买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉中国农业科学院农业基因组研究所申请的专利一种适用于复杂多倍体植物的Pore-C文库的构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118325892B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410403503.7，技术领域涉及：C12N15/10；该发明授权一种适用于复杂多倍体植物的Pore-C文库的构建方法是由赵萍;张兴坦;王毅斌;宫雨晴设计研发完成，并于2024-04-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种适用于复杂多倍体植物的Pore-C文库的构建方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种适用于复杂多倍体植物的Pore‑C文库的构建方法，涉及植物基因工程技术领域。本发明将植物组织研磨成细粉后加入到细胞核提取液中，同时进行DNA与蛋白质交联，通过过滤和蔗糖密度梯度离心法得到细胞核沉淀；1×PBS清洗细胞核后用细胞核提取液重悬细胞核，进行Percoll密度梯度离心后加入同等体积的0.25M蔗糖分离得到完整纯净的细胞核；然后进行原位细胞核酶切、连接、解交联；后用DNA提取液抽提2遍，取上清加入氯化钠、醋酸钠和无水乙醇获取DNA。提取的DNA为5‑9μg，可以上机3‑7个cell，得到300G‑1T数据，大大降低了成本。

本发明授权一种适用于复杂多倍体植物的Pore-C文库的构建方法在权利要求书中公布了：1.一种适用于复杂多倍体植物的Pore-C文库的构建方法，其特征在于：将植物组织研磨成细粉后加入到细胞核提取液中，同时进行DNA与蛋白质交联，通过过滤和蔗糖密度梯度离心法得到细胞核沉淀；1×PBS清洗细胞核后用细胞核提取液重悬细胞核，进行Percoll密度梯度离心后加入同等体积的0.25M蔗糖分离得到纯净细胞核；然后进行原位细胞核酶切、连接、解交联；后用DNA提取液抽提2遍，取上清加入氯化钠、醋酸钠和无水乙醇获取DNA；所述植物组织为各种龄期的新鲜或冷冻后的材料；所述细胞核提取液组成为：0.4Msucrose、10mMTris-HCl，pH8、10mMKCl、0.5%TritonX-100、10mMEDTA，pH8、1%PVP40、0.25%β-Mercaptoethanol、0.1mMPMSF；蔗糖梯度离心溶液组成为：1.7Msucrose、20mMTris-HCl，pH8、2mMKCl、0.2%TritonX-100、2mMEDTA，pH8、0.25%β-Mercaptoethanol、0.1mMPMSF；所述DNA提取液组成为：苯酚:氯仿:异戊醇=25:24:1；酶切反应液组成为：30µL20UµLHindIII、50µLNEBbuffer2.1、20µL无酶水；或，40µL10UµLDpnII、50µLNEBbuffer3.1、10µL无酶水；连接反应液组成为：260µL无菌无酶水、100µL10%TritonX-100、100µL10×ligationbuffer、5µL20µgµLRecombinantalbumin、30µL400UµLT4DNAligase；或，415µL无菌无酶水、100µL10×ligationbuffer、5µL20µgµLRecombinantalbumin、30µL400UµLT4DNAligase；所述蔗糖密度梯度离心法为根据基因组大小确定离心力。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人中国农业科学院农业基因组研究所，其通讯地址为：518120 广东省广州市深圳市大鹏新区布新路97号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。