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申请/专利权人：阿尔尼拉姆医药品有限公司

摘要：本发明涉及以D型肝炎病毒HDV基因组为靶向的RNAi剂，如双链RNAi剂，及使用此类RNAi剂来抑制一种或多种HBV基因的表达的方法以及治疗患有HDV感染和或HDV相关病症的患者的方法。

主权项：一种双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达，其中，该双链RNAi剂包含形成双链区域的选自下组的正义链及反义链，该组由以下各项组成a正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:29的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:30的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；b正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:31的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:32的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；c正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:33的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:34的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；d正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:35的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:36的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；e正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:37的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:38的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；f正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:39的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:40的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；g正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:41的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:42的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；h正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:43的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:44的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；以及i正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:2551的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQ ID NO:2552的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；其中，该正义链的实质上全部的核苷酸及该反义链的实质上全部的核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’‑末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。

全文数据：D型肝炎病毒HDViRNA组合物及其使用方法[0001]相关申请[0002]本申请案主张于2014年11月10日递交的第62077,672号美国专利临时申请案的优先权，该临时申请案的整体内容是借由引用而并入本文。[0003]本申请案主张于2014年11月10日递交的第62077,799号美国专利临时申请案及于2015年3月24日递交的第62137,464号美国专利临时申请案的优先权。前述临时申请案的整体内容是各自借由引用而并入本文。[0004]本申请案是与2015年11月10日递交的题为“HepatitisBVirisHBViRNACompositionsandMethodsofUseThereof”的第PCTUS2015XXXXX号国际专利申请案AttorneyDocketNo.:121301-02820相关，后者的整体内容是借由引用而并入本文。[0005]序列表[0006]本申请案是含有序列表，该序列表已经以ASCII格式经由电子版形式缴交且借由引用而一起整体并入本文。于2015年11月6日创建的所述ASCII副本是命名为121301-02820_SL·txt，其大小为774，780字节。背景技术[0007]D型肝炎病毒或丁型肝炎病毒HDV是人类病原体。事实上，HDV感染在若干非洲国家、亚马逊地区及中东非常流行，而在除地中海地区外的工业化国家并不盛行。然而，该病毒有缺陷且依赖于B型肝炎病毒HBV提供的必须辅助功能来传输;事实上，HDV需要与HBV同时感染合并感染或与预先存在的HBV感染叠加重复感染）以变得易感染且快速增长。特别地，HDV需要该含有B型肝炎的表面抗原的HBV病毒外壳。[0008]在人类病毒性中，HDV是独特的，其具有约1，700个碱基的环状RNA基因组（参见，如，GenbankAccessionN〇.M21012.1GI:329989，因此是人类中最小致病原infectionsagent，且类似于类病毒及植物的卫星RNA13HDV是借由未知于动物细胞的滚环机制而复制，具有自切性核糖酶，且借由正常仅接受DNA模板的宿主RNA聚合酶而转录CiancioandRizzetto，Nat.Rev.ll:68_71，2014〇[0009]HDV是环状单链RNA病毒，具有的核苷酸范围为I，672个dFr45株，Genbank登录号AX741144至1，697个dFr47,GenBank登录号AX741149。独特的开读框是借由肝细胞核内的修饰步骤来编码小的及大的丁型肝炎分别为sHD与1HD的抗原。[0010]HDV的基因多样性是与隔离群的地理起源有关，存在有指称为HDV-I至HDV-8的至少8种基因型。与分布甚广的HDV-I不同，HDV-2先前记为HDV-IIa仅于日本、台湾、及雅库特，俄罗斯发现;HDV-4先前记为HDV-IIb仅于台湾及日本发现;HDV-3造成亚马逊区域严重且暴发性肝炎的流行（9;以及，^¥-5、^¥-6、^¥-7、及!10¥-8于非洲发现（1^61的al·,Emerg.Infect.Dis·12:1447-1450，2006。[0011]全世界超过4亿人慢性感染HBV。再者，1980年代末期，全球至少5%的B型肝炎表面抗原⑽sAg带原者（约1，500万人被评估为亦感染HDV。感染HBV的受试者增加了发生严重肝病如慢性肝炎、肝硬化、肝脏衰竭、及肝细胞癌HCC的风险，据估计此类疾病每年造成600,OOO例死亡，此类受试者体内的HDV感染合并感染或重复感染可导致与HBV相关的严重的急性及慢性肝病。实际上，HDV的重复感染及合并感染是导致比单独感染HBV更严重的并发症。此类并发症是包括对于标准治疗方法的抗性、在急性感染中出现肝脏衰竭的更大可能性、以及更快进展为肝硬化，且在慢性感染中发展为肝癌的机会增加。与B型肝炎病毒组合，D型肝炎病毒是具有全部肝炎感染中最高的20%致死率。[0012]据此，该技术领域中存在有对于用于感染HDV和或患有HDV相关疾病的受试者的替代疗法及组合疗法的需求。发明内容[0013]本发明是提供一种iRNA组合物，其是影响D型肝炎病毒⑽V基因的RNA转录本的RNA诱导沉默复合物RISC介导的裂解。该HDV基因可在细胞中，该细胞是受试者如人体内的细胞。[0014]本发明还提供治疗受试者的方法及疗法，该受试者是患有从抑制或降低HDV基因的表达中获益的疾病，如HDV感染和或HDV相关疾病，如B型肝炎病毒感染、慢性B型肝炎感染CHB、慢性D型肝炎感染CHD、肝硬化、肝脏衰竭、及肝细胞癌HCC，是使用iRNA组合物来抑制HDV基因的表达，且该iRNA组合物是影响HDV基因的RNA转录本的RNA诱导沉默复合物RISC介导的裂解。由于HDV是依赖于HBV提供的必须辅助功能来传输，该治疗HDV的方法可包含有用于治疗HBV和或HBV相关疾病如D型肝炎病毒感染、慢性D型感染感染CHD、慢性B型肝炎感染CHB、肝硬化、肝脏衰竭、及肝细胞癌HCC的药剂及疗法。[0015]某些方面中，本发明的RNAi剂已经设计为以HDV基因组中的保留区域为靶向，该区域存在于HDV的8种血清型HDV-1、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、及HDV-8的至少2个，优选3个，或更多个内。[0016]据此，一方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:29的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:30的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸；其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0017]另一方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:31的核苷酸序列差异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:32的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0018]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:33的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:34的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0019]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:35的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含，与SEQIDNO:36的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0020]另一方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:37的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:38的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子接合的一个或多个GalNAc。