恭喜内蒙古大学;内蒙古鄂尔多斯资源股份有限公司刘东军获国家专利权
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龙图腾网恭喜内蒙古大学;内蒙古鄂尔多斯资源股份有限公司申请的专利特异性靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116144652B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210927396.9，技术领域涉及：C12N15/113；该发明授权特异性靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA及其应用是由刘东军;张耀光;高源;郝斐;宋卫国;高丽忠设计研发完成，并于2022-08-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本特异性靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供了特异性靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA和利用CRISPRCas9系统介导完成定点敲除以及定点整合EGFP基因的应用。本发明首先利用生物信息学方法预测出H11位点的完整序列SEQIDNO.1，然后针对H11位点设计了两个sgRNASEQIDNO.2和3，转录所述sgRNA序列的DNA序列如SEQIDNO.4或5所示。构建了基于CRISPRCas9系统的打靶载体，然后利用TA克隆测序对sgRNA的引导效率进行验证，同时构建了同源整合EGFP基因载体，最后利用筛选出的sgRNACas9gRNA共表达载体和同源整合载体H11‑EGFP同时转染进绒山羊胎儿成纤维细胞，获得了H11位点定点整合EGFP基因的细胞株。本发明的sgRNA能特异识别绒山羊的H11位点，引导Cas9核酸内切酶对该位点进行高效切割，打靶效率在50％以上，能有效减少CRISPRCas9系统存在的脱靶现象，进而减少因非特异性切割造成的非目标基因序列的突变。通过构建Cas9gRNA表达载体可以在细胞、胚胎甚至是个体水平实现H11位点的特异性修饰敲除或敲入，从而研究特定基因的表达情况，为新品种山羊的培育提供技术支持。
本发明授权特异性靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA及其应用在权利要求书中公布了：1.特异靶向绒山羊安全位点H11的sgRNA，其sgRNA序列如SEQIDNO.2；所述绒山羊安全位点H11位于山羊第17染色体，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。
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