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恭喜温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)黄秀峰获国家专利权

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龙图腾网恭喜温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)申请的专利新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119464393B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510071579.9,技术领域涉及:C12N15/89;该发明授权新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法是由黄秀峰;夏雨寒;伍逸清设计研发完成,并于2025-01-16向国家知识产权局提交的专利申请。

新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法在说明书摘要公布了:新生儿先天性消化道梗阻是在胎儿发育过程中由于多种因素引发的消化系统结构畸形,本发明提供一种新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法,将gRNA靶点序列设计在斑马鱼ZIC3基因的氨基酸结构域上,sgRNA具体序列为GCGCCATAAGGTTCCGTACGAGG,合成引物;ZIC3突变斑马鱼幼鱼为发育到6‑7天大,通过多步骤的检测获得胚胎检测有效突变类型斑马鱼。

本发明授权新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法在权利要求书中公布了:1.新生儿先天性消化道梗阻斑马鱼模型的建立方法,其特征在于,包括下列步骤:S1、将gRNA靶点序列设计在斑马鱼的ZIC3基因的氨基酸结构域上,sgRNA具体序列为GCGCCATAAGGTTCCGTACGAGG,合成引物;S2、以pMD19-gata5_gRNAscaffold载体为模板,使用步骤S1中的引物制备gRNA体外转录模板;S3、将步骤S2的gRNA体外转录模板进行体外转录、纯化回收获得gRNA;S4、将步骤S3回收获得gRNA和Cas9mRNA新鲜混合,使gRNA终浓度达到320ngμL,Cas9mRNA达到800ngμL后显微注射入单细胞期斑马鱼胚胎,每个靶点注射180~220枚;S5、收集步骤S4注射入单细胞期斑马鱼胚胎完成72小时后的斑马鱼胚胎,提取基因组,PCR扩增目标片段,测序,测序结果为双峰的注射批次胚胎进入饲养系统,饲养待性成熟时通过筛选其下一代胚胎检测有效突变类型斑马鱼,从而获得ZIC3突变斑马鱼。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院),其通讯地址为:325000 浙江省温州市鹿城区蒲鞋市街道学院西路109号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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