[0021]再一方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:39的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:40的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸；其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0022]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:41的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:42的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0023]另一方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:43的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:44的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。[0024]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含与SEQIDNO:2551的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，该反义链包含与SEQIDNO:2552的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc。某些方面中，该双链RNAi剂的正义链包含与SEQIDNO:2551的核苷酸序列的核苷酸1451至1484、核苷酸1455至1480、核苷酸1455至1474、或核苷酸1417至1443相差不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0025]于一方面中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该反义链中的错配核苷酸。[0026]于另一方面中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该正义链中的错配核苷酸。[0027]于一方面中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是经修饰的核苷酸。[0028]于一方面中，该正义链与该反义链包含一互补性区域，该互补性区域是包含与表11、12、31、及32任一者中列述的任一核苷酸相差不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0029]于某些方面中，该正义链与该反义链包含一互补性区域，该互补性区域是包含与双螺旋厶0-70260.1^0-70232.1、厶0-70249.1^0-70244.1^0-70272.1、厶0-70228.1、八0-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、及AD-70275·I中任一者的正义链及反义链的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。于其他方面中，该正义链与反义链包含一互补性区域，该互补性区域是包含，与双螺旋40-70260.10-70232.1、八0-70249·I、AD-70244·I、AD-70272·I、AD-70228·I、AD-70255·I、AD-70278·1、及AD-70295·1中任一者的正义链及反义链的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0030]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0031]于一方面中，至少一链是包含至少1个核苷酸的3’突出端。于另一方面中，至少一链是包含至少2个核苷酸的3’突出端。[0032]于一方面中，该双链区域的长度为15至30对核苷酸对。于另一方面中，该双链区域的长度为17至23对核苷酸对。于再一方面中，该双链区域的长度为17至25对核苷酸对。于一方面中，该双链区域的长度是23至27对核苷酸对。于另一方面中，该双链区域的长度是19至21对核苷酸对。于再一方面中，该双链区域的长度是21至23对核苷酸对。[0033]于一方面中，每一链是具有15至30个核苷酸。于另一方面中，每一链是具有19至30个核苷酸。[0034]于一方面中，该配体是[0036]于一方面中，该RNAi剂是如下方案所示接合至该配体[0038]其中，X是0或S。[0039]于一方面中，该RNAi剂是选自表11、12、31、及32任一者中列述的1«^1剂所组成的组。[0040]于一方面中，该剂是选自AD-70260·I、AD-70232·I、AD-70249·I、AD-70244·I、AD-70271·I、AD-70268·I、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·1、及AD-70275·1所组成的组。[0041]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达。该双链RNAi剂是包括形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含来自表11、12、31、及32的任一正义序列，且该反义链包含来自表11、12、31、及32的任一反义序列，其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义是接合至附接于3’-末端的配体，以及，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0042]于一方面中，该正义链是选自AD-70260·I、AD-70232·I、AD-70249·I、AD-70244·1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271·l、AD-70268.UAD-70269.UAD-70232.UAD-70256.l、AD-70257.1、或AD-70275.1的正义链序列所组成的组。[0043]于另一方面中，该反义链是选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-6721I·I、AD-67199·I、AD-67202·I、AD-67208·I、AD-67210·I、AD-70259·I、AD-70267·I、AD-70272·I、AD-70271·I、AD-70268·I、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275.1的反义链序列所组成的组。[0044]本发明还提供包含正义及反义核苷酸序列的RNAi剂，于其整体长度中，这些核苷酸序列的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%是与前述正义及反义核苷酸序列一致。[0045]于一方面中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是包含修饰。[0046]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0047]于一方面中，该5’-磷酸酯模拟物是5’-乙烯基磷酸酯5’-VP。[0048]于一方面中，该配体是[0050]于一方面中，该RNAi剂是如下方案所示接合至该配体[0052]其中，X是0或S。[0053]一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:29的核苷酸序列差异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，这些反义链是各自独立包含与SEQIDN0:30的核苷酸序列差异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸；其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0054]另一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDN0:31的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:32的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0055]另一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:33的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:34的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0056]再一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:35的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:36的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0057]—方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:37的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:38的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0058]另一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