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龙图腾网恭喜广东忠信生物科技有限公司申请的专利高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115161311B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211007203.4，技术领域涉及：C12N15/06；该发明授权高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用是由唐勇;梁家杰;杜祎凡设计研发完成，并于2022-08-22向国家知识产权局提交的专利申请。

本高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用，涉及免疫学技术领域。本发明的方法通过将Oleyl‑PEG‑NHS与抗原偶联后，得到Oleyl‑PEG‑NHS‑抗原，在待筛选的脾脏细胞中加入Oleyl‑PEG‑NHS‑抗原培养，弃上清，清洗；再加入荧光物质标记的抗鼠二抗孵育，弃上清，清洗；加入基础培养基，用流式细胞仪对要筛选的细胞进行分选，获得有荧光标记的细胞，即为特异性浆细胞群，将特异性浆细胞群与骨髓瘤细胞融合，在暗场下使用单细胞挑取仪对染色后的强阳性杂交瘤细胞进行挑取，即可得到分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。该方法高效快捷、准确率高，可用于快速筛选得到分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，从而能用于高效制备鼠源单克隆抗体。

本发明授权高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将Oleyl-PEG-NHS与抗原偶联，得到Oleyl-PEG-NHS-抗原；2将脾脏细胞清洗后，加入Oleyl-PEG-NHS-抗原，于37℃、5％CO2的条件下进行孵育180min，然后弃上清，清洗脾脏细胞；3将荧光物质标记的抗鼠二抗加入到步骤2处理好的脾脏细胞中，于37℃、5％CO2的条件下进行孵育120min，然后弃上清，清洗脾脏细胞；4将脾脏细胞通过流式细胞仪分选，分选出带荧光标记的细胞，即为分泌特异性抗体的浆细胞；5将浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合，得到杂交瘤细胞，其中，浆细胞的细胞数和骨髓瘤细胞的细胞数的比例为1：5～1：10；6将杂交瘤细胞按照步骤2和步骤3进行染色后，用单细胞挑取仪对具有强荧光的杂交瘤细胞进行挑取，得到分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞；获得脾脏细胞的步骤如下：1免疫4-6周雌性BALBc小鼠，初次免疫小鼠时需将体积比为1:1的抗原和弗氏完全佐剂混合乳化，抗原剂量为100μg只；之后每次免疫将抗原和弗氏不完全佐剂混合乳化，抗原剂量为100μg只；冲刺免疫时选择无佐剂免疫，抗原剂量为50μg只；2ELISA间接法评估小鼠血清中抗体含量；3取小鼠脾脏，研磨过200目细胞筛后获得脾脏细胞。

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