恭喜广州森升生物科技有限公司晏卫祥获国家专利权
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龙图腾网恭喜广州森升生物科技有限公司申请的专利一种高纯度小分子鱼精DNA-Na原料及制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118979034B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-08发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411049600.7,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种高纯度小分子鱼精DNA-Na原料及制备方法是由晏卫祥;陈明鲁;金克品;邰红江设计研发完成,并于2024-08-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高纯度小分子鱼精DNA-Na原料及制备方法在说明书摘要公布了:本发明属于核苷酸及生物化学技术领域,具体涉及一种高纯度小分子鱼精DNA‑Na原料及制备方法。所述鱼精DNA‑Na原料中蛋白质含量低于0.05%、20kDa以下脱氧核糖核苷酸含量不低于80%。所述鱼精DNA‑Na原料采用鱼精巢经鱼精巢前处理、DNA破碎、脱蛋白处理和冻干步骤制备,其中脱蛋白处理不采用SDS‑NaCl处理及乙醇沉淀,提高了绿色工业化水平。该制备工艺所得鱼精DNA‑Na原料蛋白含量低,可降低异源蛋白引起的免疫原性;低分子量核酸占比高,利于进一步提高皮肤透过性。该产品在皮肤健康保持、损伤修复等医疗美容领域具有较好的应用价值。
本发明授权一种高纯度小分子鱼精DNA-Na原料及制备方法在权利要求书中公布了:1.一种高纯度小分子鱼精DNA-Na原料,其特征在于,所述鱼精DNA-Na原料采用鱼精巢制备,所述鱼精DNA-Na原料以冻干品计蛋白质含量按质量百分比计算低于0.05%;所述鱼精DNA-Na原料中20kDa以下脱氧核糖核苷酸含量不低于80%;所述鱼精DNA-Na原料的制备方法包括如下步骤:S1鱼精巢前处理:鱼精巢冷冻破碎,采用Tris-水溶液、氢氧化钠溶液、胰蛋白酶进行裂解和酶解,得前处理混合液;S2DNA破碎:前处理混合液加入Tris-水溶液、氢氧化钠溶液,控温4℃~30℃、20KHz超声,超声处理30~60min,得DNA破碎处理混合液;S3脱蛋白处理:DNA破碎处理混合液离心除去不溶物,调pH7.5~8.0静置后再次离心除沉淀,取上清液作为预处理液;预处理液经1μm滤膜过滤,加入纳滤处理系统,过5kDa超滤膜,制备DNA-Na原料粗品溶液;取DNA-Na原料粗品溶液采用疏水色谱处理得高纯度小分子鱼精DNA-Na原料液;S4冻干:取高纯度小分子鱼精DNA-Na原料液冻干收集干粉,作为高纯度小分子鱼精DNA-Na原料;所述步骤S1中:裂解和酶解的pH为7.5~8.0;所述步骤S1中:胰蛋白酶用量不低于250KUL,酶解条件为37℃搅拌消解24h;所述步骤S3中疏水色谱分离条件为:固定相:丁基疏水色谱填料;载样量:不超过2BV;上样速度:线速度0.5cmmin,洗脱速度:线速度1cmmin;流动相A:100mmolNaCl溶液;流动相B:纯化水;流动相C:20mmol磷酸氢二钾溶液;流动相D:0.1molL氢氧化钠水溶液;流速:8BVh;所述疏水色谱分离的洗脱程序为:梯度设置:前平衡(流动相A:流动相B=1:1)2BV→上样→后平衡(流动相A:流动相B=1:1)3BV→洗脱一(流动相A:流动相B=1:2)2BV→洗脱二(流动相A:流动相B:流动相C=1:2:1)2BV→洗脱三(流动相A:流动相B:流动相C=1:1:2)1BV→洗脱四(流动相B:流动相D=5:1)2BV;收集洗脱四所得流分。
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