:39的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:40的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0059]另一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:41的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:42的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0060]—方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:43的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:44的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸;其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0061]另一方面，本发明是提供组合物，其是包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是各自独立包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，这些正义链是各自独立包含与SEQIDNO:2551的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，及这些反义链是各自独立包含与SEQIDNO:2552的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸;其中，每一正义链的实质上全部核苷酸及每一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸；其中，这些正义链是各自独立接合至附接于3’-末端的配体；以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GaINAc衍生物。[0062]于某些方面中，该第一及第二双链RNAi剂的一者或两者的正义链包含来自SEQIDNO:2551核苷酸序列的核苷酸1451至1484、核苷酸1455至1480、核苷酸1455至1474、或核苷酸1417至1443的至少15个连续核苷酸。[0063]于一方面中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该反义链中的不匹配核苷酸。于另一方面中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该正义链中的错配核苷酸。[0064]于一方面中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是经修饰的核苷酸。[0065]于一方面中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该互补性区域是包含与表11、12、31、及31任一者中列述的任一序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0066]于某些方面中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该互补性区域是包含与双螺旋厶0-70260.1、厶0-70232.1、厶0-70249.1、厶0-70244.1、厶0-70272.1、厶0-70228.1、八0-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275·I任一者的正义链及反义链序列的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0067]于其他方面中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该互补性区域是包含与AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、或AD-70295.1任一者的正义链及反义链序列的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。[0068]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0069]另一方面，本发明是提供用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内表达的组合物，该组合物是包含：（a第一双链RNAi剂，是包括形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及，⑹第二双链RNAi剂，是包括形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物;其中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自由来自表11、12、31、及32的任一正义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），以及，其中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自由表11、12、31、及32的任一反义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0070]于一方面中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自由AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一正义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0071]于另一方面中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自由AD-70260.UAD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一反义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0072]于一方面中，该第一及第二正义链的全部核苷酸和或该第一及第二反义链的全部核苷酸是包含修饰。[0073]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5_脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0074]于一方面中，该第一及第二RNAi剂是选自表11、12、31、及32中提供的任一序列所组成的组。[0075]于一方面中，该第一及第二RNAi剂是选自AD-70260·I、AD-70232·I、AD-70249·1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一者所组成的组。[0076]于一方面中，该第一及第二RNAi剂是选自由AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249·I、AD-70244·I、AD-70272·I、AD-70228·I、AD-70255·I、AD-70278·1、或D-70295·1的任一者所组成的组。[0077]—方面，本发明是提供双链RNAi剂，其是包含表11、12、31、32的任一者列述的任一RNAi剂。[0078]于一方面中，该剂是选自由AD-70260·I、AD-70232·I、AD-70249·I、AD-70244·1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271·l、AD-70268.UAD-70269.UAD-70232.UAD-70256.l、AD-70257.1、或AD-70275·I所组成的组。于另一方面中，该剂是选自由AD-70260·I、AD-70232·I、AD-70249·I、AD-70244·I、AD-70272·I、AD-70228·I、AD-70255·I、AD-70278·I、或AD-70295·1所组成的组。[0079]本发明还提供包含本发明的双链RNAi剂的载体及细胞。[0080]另一方面，本发明是提供包含本发明的双链RNAi剂、本发明的组合物、或本发明的载体的药物组合物。[0081]于一方面中，该双链RNAi剂是于非缓冲溶液中给药。于一方面中，该非缓冲溶液是生理盐水或水。[0082]于另一方面中，该双链RNAi剂是与缓冲溶液一起给药。于一方面中，该缓冲溶液是包含醋酸盐、柠檬酸盐、醇溶蛋白（prolamine、碳酸盐、磷酸盐、或其组合。于另一方面中，该缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液PBS。[0083]—方面，本发明是提供抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的基因表达的方法。该方法是包括使该细胞与本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物接触；以及，将所制造的细胞保持一段时间，该时间是足以获得HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制HDV基因于该细胞中的表达。[0084]—方面，本发明是提供抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的复制的方法。该方法是包括使该细胞与本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物接触；以及，将所制造的细胞保持一段时间，该时间是足以获得HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制HDV基因于该细胞中的复制。[0085]于一方面中，该细胞是位于受试者体内。于一方面中，该受试者是人。[0086]于一方面中，该受试者是患有HDV相关的疾病。[0087]于一方面中，HDV基因表达被抑制了至少约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约98%、或约100%。[0088]于一方面中，HDV于细胞内的复制被抑制了至少约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约98%、或约100%。