深圳先进技术研究院黄卫人获国家专利权
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龙图腾网获悉深圳先进技术研究院申请的专利CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法、供体DNA及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118995819B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411472459.1，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法、供体DNA及其应用是由黄卫人;王熵设计研发完成，并于2024-10-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法、供体DNA及其应用在说明书摘要公布了：本申请涉及基因工程技术领域，具体公开一种CRISPR‑Cas9介导的外显子定点突变方法、供体DNA及其应用。其中CRISPR‑Cas9介导的外显子定点突变方法为：在目标外显子上插入人工内含子，并运用细胞同源重组修复机制，在同源臂上引入突变碱基，以对目标外显子进行定点突变；所述人工内含子包括内含子识别单元以及插入在内含子识别单元中的报告基因表达单元；所述内含子识别单元用于细胞对人工内含子进行识别以在转录时对人工内含子进行切割；所述报告基因表达单元包括报告基因和使报告基因表达的启动子。本申请可以将人工内含子插入至基因序列的任意位置，进而缩短酶切位点与编辑位点的碱基距离，以获得更小的CT值，使外显子定点突变效率得以提高。
本发明授权CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法、供体DNA及其应用在权利要求书中公布了：1.一种CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法，其特征在于，所述外显子定点突变方法为在人源细胞中，在目标外显子上插入人工内含子，并运用细胞同源重组修复机制，在同源臂上引入突变碱基，以对目标外显子进行定点突变；其中，所述人工内含子包括内含子识别单元以及插入在内含子识别单元中的报告基因表达单元，所述内含子识别单元的核酸序列为人源血红蛋白β亚基基因的部分内含子序列，如SEQIDNo.1所示；所述内含子识别单元用于细胞对人工内含子进行识别以在转录时对人工内含子进行切割；所述报告基因表达单元包括报告基因和使报告基因表达的启动子；所述CRISPR-Cas9介导的外显子定点突变方法在体外进行。
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