨10~20g、胆盐2~5g,加入到1L去离子水中,加热搅拌溶解,使用碳酸钾调节pH至8.5±0.2后,121℃高压灭菌15min,分装备用;其中,所述蛋白胨为不含氯化钠的酪蛋白胨;所述胆盐为钾胆盐;(2)显色平板制备:将蛋白胨10~20g、糊精5~12g,麦芽糖0~2g、甜菜碱0~2g、胆盐3~5g、氯化钾3~5g、碳酸钾1~2g、硫酸镁0.1~0.5g、显色剂及底物分散剂2~5g、琼脂15~18g,加入到1L去离子水中,搅拌溶解,调节pH至7.6±0.2后,加热煮沸,待冷却至45℃~55℃,加入氨苄青霉素5~10mg和头孢唑林5~10mg,混匀,倒平板,备用;其中,所述蛋白胨为鱼蛋白胨、胰蛋白䏡组合成分;所述胆盐为钾胆盐;所述显色剂为细菌特异性酶反应底物和酸碱指示剂的组合成分;细菌特异性酶反应底物为6-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,含量为0.1~0.2gL;酸碱指示剂为溴百里酚蓝、百里酚蓝组合成分,溴百里酚蓝含量为0.04~0.1gL,百里酚蓝含量为0.04~0.1gL;所述底物分散剂为聚乙二醇、泊洛沙姆单一或组合成分,聚乙二醇含量为0~2gL,泊洛沙姆含量为0~2gL;(3)接种培养:取25g待检样品加入配置好的225ml增菌液中,均质混匀后,36℃±1℃增菌培养12~18h,将增菌液划线接种到显色平板上,30℃±1℃培养18h~24h;(4)结果分析:直接观察特征性菌落,出现黄色菌落的为致病性气单胞菌。
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