[0089]一方面，本发明是提供于感染有HDV的受试者体内降低D型肝炎病毒HDVDNA的含量的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物，从而降低HDVDNA于受试者体内的含量。[0090]另一方面，本发明是提供于感染有HDV的受试者体内降低D型肝炎病毒HDV抗原的含量的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物，从而降低HDV抗原于受试者体内的含量。大的HDV抗原的含量得以降低，小的HDV抗原的含量得以降低，或大的HDV抗原及小的HDV抗原两者的含量皆得以降低。[0091]另一方面，本发明是提供降低感染有HDV的受试者体内的D型肝炎病毒HDV病毒载量的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、本发明的载体、或本发明的药物组合物，从而降低受试者体内的HDV载量。[0092]—方面，本发明是提供治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物，从而治疗该受试者。[0093]另一方面，本发明是提供治疗患有D型肝炎病毒HDV相关疾病的受试者的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的本发明的双链RNAi剂、或本发明的组合物、或本发明的载体、或本发明的药物组合物，从而治疗该受试者。[0094]于一方面中，该HDV相关疾病选自下组，该组由以下各项组成:B型肝炎病毒感染、急性B型肝炎、急性D型肝炎、急性暴发性D型肝炎、慢性D型肝炎、肝纤维化、末期肝病、肝细胞癌。[0095]—方面，本发明是提供治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的双链RNAi剂，其中，该双链RNAi剂是包含形成双链的正义链及反义链，其中，该正义链包含来自表11、12、31、及32任一者的任一正义序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），且该反义链包含来自表11、12、31、及32任一者的任一反义序列或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物，从而的治疗该受试者。[0096]于一方面中，该正义链包含选自由厶0-70260.1、厶0-70232.1、厶0-70249.1、八0-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-6721I·I、AD-67199·I、AD-67202·I、AD-67208·I、AD-67210·I、AD-70259·I、AD-70267·I、AD-70272·I、AD-70271·I、AD-70268·I、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275.1的任一正义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0097]另一方面，该反义链包含选自由AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-6721I·I、AD-67199·I、AD-67202·I、AD-67208·I、AD-67210·I、AD-70259·I、AD-70267·I、AD-70272·I、AD-70271·I、AD-70268·I、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275.1的任一反义序列所组成组的序列或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0098]于一方面中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是包含修饰。[0099]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0100]于一方面中，该5’-磷酸酯模拟物是5’-乙烯基磷酸酯5’-VP。[0101]于一方面中，该配体是[0103]于一方面中，该RNAi剂是如下方案所示接合至该配体[0105]其中，X是0或S。[0106]于一方面中，该HDV相关的疾病选自下组，该组由以下各项组成：B型肝炎病毒感染、急性B型肝炎、急性D型肝炎、急性暴发性D型肝炎、慢性D型肝炎、肝纤维化、末期肝病、肝细胞癌。[0107]—方面，本发明是提供治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内表达的组合物。该组合物是包括：（a第一双链RNAi剂，是包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及，⑹第二双链RNAi剂，是包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物;其中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中的任一正义链所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），以及，其中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中的任一反义链所组成组的序列或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），从而治疗该受试者。[0108]于一方面中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自由AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一正义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0109]于另一方面中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自由AD-70260.UAD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一反义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。另一方面，本发明是提供治疗患有D型肝炎病毒HDV相关疾病的受试者的方法。该方法是包括对该受试者给药治疗有效量的用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内表达的组合物。该组合物是包括：（a第一双链RNAi剂，是包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及，（b第二双链RNAi剂，是包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及，其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物;其中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中的任一正义链所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），以及，其中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中的任一反义链所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列），从而治疗该受试者。[0110]于一方面中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自由AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一正义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0111]于另一方面中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自由AD-70260.UAD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一反义序列所组成组的序列（或其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列一致的核苷酸序列）。[0112]于一方面中，该第一及第二正义链的全部核苷酸及该第一及第二反义链的全部核苷酸是包含修饰。[0113]于一方面中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2’-脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物核苷酸。[0114]于一方面中，该配体是[0116]于一方面中，该RNAi剂是如下方案所示接合至该配体[0118]其中，X是0或S。[0119]于一方面中，该受试者是人。[0120]于一方面中，该HDV相关疾病选自下组，该组由以下各项组成:B型肝炎病毒感染、急性B型肝炎、急性D型肝炎、急性暴发性D型肝炎、慢性D型肝炎、肝纤维化、末期肝病、肝细胞癌。[0121]于某些方面中，本发明的方法进一步包含治疗受试者体内的B型肝炎病毒HBV。治疗方法包括本领域中熟知的任意方法。于某些方面中，是使用本文所提供的一种或多种iRNA剂治疗受试者体内的HBV。[0122]于某些方面中，本发明的方法进一步包括用以调节，优选为减少PD-Ll表达的方法。举例而言，用以降低I3D-Ll表达的组合物及方法是提供于第W02011127180号PCT申请案中，该申请案是借由引用而并入本文。[0123]于一方面中，该双链RNAi剂是以约0.01mgkg至约10mgkg或约0.5mgkg至约50mgkg的剂量给药。[0124]于一方面中，该双链RNAi剂是以约10mgkg至约30mgkg的剂量给药。于另一方面中，该双链RNAi剂是以约3mgkg的剂量给药。于一方面中，该双链RNAi剂是以约10mgkg的剂量给药。[0125]于一方面中，该双链RNAi剂是以约0.5mgkg的剂量每周给药两次。[0126]于一方面中，该双链RNAi剂是以约50mg至200mg的固定剂量给药。[0127]于一方面中，该双链RNAi剂是经皮下给药。于另一方面中，该双链RNAi剂是经静脉注射给药。于另一方面中，该剂是经肌肉注射给药。[0128]于一方面中，该RNAi剂是以两剂或更多剂给药。[0129]于一方面中，该RNAi剂是以选自下列所组成组的间隔给药:每约12小时一次、每约24小时一次、每约48小时一次、每约72小时一次、及每约96小时一次。[0130]于一方面中，该RNAi剂是每周给药两次。