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申请/专利权人：无锡中科光远生物材料有限公司

摘要：本发明属于生物材料领域，具体涉及一种装载17‑DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，利用高压静电纺丝技术，将17‑DMAG溶解在二甲基亚砜DMSO后，加入到PCLPEG溶液中进行静电纺丝制备纳米纤维支架。本发明解决了现有技术对17‑DMAG的使用问题，通过17‑DMAG与PCLPEG纳米纤维支架结合得到具有愈合和抗菌性能的纳米纤维支架。

主权项：1.一种装载17‑DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17‑DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17‑DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17‑DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17‑DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17‑DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17‑DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17‑DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。

全文数据：一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法技术领域本发明属于生物材料领域，具体涉及一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法。背景技术手术是肺癌患者的标准治疗方法。然而，手术后5年内约50％的患者会出现局部癌症复发。局部复发是由于手术后存在残留的显微镜下癌细胞，特别是对于无法耐受侵袭性切除的患者。因此，非常需要制备和开发能够有效杀死残留的癌细胞并防止局部肺癌复发的药剂。热休克蛋白90HSP90是细胞内最丰富的蛋白质之一，存在于正常的细胞中并行使重要的生理功能，其合成受到温度变化、糖耗竭、感染等各种应激因子的快速调节。近年来发现HSP90与肿瘤的关系密切，在肝瘤细胞中HSP90呈过表达，几乎控制了所有恶性肿瘤细胞表现型组成及细胞信号传导通路。HSP90的作用蛋白主要是信号传到系统的激酶分子及一些突变蛋白，这些信号传到分子的过渡表达或激活在肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。有实验发现HSP90在肝瘤组织中的含量是相应正常细胞的2-10倍，且能够与较低浓度的17-AGG迅速结合，从而使17-AGG主要聚集在肝瘤组织，优先杀伤肝瘤细胞。17-AGG与肝瘤细胞来源尤其是高表达HER-2的肝瘤细胞的HSP90的亲和力明显高于来源于正常组织的HSP90，而且肝瘤细胞中HSP90ATP酶对17-AGG具有更强的结合力，说明格尔德霉素类HSP90抑制剂可以选择性靶向作用于肝瘤细胞，为治疗恶性肝瘤提供一种新的选择。17-AGG是将GA分子中17位的甲氧基换为烯丙氨基的衍生物，17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素17-DMAG是GA的另一种衍生物，在水溶性和生物利用度方面均优于17-AGG。但是17-DMAG本身具有强大的药性，不能通过服用或者涂抹的方式，需要直接植入，目前还未有相容性好且匹配性好的支架。发明内容针对现有技术中的问题，本发明提供一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，解决了现有技术对17-DMAG的使用问题，通过17-DMAG与PCLPEG纳米纤维支架结合得到具有愈合和抗菌性能的纳米纤维支架。为实现以上技术目的，本发明的技术方案是：一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为15-20h，温度为17-23℃。所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为15-25kV，推进速度为10-30μLmin，接收距离为15-30cm，滚筒转速为200-500rmin。所述步骤5中的干燥温度为17-23℃。所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。本发明将17-DMAG溶解在DMSO中形成溶解，然后溶解在PCLPEG共聚物的二氯甲烷甲醇中，形成混合液，然后经由静电纺丝制呈装载有17-DMAG的纳米纤维支架。将17-DMAG溶解在DMSO中形成良好的分散体系，然后加入至PCLPEG共聚物的二氯甲烷甲醇中形成分散溶解，解决了17-DMAG的溶解性问题。从以上描述可以看出，本发明具备以下优点：1.本发明解决了现有技术对17-DMAG的使用问题，通过17-DMAG与PCLPEG纳米纤维支架结合得到具有愈合和抗菌性能的纳米纤维支架。2.本发明制备的纳米纤维支架具有良好的生物降解性，能够起到良好的缓释效果，确保17-DMAG的缓慢释放，同时也具有良好的生物相容性。3.本发明提供的制备能够在静电纺丝过程中直接将溶剂去除，形成稳定的纳米纤维。4.本发明中的PCLPEG具有良好的生物相容性，血液相容性，可降解性的优势，是形成17-DMAG缓释的基础。附图说明图1是本发明实施例1的扫描电镜图。具体实施方式结合图1，详细说明本发明的一个具体实施例，但不对本发明的权利要求做任何限定。实施例1一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为18h，温度为17℃。所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为19kV，推进速度为17μLmin，接收距离为20cm，滚筒转速为200rmin。所述步骤5中的干燥温度为17-23℃。所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。经检测，纳米纤维支架的纤维直径为200nm，如图1所示。实施例2一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为20h，温度为23℃。所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为21kV，推进速度为20μLmin，接收距离为25cm，滚筒转速为300rmin。所述步骤5中的干燥温度为23℃。所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。实施例3一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为15h，温度为17℃。所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为15kV，推进速度为10μLmin，接收距离为15cm，滚筒转速为200rmin。所述步骤5中的干燥温度为17℃。所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。实施例4一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为20h，温度为23℃。所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为25kV，推进速度为30μLmin，接收距离为30cm，滚筒转速为500rmin。所述步骤5中的干燥温度为23℃。所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。性能检测实施例1实施例2实施例3实施例4纳米纤维直径200nm276nm219nm340nm生物相容性好好好好抗菌性能99.9％100％100％100％综上所述，本发明具有以下优点：1.本发明解决了现有技术对17-DMAG的使用问题，通过17-DMAG与PCLPEG纳米纤维支架结合得到具有愈合和抗菌性能的纳米纤维支架。2.本发明制备的纳米纤维支架具有良好的生物降解性，能够起到良好的缓释效果，确保17-DMAG的缓慢释放，同时也具有良好的生物相容性。3.本发明提供的制备能够在静电纺丝过程中直接将溶剂去除，形成稳定的纳米纤维。4.本发明中的PCLPEG具有良好的生物相容性，血液相容性，可降解性的优势，是形成17-DMAG缓释的基础。可以理解的是，以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案。本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换，以达到相同的技术效果；只要满足使用需要，都在本发明的保护范围之内。

