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龙图腾网恭喜谷雨生物科技集团股份有限公司;广州青囊生物科技有限公司申请的专利一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶及其制备方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119120431B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-09发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411221196.7，技术领域涉及：C12N9/42；该发明授权一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶及其制备方法与应用是由吴学明;侯森;童梦西;李安章设计研发完成，并于2024-09-02向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶及其制备方法与应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶及其制备方法与应用，属于微生物技术领域。本发明的复合酶包括β‑葡萄糖苷酶、果糖基转移酶、乳糖酶、纤维素酶和β‑葡聚糖酶。本发明通过选取β‑葡萄糖苷酶、果糖基转移酶、乳糖酶、纤维素酶和β‑葡聚糖酶搭配得到复合酶，能够在酶工程工艺中制备人参皂苷CK，具有协同增效将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷CK的转化率提高的作用。

本发明授权一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶及其制备方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种高效转化高纯度稀有人参皂苷CK的复合酶，其特征在于，包括β-葡萄糖苷酶、果糖基转移酶、乳糖酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶，所述β-葡萄糖苷酶、果糖基转移酶、乳糖酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶的重量比为β-葡萄糖苷酶：果糖基转移酶：乳糖酶：纤维素酶：β-葡聚糖酶＝0.05-0.2：0.005-0.2：0.01-0.1：0.01-0.1：0.02-0.1；所述β-葡萄糖苷酶的制备方法包括以下步骤：A1、对来源于土壤中华单胞菌的β-葡萄糖苷酶进行密码子优化，通过基因编辑技术制备得到带有β-葡萄糖苷酶编码序列的表达载体，所述密码子优化后的β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；A2、将步骤A1所述表达载体转化至大肠杆菌中，通过筛选及鉴定得到阳性克隆；A3、将步骤A2所得阳性克隆制备为二级种子液，利用二级种子液进行分批补料发酵，得到发酵液；A4、对步骤A3所得发酵液进行离心，收集菌体沉淀，对所得菌体沉淀进行破碎、离心、浓缩和冻干处理，得到β-葡萄糖苷酶；在步骤A3中，所述分批补料发酵包括以下操作：B1、将二级种子液接种至发酵培养基中，调节pH＝6.6-7.0，温度设置为35-37℃；所述二级种子液与发酵培养基的体积比为二级种子液：发酵培养基＝0.8-1:30；B2、当溶氧下降至60-70％时，调温至23-27℃并开始补料，第一小时补料速度190-200mLh，第二小时补料速度220-230mLh，第三小时补料速度250-260mLh并维持不变；通过控制罐压，转速和通空气量以控制溶氧慢慢下降至12-18％；补料后每4h取样检测发酵液的OD600值，当OD600值不再上升时结束发酵。

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