于另一方面中，该RNAi剂是每两周给药一次。[0131]于一方面中，本发明的方法进一步包括对受试者给药额外的治疗剂。[0132]于一方面中，该额外的治疗剂选自下组，该组由以下各项组成：抗病毒剂、逆转录酶抑制剂、免疫刺激剂、治疗性疫苗、病毒进入抑制剂、抑制HbsAg的分泌或释放的寡核苷酸、壳蛋白抑制剂、cccDNA抑制剂、以HBV为靶向的双链iRNA剂、及前述任意者的组合。[0133]于另一方面中，本发明的方法进一步包括对受试者给药逆转录酶抑制剂。于再一方面中，本发明的方法进一步包括对受试者给药逆转录酶抑制剂及免疫刺激剂。[0134]于一方面中，该逆转录酶抑制剂是选自富马酸替诺福韦酯（TeηOfoVirdisoproxilfumarate，TDF、替诺福韦埃拉酸胺（Tenofoviralafenamide、拉米夫定Lamivudine、阿德福韦酯Adefovirdipivoxil、恩替卡韦Entecavir，ETV、替比夫定Telbivudine、及AGX-1009所组成的组。[0135]于一方面中，该免疫刺激剂是选自聚乙二醇干扰素a2aPEG-IFN-a2a、干扰素α-2b、人类重组介白素-7、及类To11受体7TLR7启动子所组成的组。[0136]于一方面中，该以HBV为靶向的双链iRNA剂是表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的任一剂。[0137]于另一方面中，该剂是AD-65403、AD-66810、或其组合。[0138]实施方式[0139]本发明是提供iRNA组合物，其影响D型肝炎病毒HDV基因的RNA转录本的RNA诱导沉默复合物RISC介导的裂解。该基因可位于细胞内，该细胞是受试者如人体内的细胞。使用此类iRNA可使哺乳动物体内相应基因HDV基因）的靶向mRNA降解。[0140]本发明的RNAi剂已经设计为以横跨多个HDV分支clades的HDV区域为靶向。[0141]本文还提供以HBV为靶向的RNAi剂，且已经设计为借由抑制超过一种HBV基因的表达而抑制HBV生命周期的全部步骤，如病毒的复制、组装、分泌，及次病毒抗原的分泌。特别地，由于HBV基因组的转录是产生多顺反子、重叠RNA，本发明的以单一HBV基因为靶向的RNAi剂是对于大多数或全部HBV转录本产生显著抑制。举例而言，由于HBV基因组是转录为单个mRNA，本发明的以S基因为靶向的RNAi剂将不仅对S基因表达产生抑制，亦将对“下游”逆转录酶基因的表达产生抑制。再者，本发明的RNAi剂已经设计为借由以HBV结构性基因为靶向而抑制HBV病毒复制，从而使HBVX基因容许受试者的免疫系统侦检并因应HBsAg的存在而制造抗HBV抗体，以清除HBV感染。[0142]HDV感染是需要HB感染的存在，本发明证明以HDV为靶向的iRNA可强力地调节RNAi，产生对HDV基因表达的显著抑制。再者，利用体外及体内试验，本发明证明以HBV为靶向的iRNA可强力地调节RNAi，产生对于超过一种HBV基因表达的显著抑制，对于治疗HDV感染亦有效。因此，借由给药以HBV及HDV的一者或两者为靶向的iRNA，包括此类iRNA的方法及组合物是有用于治疗患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者。再者，本文所提供的组合物可用于患有HBV感染的受试者，以防止HDV感染的发展。[0143]据此，本发明还提供治疗患有疾病的受试者的方法，该受试者将会受益于抑制或降低HBV基因的表达，如HDV感染;该方法是使用影响HBV基因的RNA转录本的RNA诱导沉默复合物〇?ISC介导的裂解的iRNA组合物。[0144]特别地，本发明的非常低剂量的iRNA可专一且有效地介导RNA干扰RNAi，产生对于相应基因（HDV基因）表达的显著抑制。[0145]本发明的iRNA是包括RNA链反义链），其是具有长度为约30个或更少核苷酸的区域，如其长度为15至30、15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22个核苷酸，该区域是实质上与HBV基因的mRNA转录本的至少一部分互补。[0146]下述详细说明书是披露如何作成含有iRNA的组合物及使用该组合物抑制血管收缩素原基因的表达，以及用于治疗患有将受益于抑制和或降低HDV基因表达的疾病的受试者的组合物、用途及方法。[0147]I.定义[0148]为了更容易理解本发明，首先定义某些术语。此外，应注意，无论何时，当引述参数值的数值或范围时，是倾向于介于所引述数值之间的这些数值及范围亦为本发明的一部分。[0149]本文中使用的冠词“一”是指称该冠词的语法宾语的一个或超过一个（S卩，至少一个）。举例来说，“一组件”是意指一个组件或超过一个组件，如复数个组件。[0150]本文中所用的术语“包括”是意指短语“包括，但不限于”，且可与后者互换使用。[0151]除非上下文中明确指出者，本文中使用的术语“或”是意指术语“和或”，且可与后者互换使用。[0152]本文中，与术语“HDV”可互换使用的“D型肝炎病毒”是指称熟知的非细胞病变性肝促DNA病毒，属于肝病毒科。参见，如，CiancioandRizzetto,Nat.Rev.11:68_71,2014;LeGaletal.，Emerg.Infect.Dis.l2:1447-1450,2006;以及，Abbasandafzal,WorldJ.Hep.，5:666-675，2013，上述全部借由引用而并入。除非明确指出者，HDV是指称HDV的全部壳蛋白及其变种。[0153]HDV是制造一种名为HDAg的蛋白质。其是呈现两种形式:27kDa的大的HDAg亦指称为IHD及大的HDV抗原）以及24kDa的小的HDAg亦指称为sHD及小的HDV抗原）。两种形式的N-端一致，他们的区别在于大的HDAg的C-端多了19个氨基酸。两种同功型是自相同的阅读框制造，该阅读框通常仅制造小HDAg。然而，借由胞内酶腺苷去氨酶-1将该终止密码子变为UCG，使其制造大HDAg。尽管其序列的90%均一致，这两种蛋白质在感染进程的过程中扮演背离的角色。HDAg-S是于感染的早期被制造，且进入细胞核并支持病毒复制。反之，HDAg-L是于感染的晚期被制造，作为病毒复制的抑制剂，且为病毒粒子的组装所需。[0154]HDVmRNA序列的额外实例是可使用可公开获取的数据库如GenBank、UniProt、及OM頂轻易获取。[0155]本文中，术语“HDV”亦指称该HDV基因组的天然产生DNA序列变异。[0156]本文中，与术语“HBV”可互换使用的“B型肝炎病毒”是指称熟知的非细胞病变性肝促DNA病毒，属于肝病毒科。[0157]HBV基因组是部分双链的环状DNA，具有重叠的阅读框。[0158]存在有四种由HBC基因组编码的熟知基因，称为C、X、P、及S。核心蛋白是借由基因C编码HBcAgA型肝炎抗原HBeAg是由前核心pre-C蛋白质的蛋白水解处理而制造。DNA聚合酶是由基因P编码。基因S是编码表面抗原HBsAg的基因。HBsAg基因是一长的开放阅读框，但其含有三个「起始」（ATG密码子，这些密码子将该基因分为三个节段，S卩pre-Sl、pre-S2、及S。因为多个起始密码子，制造了三个不同尺寸称为大、中、及小pre-Sl+pre-S2+S、pre-S2+S、或S的多肽。由基因X编码的非结构性蛋白质的功能尚未得以完全理解，但该功能是与肝癌的发展相关且编码有诱饵蛋白，而该诱饵蛋白是容许血液中的HBsAg隔绝抗HBsAg抗体并使感染性病毒粒子逃离免疫侦测。[0159]由HBV基因组编码的蛋白质是包括:外壳蛋白-i小型，B型肝炎表面抗原⑽sAg;ii中型，preS2+HBsAg;iii大型，preSl+preS2+HBsAg;核壳体蛋白，B型肝炎核心抗原HBcAgA型肝炎e抗原HBeAg是于HBV复制过程中制造的非结构性蛋白质，其与该核壳体HBcAg共享90%氨基酸；以及，X蛋白是非结构性蛋白质HBx，其在细胞质中的功能是活化多种信号通路，这些通路的多数是借由胞质溶质钙的调节而控制，且其在细胞核中的功能是通过与不同转录因子的直接交互作用来调整转录，并于某些例子中提升其结合至特定的转录组件。[0160]HBV是少数于复制进程中使用逆转录酶的DNA病毒的一，该进程是涵盖多个阶段，包括进入、脱壳、及将病毒基因组输送至细胞核。最初，HBV基因组的复制是涵盖生成RNA中间体，该中间体随后经逆转录以制造DNA病毒基因组。[0161]当以HBV感染细胞时，病毒基因组松环DNArcDNA是经输送入细胞核中并转变为附加型（episomal共价死循环DNAcccDNA，其是作为病毒mRNA的转录模板。于转录及出细胞核后，细胞质病毒前基因组RNApgRNA与HBV聚合酶及衣壳蛋白组装以形成核壳体，于该核壳体内，聚合酶催化逆转录得到负链DNA，该负链DNA是接续拷贝为正链DNA以形成子代rcDNA基因组。随后，成熟的核壳体以病毒包膜蛋白封装以作为病毒体粒子排出，或穿入细胞核内通过细胞内cccDNA扩增途径扩增cccDNA储存器。cccDNA是HBV复制循环的主要成分，且负责感染及病毒持续感染的确立。[0162]HBV感染是产生下述两种不同粒子的制造：IHBV病毒本身（或丹恩粒子（Daneparticle，其是包括自HBcAg组装的病毒壳蛋白且由HBsAg覆盖，并能再度感染细胞；以及2亚病毒粒子或SVP，其是类高密度脂蛋白粒子，由脂质、胆固醇、胆固醇酯及非感染性的小型及中型B型肝炎表面抗原HBsAg组成。对于所制造的每一病毒粒子，1，000至10，000个SVP是释放入血液中。此类SVP及其所携带的HBsAg蛋白）代表血液中病毒蛋白的压倒性多数。受HBV感染的细胞亦分泌一种称为HBVe-抗原HBeAg之前核蛋白的可溶性蛋白质水解产物。[0163]已经确认，记为A至H的8种基因型的HBV，是各自具有截然不同的地理分布。该病毒是非细胞病变性病毒，且对于曝露于可能造成6个月肝病的HBV急性感染、或往往与进行性肝损伤相关的慢性HBV感染的结果，病毒专一性细胞免疫是主要决定因素。[0164]术语「HBV」是包括8种基因型的HBVA至H的任一者。HBV基因组的参考序列的氨基酸及完全编码序列可于诸如GenBank编录号GI:21326584SEQIDNO:1及GI:3582357SEQIDNO:3中找到。[0165]HBVmRNA序列的额外实例可使用可公开获取的数据库如GenBank、UniProt、及OM頂轻易获取。[0166]本文中使用的术语“HBV”亦指称HBV基因组的天然出现的DNA序列的变异体。[0167]本文中，“靶标序列”是指称于HDV基因转录过程中形成的mRNA分子的核苷酸序列的连续部分，包括为初级转录产物的RNA加工产物的mRNA。于一方面中，该序列的靶标部分的长度是至少足以作为用于iRNA定向裂解的底物，该裂解是位于在HDV基因转录过程中形成的mRNA分子的核苷酸序列的部分或临近该处。[0168]该靶标序列的长度可为自约9至36个核苷酸，例如，约15至30个核苷酸。举例而言，该靶标序列的长度可以是自约15至30个核苷酸、15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22个核苷酸。处于上文引述的范围及长度之间的范围及长度亦可视为本发明的一部分。