权利要求：1.一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1配置PCLPEG共聚物溶液步骤1，将PCLPEG共聚物加入至二氯甲烷甲醇中，溶解得到PCLPEG共聚物溶液；2配置装载17-DMAG的PCLPEG溶液步骤2，将17-DMAG溶解在DMSO中，然后加入至PCLPEG共聚物溶液中搅拌均匀，得到装载17-DMAG的PCLPEG溶液；步骤3，将装载17-DMAG的PCLPEG溶液中恒温搅拌；3高压静电纺丝制备装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架步骤4，将步骤3中的装载17-DMAG的PCLPEG溶液装入静电纺丝装置中进行高压静电纺丝，得到纳米纤维支架；步骤5，将纳米纤维支架放入真空干燥箱内干燥；步骤6，将干燥后的纳米纤维支架进行灭菌处理，得到装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架。2.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤1中的PCL与PEG的质量比为9:1，二氯甲烷与甲醇的体积比为4:1，PCLPEG与二氯甲烷甲醇的质量比为1:9。3.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤2中的17-DMAG在DMSO中的质量浓度为10％，所述装载17-DMAG的PCLPEG溶液中PCLPEG与17-DMAG的质量比为1:99。4.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤3中的恒温搅拌的搅拌时间为15-20h，温度为17-23℃。5.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤4中的高压静电纺丝参数如下：纺丝电压为15-25kV，推进速度为10-30μLmin，接收距离为15-30cm，滚筒转速为200-500rmin。6.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤5中的干燥温度为17-23℃。7.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤6中的灭菌处理包括：s1，采用70％的酒精清洗3次；s2，将清洗后的支架的顶部与底部放入紫外灯下进行灭菌处理15min。8.根据权利要求1所述的一种装载17-DMAG的PCLPEG纳米纤维支架的制备方法，其特征在于：所述步骤1中的PCLPEG共聚物是以辛酸亚锡为催化剂，将PCL和PEG开环聚合而成。

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