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龙图腾网恭喜山东渠风食品科技有限公司申请的专利一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119286961B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-01发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411822587.4，技术领域涉及：C12P21/00；该发明授权一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法是由孙福林;于清;郝夕祥;王立宝;韩代军设计研发完成，并于2024-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及制备谷朊粉短肽的方法技术领域，尤其涉及一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法，包括：先制备固定化的普鲁兰酶和包埋α‑淀粉酶的水凝胶材料；将谷朊粉经过球磨和过筛，得到谷朊粉细粉；将谷朊粉细粉与水混合，经过加热得到混合浆料；向其中加入缓冲液并调节pH值，然后加入先前制备好的固定化的普鲁兰酶进行第一步酶解；接着加入先前制备好的包埋α‑淀粉酶的水凝胶材料，在酸性条件以及乙酰丙酮的存在下进行第二步酶解；最后经过灭酶、离心和干燥，得到谷朊粉短肽。

本发明授权一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法在权利要求书中公布了：1.一种双酶复合酶解制备谷朊粉短肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将谷朊粉经过球磨得到谷朊粉细粉粗品，将所述谷朊粉细粉粗品过筛得到谷朊粉细粉；步骤2：将所述谷朊粉细粉与水混合，然后在75℃-90℃下加热1.5-4h，得到第一混合浆料；步骤3：向所述第一混合浆料中加入乙酸-乙酸钠缓冲液，并调节pH值为5.0-6.0，得到第二混合浆料；步骤4：将所述第二混合浆料的温度降低至50℃-65℃，然后加入固定化的普鲁兰酶进行酶解，得到第一酶解液；在步骤4的酶解过程中保持pH值和温度不变；步骤5：制备包埋α-淀粉酶的水凝胶材料；步骤6：向所述第一酶解液中加入酸性溶液和乙酰丙酮，调节pH值为3.0-3.5，然后加入包埋α-淀粉酶的水凝胶材料，在40℃-50℃下进行酶解，得到第二酶解液；在步骤6的酶解过程中保持pH值和温度不变；步骤7：将所述第二酶解液经过灭酶、离心和干燥，得到所述谷朊粉短肽；步骤1中，球磨过程包括：将所述谷朊粉加入至无水乙醇中进行球磨，所述谷朊粉和无水乙醇的质量比为1:3.5-5，使用5-10个10mm的玛瑙球和25-40个6mm的玛瑙球作为磨球，球磨机参数设置为转数200-250rpm、球磨时间30-60min；步骤2中，所述谷朊粉细粉与水的质量比为1:10-15；步骤4中，酶解时间为1.5-3h；步骤6中，酶解时间为1-2h；所述固定化的普鲁兰酶通过以下步骤制备：步骤1-a：将普鲁兰酶和磁性Fe3O4纳米粒子分别加入至PBS缓冲溶液中，分别振荡1-3h，然后将二者混合，在4℃下结合1.5-3h，得到第三混合溶液；步骤2-a：向所述第三混合溶液加入第一交联剂，在20℃-35℃下振荡8-12h，然后静置8-12h，使用磁铁吸附磁性Fe3O4纳米粒子，得到所述固定化的普鲁兰酶；所述包埋α-淀粉酶的水凝胶材料通过以下步骤制备：步骤1-c：将聚乙二醇二丙烯酸酯和聚乙二醇甲基丙烯酸酯加入至水中，加热至45℃-60℃并保持搅拌，然后逐滴加入α-淀粉酶溶液，得到第四混合溶液；步骤2-c：将所述第四混合溶液温度降至室温，然后加入光引发剂，振荡2-4h，得到第五混合溶液；步骤3-c：将所述第五混合溶液在365nm紫外灯下光照1-2h，得到水凝胶；步骤4-c：使用PBS缓冲溶液对所述水凝胶进行冲洗，然后加入第二交联剂，经过30-60min的交联反应，得到所述包埋α-淀粉酶的水凝胶材料粗品；所述第一交联剂为4-N-马来酰亚胺甲基环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐或1-乙基-3-3-二甲基氨基丙基碳二亚胺；所述第二交联剂为戊二醛；步骤7具体为：（1）所述灭酶的过程包括：将所述第二酶解液升温至90℃-95℃，保持15-30min；（2）所述离心的过程包括：将灭酶后的酶解液在3500-4500rpm下进行离心，离心时间为15-30min；（3）所述干燥过程为喷雾干燥。

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