[0169]本文中，术语“包含序列的链”是指称包含核苷酸链的寡核苷酸，该核苷酸链是使用标准核苷酸命名法指称的序列。[0170]通常，“G”、“C”、“A”、“T”、及“U”是各自分别表示含有鸟嘌呤、胞嘧啶、腺嘌呤、胸腺嘧啶及尿嘧啶作为碱基的核苷酸。然而，应理解，术语“核苷核酸”或“核苷酸”亦可指称经修饰的核苷酸，如下文进一步详述者，或代理替换部分参见，例如，表2。具有该技艺的人士应很好理解，鸟嘌呤、胞嘧啶、腺嘌呤及尿嘧啶可经其他部分替换，而本质上不改变包含承载此替换部分的核苷酸的寡核苷酸的碱基配对特性。举例而言，并不限于，包含肌苷作为其碱基的核苷酸可与含有腺嘌呤、胞嘧啶或尿嘧啶的核苷酸进行碱基配对。因此，本发明的特征是可借由含有诸如肌苷的核苷酸替换dsRNA核苷酸序列内的含有尿嘧啶、鸟嘌呤、或腺嘌呤的核苷酸。于另一实例中，该寡核苷酸任意位置的腺嘌呤及胞嘧啶可分别经鸟嘌呤及尿喃啶替换，以形成与革E标mRNA的G-U摆动碱基配对Wobblebasepairing。含有此类替换部分的序列是适用于本发明提出的组合物及方法。[0171]本文中可互换使用的术语“iRNA”、“RNAi剂”、“iRNA剂”、“RNA干扰剂”，是指称含有RNA的剂，该RNA是如本文中定义的术语，且该剂是介导经由RNA诱发沉默复合物RISC途径的RNA转录本的靶标裂解。iRNA是通过熟知的RNA干扰RNAi途径而主导mRNA的序列专一性降解。该iRNA调节，如抑制，HDV基因（如，一种或多种HDV基因）于受试者如哺乳动物受试者的细胞内的表达。[0172]于一方面中，本发明的RNAi剂是包括单链RNA，该单链RNA与靶标RNA序列如HDV靶标mRNA序列交互作用，以主导靶标RNA的裂解。不欲受缚于理论，据信，导入细胞内的长的双链RNA是借由熟知为切丁酶Dicer的III型核酸内切酶裂解为siRNASharpetal.2001GenesDev.15:485。切丁酶是一种类核糖核酸酶-III酶，其将该dsRNA加工为具有19至23对碱基对的特征为碱基3’突出端的短干扰RNABernstein,etal.，（2001Nature409:363。这些siRNA是随后并入RNA诱发沉默复合物RISC中，其中，一个或多个解旋酶解开该siRNA双螺旋，使互补性反义链能引导靶标识别Nykanen，etal.，（2001Cell107:309。一旦结合至适宜的靶标mRNA，RISC内的一个或多个核酸内切酶裂解靶标以诱发沉默Elbashir，etal.，（2001GenesDev.15:188。因此，于本发明的一方面，是关于细胞内产生的单链RNAsiRNA且促进RISC复合物的形成，以影响靶标基因如HDV基因的沉默。据此，本文中，术语“siRNA”亦用来指称如上述的RNAi。[0173]于另一方面中，该RNAi剂可以是单链siRNA，其是引入细胞或有机体中以抑制靶标mRNA。单链RNAi剂是结合至RISC核酸内切酶Argonaute2,其随后裂解靶标mRNA。该单链siRNAs通常是经化学修饰的15至30个核苷酸。单链siRNA的设计及测试是披露于美国专利第8,101,348号及Limaetal.，（2012Cell150:883-894中，各自的整体内容是借由引用而并入本文。本文中披露的任意反义核苷酸序列作为单链siRNA者可如本文中披露的或如借由Limaetal.，（2012Cell150:883-894中披露的方法经化学修饰者。[0174]于另一方面中，本发明的组合物、用途及方法中使用的“iRNA”是双链RNA，且于本文中指称为“双链RNAi剂”、“双链RNAdsRNA分子”、“dsRNA剂”或“dsRNA”。术语“dsRNA”是指称核糖核酸分子的复合物，具有包含两个反平行且实质上互补的核酸链的双螺旋duplex结构，指称为具有相对于靶标RNAS卩HDV基因的“正义”及“反义”取向。于本发明的某些方面中，双链RNAdsRNA是通过转录后基因沉默机制而触发靶标RNA如mRNA的降解，本文中，该机制是指称为RNA干扰或RNAi。[0175]通常，dsRNA分子的每一链的大多数核苷酸是核糖核苷酸，但如本文中详述者，每一链或两链亦可包括一个或多个非核糖核苷酸，如脱氧核糖核苷酸和或经修饰的核苷酸。此外，如本说明书中使用者，“RNAi剂”可包括具有化学修饰的核糖核苷酸;RNAi剂可包括位于多个核苷酸处的实质性修饰。本文中，术语“经修饰的核苷酸”是指称独立具有经修饰的糖部分、经修饰的中间核苷酸键联、和或经修饰的核酸碱基的核苷酸。因此，术语经修饰的核苷酸是涵盖中间核苷酸键联、糖部分或核酸碱基的官能基或原子的取代、加成或移除。适用于本发明的剂的修饰是包括本文中披露或本领域中熟知的全部类型的修饰。任意此类修饰，如用于siRNA类型分子者，是为用于本说明书及申请专利范围靶标的“RNAi剂”所涵盖。[0176]该双螺旋区域可以是允许所希望的靶标RNA通过RISC途径进行专一性降解的任意长度，且其长度范围可以是自约9至36对碱基对，如，约15至30对碱基对的长度，举例而言，约9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、或36对碱基对的长度，例如，约15至30、15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22对碱基对的长度。介于上文引述范围及长度之间的范围及长度亦考虑为本发明的一部分。[0177]形成该双螺旋结构的两链可以是一个更大RNA分子的不同部位，或这些可以是独立的RNA分子。若该两个是一个更大分子的部分，并借由介于一链的3’端与形成该双螺旋结构的另一链的5’端之间的不间断核苷酸链而连结，则该连结RNA链是指称为“发夹环圈”。发夹环圈可包含至少一个未配对的核苷酸。于某些方面中，该发夹环圈可包含至少2、至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少20、至少23或更多个未配对的核苷酸。[0178]若独立的RNA分子包含dsRNA的实质上互补的两链，则那些分子不需要共价连结，但可以共价连结。若两链是以除借由介于一链的3’端与形成该双螺旋结构的另一链的5’端之间的不间断核苷酸链之外的方式链接，则该链接结构是指称为“键联体”。这些RNA链可具有相同或不同数目的核苷酸。碱基对的最大数目是该dsRNA的最短链中核苷酸数减去该双螺旋中存在的任意突出端。RNAi除了包含该双螺旋结构外，亦可包含一个或多个核苷酸突出端。[0179]于一方面中，本发明的RNAi剂是具有24至30个核苷酸的dsRNA，其是与靶标RNA序列如HDV靶标mRNA序列反应，以主导该靶标RNA的裂解。不欲受缚于理论，引入细胞中的长的双链RNA是借由认知为切丁酶的III型核酸内切酶裂解为siRNASharpetal.2001GenesDev.15:485。切丁酶是一种核糖核酸酶-III-类酶，将该sRNA加工为具有19至23对碱基对的特征为碱基3’突出端的短干扰RNABernstein，etal.，（2001Nature409:363。这些siRNA是随后并入RNA诱发沉默复合物RISC中，其中，一个或多个解旋酶解开该siRNA双螺旋，使互补性反义链能引导祀标识别Nykanen，etal.，（2001Cell107:309。一旦结合至适宜的靶标mRNA，RISC内的一个或多个核酸内切酶裂解靶标以诱发沉默（Elbashir，etal.，（2001GenesDev.l5:188〇[0180]本文中，术语“核苷酸突出端”是指称自iRNA如dsRNA的双螺旋结构突出端的至少一个未配对的核苷酸。举例而言，当dsRNA的一链的3’端延伸超出另一链的5’端时，则存在核苷酸突出端，反的亦然。dsRNA可包含至少一个核苷酸的突出端;可替代地，该突出端可包含至少两个核苷酸、至少三个核苷酸、至少四个核苷酸、至少五个核苷酸、或更多。核苷酸突出端可包含核苷酸核苷酸类似物或由核苷酸核苷酸类似物组成，该核苷酸核苷酸类似物是包括脱氧核苷酸核苷酸。该这些）突出端可位于正义链上、反义链上、或其任意组合上。再者，突出端的该（这些）核苷酸可存在于dsRNA的正义链或反义链的5’端、3’端、或两端。[0181]于一方面中，dsRNA的反义链是具有突出端于3’端和或5’端的1至10个核苷酸，如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个核苷酸。于一方面中，dsRNA的正义链是具有突出端于3’端和或5’端的1至10个核苷酸，如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个核苷酸。于另一方面中，该突出端中的一个或多个核苷酸是经核苷酸硫代磷酸酯替换。[0182]“钝”或“钝端”是意指，于该双链RNAi剂的该端不存在未配对的核苷酸，S卩，无核苷酸突出端。“钝端化”的RNAi剂是指其整体长度皆为双链的dsRNA，S卩，于该分子的每一端均无核苷酸突出端。本发明的RNAi剂是包括于一端具有核苷酸突出端的RNAi剂（S卩，具有一个突出端及一个钝端的剂或于两端皆具有核苷酸突出端的RNAi剂。[0183]术语“反义链”或“引导链”是指称iRNA如dsRNA的链，其是包括实质上与靶标序列如HDVmRNA互补的区域。本文中，“互补的区域”是指称，该反义链上的实质上与一序列互补的区域，该序列是，举例而言，靶标序列如本文中定义的HDV核苷酸序列。若互补性的区域与该靶标序列不完全互补，则错配可处于该分子的中间或末端区域。通常，容忍度最大的错配是位于末端区域，如该iRNA的5’末端和或3’末端的5、4、3、2、或1个核苷酸范围内。于一方面中，本发明的双链RNAi剂是包括位于反义链中的核苷酸错配。于另一方面中，本发明的双链RNAi剂是包括位于正义链中的核苷酸错配。于一方面中，该核苷酸错配是位于，举例而言，该iRNA的3’末端的5、4、3、2、或1个核苷酸范围内。于另一方面中，该核苷酸错配是位于，举例而言，该iRNA的3’末端核苷酸中。[0184]本文中，术语“正义链”或“随从链”是指称iRNA的链，其是包括实质上与反义链的区域互补的区域，该反义链是如本文中定义的术语者。[0185]本文中，术语“裂解区域”是指称位于紧邻该裂解位点的区域。该裂解位点是靶标上裂解出现的位点。于某些方面中，该裂解区域是包含位于该裂解位点末端或紧邻该裂解位点的三个碱基。于某些方面中，该裂解区域是包含位于该裂解位点末端或紧邻该裂解位点的两个碱基。于某些方面中，该裂解位点具体是出现于以反义链的核苷酸10及11为界的位点，且该裂解区域是包含核苷酸11、12及13。[0186]本文中，除非明确指出者，当术语“互补性”用以叙述第一核苷酸序列关于第二核苷酸序列互补时，其是指称包含该第一核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸于特定条件下与包含该第二核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸杂交并形成双螺旋结构的能力，如本领域普通技术人员所理解者。此类条件可例如为严苛条件，其中，严苛条件可包括:400mMNaCK40mMPIPESpH6.4、lmMEDTA、50°C或70°C、12至16小时，之后洗涤（参见，如，MolecularCloning:ALaboratoryManual，Sambrook，etal.1989冷泉港实验室出版社（ColdSpringHarborLaboratoryPress。可施用其他条件，如可在有机体内遭遇的生理学有关条件。本领域普通技术人员应能根据杂合核苷酸的最佳应用来确定两个序列互补性测试的最适合条件设定。[0187]iRNA内的互补性序列，如本文披露的dsRNA内，是包括包含第一核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸与包含第二核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸，于该第一或第二核苷酸序列的整体长度上，存在两个寡核苷酸或多核苷酸碱基配对。则此类序列可指称为相对于彼此“完全互补”。然而，本文中，若第一序列是指称为相对于第二序列“实质上互补”，则两个序列可以是完全互补；或他们可在杂交为最多30对碱基对时形成一对或多对，但通常不超过5对、4对、3对或2对的错配碱基对，同时保留在与其根本应用最相关的条件下杂交的能力，这些应用是诸如抑制经由RISC途径的基因表达。然而，若两个寡核苷酸被设计为在杂交时形成一个或多个单链突出端，则测定互补性时，此类突出端不应视为错配。举例而言，对于包含长度为21个核苷酸的寡核苷酸及长度为23个核苷酸的寡核苷酸的dsRNA，其中，该较长的寡核苷酸是包含与该较短寡核苷酸完全互补的21个核苷酸的序列，就本文披露的目标而言，该dsRNA仍可指称为“完全互补”。[0188]本文中，“互补”序列亦可包括或完全由非瓦特生-克里克Watson-Crick碱基对和或自非天然核苷酸及经修饰的核苷酸形成的碱基对所构成，只要可满足上述关于杂交能力的需求即可。此类非瓦特生-克里克碱基对是包括，但不限于，鸟粪嘌呤-尿嘧啶摇摆G:UWobble或胡思町Hoogstein碱基配对。[0189]本文中，术语“互补”、“完全互补”及“实质上互补”可用于有关dsRNA的正义链与反义链之间或iRNA剂的反义链与靶标序列之间的碱基配对，可从其用途的上下文所理解。[0190]本文中，与信使RNAmRNA“至少部分地实质性互补”的多核苷酸，是指称与该感兴趣的mRNA如，编码HDV基因的mRNA的邻接部分实质性互补的多核苷酸。举例而言，若序列是与编码HDV基因的mRNA的非中断部分实质上互补，则该多核苷酸是与HDVmRNA的至少一部分互补。[0191]据此，于某些方面中，本文中披露的正义链多核苷酸及反义多核苷酸是与靶标HDV序列完全互补。于其他方面中，本文中披露的正义链多核苷酸和或反义多核苷酸是与靶标HDV序列实质上互补，且是包含连续核苷酸序列，该连续核苷酸序列是于其整体长度的至少约80%与表11、12、31及32中任一序列的核苷酸序列的相对应区域互补或与表11、12、31及32中任一序列的片段互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0192]于一方面中，本发明的RNAi剂是包括正义链，该正义链是与靶标HDV序列实质上互补且是包含连续核苷酸序列，于其整体长度的至少约80%是与表11、12、31及32中任一序列的核苷酸序列的相对应价区域或表11、12、31及32中任一序列的片段互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0193]于另一方面中，本发明的RNAi剂是包括反义链，该反义链是与靶标HDV序列实质上互补且是包含连续核苷酸序列，于其整体长度上的至少约80%是与表11、12、31及32中任一序列的核苷酸序列的相对应区域或表11、12、31及32中任一序列的片段互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0194]于某些方面中，本发明的RNAi剂是以HBV为靶标。于某些方面中，这些剂是与靶标HBV序列完全互补。于其他方面中，本文中披露的正义链多核苷酸和或反义多核苷酸是与靶标HBV序列实质上互补，且是包含连续核苷酸序列，该连续核苷酸序列是于其整体长度的至少约80%与本文中提供的以HBV为靶标的剂的任一核苷酸序列的相对应区域互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0195]于一方面中，用于本发明中的以HBV为靶标的RNAi剂是包括正义链，该正义链是与靶标HBV序列实质上互补，且是包含连续核苷酸序列，该连续核苷酸序列是于其整体长度的至少约80%与本文中提供的以HBV为靶标的剂的任一核苷酸序列的相对应区域互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0196]于另一方面中，用于本发明中的以HBV为靶标的RNAi剂是包括反义链，该反义链是与靶标HBV序列实质上互补，且是包含连续核苷酸序列，该连续核苷酸序列是于其整体长度的至少约80%与本文中提供的以HBV为靶标的剂的任一核苷酸序列的相对应区域互补或与本文中提供的以HBV为靶标的剂的任一核苷酸序列的片段互补，如约85%、约86%、约87%、约88%、约89%、约90%、约％91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%互补。[0197]通常，每一链的大部分核苷酸是核糖核苷酸，但如本文中详细披露的，每一链或两链亦可包括一个或多个非核糖核苷酸，如脱氧核糖核苷酸和或经修饰的核苷酸。此外，“iRNA”可包括具有化学修饰的核糖核苷酸。此类修饰可包括本文中披露或该技术领域中的全部类型的修饰。就本说明书及申请专利范围的目的，任意此类修饰是用于iRNA分子者，是为“iRNA”所涵盖。[0198]于本发明的一方面，用于本发明的方法及组合物的剂是单链反义RNA分子，其是经由反义抑制机制抑制靶标mRNA。该单链反义RNA分子是与靶标mRNA中的序列互补。该单链反义寡核苷酸可借由与mRNA进行碱基配对并物理性妨碍转译机制而以化学计量学方式抑制转译，参见Dias,N.etal.，（2002MolCancerTher1:347-355。该单链反义RNA分子的长度可以是约15至约30个核苷酸且具有与靶标序列互补的序列。举例而言，该当反义RNA分子可包含一序列，该序列是来自本文披露的任一反义序列的至少约15、16、17、18、19、20个以上连续核苷酸。[0199]本文中，“受试者”是动物，如哺乳动物，包括灵长目动物如人、非人灵长目动物如猴及黑猩猩）、非灵长目动物如牛、猪、骆盤、骆马、马、山羊、兔、绵羊、仓鼠、豚鼠、猫、狗、大鼠、小鼠、马及鲸）、或鸟（如，鸭或鹳）。于一方面中，该受试者是人，如正在治疗或评估将会受益于HDV基因表达和或复制下降的疾病、病症或症状的人;处于将会受益于HDV基因表达和或复制下降的疾病、病症或症状风险下的人；患有将会受益于HDV基因表达和或复制下降的疾病、病症或症状的人;和或正在接受对将会受益于HDV基因表达和或复制下降的疾病、病症或症状进行治疗的人。[0200]本文中，术语“治疗”（treating或treatment是指称有益或所希望的结果，包括但不限于，与不希望的HDV基因表达和或HDV复制相关的一种或多种症候的缓解或改良。“治疗”亦可意指相较于没有治疗时的存活预期延长存活。[0201]受试者体内HDV基因表达和或HDV复制、或疾病标记物、或症候的含量的上下文中，术语“较低”是指称该含量的统计学显著下降。该下降可以是，举例而言，至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、或更多，且优选是可降至不具有此病症个别受试者的正常可接受范围内的含量。于某些方面中，是将该靶标的表达正规化，即，降至不具有此病症个别受试者的正常可接受范围内的含量，例如，如ALT或AST的疾病标记物的含量是降至不具有此病症个别受试者的正常可接受范围内的含量。[0202]本文中，当术语“预防”（prevention或preventing参照将会受益于HDV基因表达和或复制下降的疾病、病症或其症状而使用时，其是指称受试者将发展出与此疾病、病症或症状相关的症候的可能性降低，该症候是诸如不希望的HDV感染的症候，如血清和或肝脏HDVcccDNA的存在、血清HDVDNA的存在、以及血清和或肝脏HDV抗原的存在。[0203]本文中，“D型肝炎病毒相关的疾病”或“HDV相关的疾病”是由HDV感染和或复制造成或与其相关的疾病或病症。术语“HDV相关的疾病”是包括将会受益于HDV基因表达和或复制的降低的疾病、病症或症状。HDV相关疾病的非限制性实例是包括，举例而言，B型肝炎病毒感染、急性B型肝炎、急性D型肝炎、急性暴发性D型肝炎、慢性D型肝炎、肝纤维化、末期肝病、肝细胞癌。[0204]本文中，“治疗有效量”是欲以包括下述RNAi剂的量，当给药至患者用于治疗患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者时，该量是足以有效治疗该疾病如，借由削弱、改良或维持现有疾病或疾病的一种或多种症候）。该“治疗有效量”可依据下列改变:该RNAi剂、该剂如何给药、该疾病及其严重性、及病史、年龄、体重、家族病史、基因构成、由HDV基因表达介导的病理进程的阶段、先前治疗或联合治疗的类型、以及，若存在的待治疗的受试者的其他个别特征。[0205]本文中，“预防有效量”是欲以包括下述RNAi剂的量，当给药至尚未经历或呈现HDV感染和或HDV相关疾病的症候但可能易罹患该疾病的受试者时，该量是足以预防或改良该疾病或该疾病的一种或多种症候。改良该疾病是包括减缓该疾病的病程或降低以后疾病发展的严重性。该「预防有效量」可依据下列改变:该RNAi剂、该剂如何给药、罹患该疾病风险程度、及病史、年龄、体重、家族病史、基因构成、先前治疗或联合治疗的类型、以及，若存在，待治疗的受试者的其他个别特征。[0206]“治疗有效量”或“预防有效量”亦可包括RNAi剂的量，其在合理的利弊比的可应用于任意治疗的下，产生预期的局部或系统性效果。用于本发明的方法的RNAi剂可以给药足够量以产生可应用于此类治疗的合理利弊比。[0207]本文中，术语“样本”是分离自受试者的类似流体、细胞或组织的集合，以及受试者体内存在的流体、细胞或组织。生物流体的实例是包括血液、血清及浆膜液、血浆、脑脊髓液、眼液、淋巴液、尿液、唾液等。组织样本可包括来自组织、器官或局部区域的样本。举例而言，样本可源自特定的器官、器官的部分、或这些器官内的流体或细胞。于某些方面中，样本可源自肝脏如，整个肝脏或肝脏某部分或肝脏中某种类型的细胞如肝细胞）、视网膜或视网膜的部分如，视网膜色素上皮细胞）、中枢神经系统或中枢神经系统的部分如，脑室或脉络丛）、或胰脏或胰脏的某些细胞或部分。于某些方面中，“源自受试者的样本”是指称自该受试者获得的脑脊髓液。于优选的方面中，“源自受试者的样本”是指称自该受试者抽取的血液或血浆。于进一步的方面中，“源自受试者的样本”是指称源自该受试者的肝脏组织或其次组成成分或视网膜组织或其次组成成分）。[0208]II.本发明的iRNA[0209]本发明是提供iRNA，其是抑制一种或多种HDV基因的表达。于一方面中，该iRNA剂是包括双链核糖核苷酸dsRNA分子，用于抑制HDV基因于细胞如受试者如哺乳动物体内细胞中的表达，该哺乳动物是诸如患有HDV相关疾病如慢性D型肝炎的人。该dsRNA是包括具有互补性区域的反义链，该互补性区域是与在HDV基因的表达中形成的mRNA的至少一部分互补。该互补性区域的长度是约30个核苷酸或更少如，长度为约30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、或18个核苷酸或更少）。当与表达HDV基因的细胞接触时，该iRNA将HDV基因如，人、灵长目动物、非灵长目动物、或鸟类HDV基因）的表达抑制至少约10%，如借由诸如下述方法测试分析者:PCR或基于分支链DNAbDNA的方法、或基于蛋白质的方法如使用西方墨点法WesternBlotting或流动细胞分析技术的免疫焚光分析。[0210]dsRNA是包括两链RNA，该两链是互补并于该dsRNA的使用条件下杂交以形成双螺旋结构。dsRNA的一链反义链是包括互补性区域，该区域是与靶标序列实质上互补，且通常与后者完全互补。该靶标序列可选自在HDV基因的表达过程中形成的mRNA序列。另一链正义链是包括与该反义链互补的区域，故以适宜的条件合并该两链时，两链杂交并形成双螺旋结构。如本文中他处所披露的及本领域中熟知的，还包括dsRNA的互补序列作为单个核酸分子的自互补区域此点与分离的寡核苷酸相反。[0211]通常，该双螺旋结构的长度是界于15至30对碱基对之间，如，界于15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22对碱基对的长度。处于上文引述范围及长度之间的范围及长度还包括为本发明的一部分。[0212]同样，该靶标序列的互补区域的长度是界于15至30个核苷酸之间，如，界于15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22个核苷酸的长度。处于上文引述范围及长度之间的范围及长度还包括为本发明的一部分。[0213]于某些方面中，该dsRNA的长度是界于约15与约20个核苷酸之间，或约25与约30个核苷酸之间。通常，该dsRNA的长度足以作为切丁酶的底物。举例而言，本领域中是熟知，长度超过约21至23个核苷酸的dsRNA可作为切丁酶的底物。具有该技艺通常知识者应知悉，靶标用于裂解的RNA区域最常为较大RNA分子的一部分，该较大RNA分子一般为mRNA分子。当述及时，mRNA靶标的“一部分”是mRNA靶标的连续序列，该连续序列的长度是足以作为RNAi所主导的裂解即，通过RISC途径的裂解的底物。[0214]熟识该技艺者亦应知悉，该双螺旋区域是dsRNA的主要功能部位，如约9至36碱基对的双螺旋区域，如约10至36、11至36、12至36、13至36、14至36、15至36、9至35、10至35、11至35、12至35、13至35、14至35、15至35、9至34、10至34、11至34、12至34、13至34、14至34、15至34、9至33、10至33、11至33、12至33、13至33、14至33、15至33、9至32、10至32、11至32、12至32、13至32、14至32、15至32、9至31、10至31、11至31、12至31、13至32、14至31、15至31、15至30、15至29、15至28、15至27、15至26、15至25、15至24、15至23、15至22、15至21、15至20、15至19、15至18、15至17、18至30、18至29、18至28、18至27、18至26、18至25、18至24、18至23、18至22、18至21、18至20、19至30、19至29、19至28、19至27、19至26、19至25、19至24、19至23、19至22、19至21、19至20、20至30、20至29、20至28、20至27、20至26、20至25、20至24、20至23、20至22、20至21、21至30、21至29、21至28、21至27、21至26、21至25、21至24、21至23、或21至22碱基对的双螺旋区域。因此，于一方面中，就加工成以所希望的待裂解RNA为靶标且具有诸如15至30对碱基对的功能性双螺旋而言，以具有大于30对碱基对的双螺旋区域的RNA分子或RNA分子的复合物作为dsRNA。因此，具有该技艺通常知识者应知悉，于一方面中，miRNA是dsRNA。于另一方面中，dsRNA是非天然发生的miRNA。于另一方面中，可用于靶标HDV基因表达的iRNA剂，并未借由较大dsRNA的裂解而于靶标细胞中生成。[0215]如本文中披露的dsRNA可进一步包含一个或多个单链核苷酸突出端，如，1、2、3、或4个核苷酸。相对于钝端的dsRNA，具有至少一个核苷酸突出端者可具有意外杰出的抑制特性。核苷酸突出端可包含或其组成为核苷酸核苷酸类似物，是包括脱氧核苷酸核苷酸。该突出端可位于正义链、反义链或其任意组合。再者，突出端的核苷酸可存在于dsRNA的反义链或正义链的任一者的5’-端、3’-端或两端。[0216]dsRNA可借由如下文进一步讨论的本领域中熟知的标准方法合成，如使用自动DNA合成仪如可自诸如生物研究公司（Biosearch、应用生物系统公司AppliedBiosystems,Inc.商购者。[0217]本发明的iRNA化合物可使用两步骤的制程制备。首先，独立制备该双链RNA分子的各链。随后，黏合组成链。该siRNA化合物的各链可使用溶液相或固相有机合成法或两者制备。有机合成法的优点是具有可轻易制备包含非天然或经修饰的核苷酸的寡核苷酸链。本发明的单链寡核苷酸可使用溶液相或固相有机合成法或两者制备。[0218]一方面，本发明的dsRNA是包括至少两个核苷酸序列，即正义序列及反义序列。该正义链是选自表11、12、31、及32任一者中提供的序列所组成的组，且该正义链的对应反义链是选自表11、12、31、及32任一者中提供的序列所组成的组。于此方面，两个序列的一者是与该两个序列的另一者互补，且这些序列的一者是与在HDV基因的表达中广生的mRNA序列实质上互补。如是，于此方面，dsRNA将包括两个寡核苷酸，其中，一个寡核苷酸是披露于表11、12、31、及32任一者中的正义链，且第二个寡核苷酸是披露于表11、12、31、及32任一者中的正义链的对应反义链。于一方面中，该dsRNA的实质上互补序列是包含于分离的寡核苷酸。于另一方面中，该dsRNA的实质上互补序列是包含于同一寡核苷酸。[0219]应理解，尽管表12及32中的某些序列是披露为经修饰和或接合序列，但本发明的iRNA的RNA，如本发明的dsRNA，可包含表11、12、31、及32任一者中详述的任一序列，该序列是未经修饰、未经接合、和或经不同于这些表中披露的的修饰和或接合。[0220]熟识该技艺者应了解，具有界于约20至23对碱基对如21对碱基对的双螺旋结构dsRNAs已经被誉为在诱发RNA干扰中尤其有效（Elbashiretal.,EMBO2001,20:6877-6888。然而，其他人已经发现更短或更长的RNA双螺旋结构亦有效ChuandRana2007RNA14:1714-1719;Kimetal.2005NatBiotech23:222-226。于上述的方面中，凭借于表11、12、31、及32任一者中提供的寡核苷酸序列的性质，本文所披露的dsRNA可包括至少一链长度至少为21个核苷酸的链。可合理预期，具有表11、12、31、及32任一者中一个序列仅在其一端或两端减去少数核苷酸的更短双螺旋仍与上述的dsRNA同样有效。故，具有源自表11、12、31、及32任一者中一个序列的至少15、16、17、18、19、20以上连续核苷酸的序列，且其抑制HDV表达的能力与包含该完整序列的dsRNA相差不超过约5、10、15、20、25、或30%抑制性的dsRNA，是包括为本发明的范畴内。[0221]此外，于表11、12、31、及32任一者中提供的RNA是在HDV转录中识别对RISC介导的裂解敏感的位点。如是，本发明的进一步特征是其靶标处于此类位点的一者内的iRNA。本文中，若iRNA促进转录本于特定位点内的裂解，则称该iRNA的祀标是处于RNA转录本的特定位点内。此iRNA通常将包括来自表11、12、31、及32任意中提供的一个序列的至少约15个连续核苷酸，且与取自与HDV基因中所选序列的连续区域的其他核苷酸序列偶合。[0222]尽管靶标序列的长度通常为约15至30个核苷酸，但此范围内具体序列对于定向任意指定靶标RNA的裂解的适用性存在较大变动。本文中列出的多种软件包及指南是提供鉴定对于指定基因靶标的最佳靶标序列的指引，但亦可采取实证途径，是将指定尺寸作为非限制性实例为21个核苷酸的「窗」或「罩」事实上或象征性包括，例如，经由计算机仿真地置于靶标RNA序列上以鉴定该尺寸范围内的序列可否作为靶标序列。借由将该序列「窗」朝初始靶标序列位置的上游或下游渐进式移动一个核苷酸，可鉴定下一个潜在的靶标序列，直至对于任意所选择的指定靶标尺寸鉴定可能序列的完整套组。本制程与系统性合成偶合并测试经鉴定的序列使用本文中披露或本领域中熟知的测试分析）以鉴定那些序列，来鉴定当以iRNA剂进行靶向操作时，那些最适合用于判别介导的靶标基因表达的最佳抑制性的RNA序列。因此，尽管所鉴定的表11、12、31、及32任一者中的序列，是表示有效的靶标序列，仍考虑借在指定序列上游或下游逐一移动一个核苷酸来「移动窗」，可达成对于具有相同或更佳的抑制特征的序列的鉴定。[0223]再者，考虑到对于所鉴定的任意序列，如表11、12、31、及32任一者中者，可借由系统性加入或移除核苷酸以生成更长或更短序列，并借由使更长或更短尺寸的窗从靶标RNA的该点处向上游或下游前进而测试那些序列，从而达成进一步的优化。再一次，将此生成新备选靶目标途径与测试基于在本领域中熟知和或本文中披露的抑制测试分析中的那些靶标序列的iRNA有效性测试联合，可进一步改善抑制效率。再者，借由，例如，如本文中披露或本领域中熟知者而引入经修饰的核苷酸、加入或改变突出端、或其他本领域中熟知和或本文中讨论的修饰，可调节此类最优化序列以进一步优化该分子如，增加血清稳定性或循环半衰期、增加热稳定性、增强跨膜递送、以特定位置或细胞类型为靶标、增加与沉默途径酶的反应、增加自胞内体的释放为表达抑制剂。[0224]本文中披露的iRNA可含有一个或多个与该靶标序列的错配。于一方面中，本文中披露的iRNA是含有不超过3个错配。若该iRNA的反义链含有与靶标序列的错配，则优选是错配区不位于互补区域的中心。若该iRNA的反义链含有与该靶标序列的错配，则优选是该错配被限制为处于自互补区域的5’-端或3’-端起的最后5个核苷酸内。举例而言，对于与HDV基因的区域互补的23个核苷酸的iRNA剂，通常是于中央13个核苷酸内不含有任何错配。本文中披露的方法或本领域中熟知的方法可用以确定，含有与靶标序列错配的iRNA是否有效抑制HDV基因的表达。具有错配的iRNA对于抑制HDV基因表达的效率考虑是重要者，尤其若已知HDV基因中互补性的特定区域在该群落内的具有多形序列变异时。[0225]III.本发明的经修饰的iRNA[0226]于一方面中，本发明的iRNA的RNA如dsRNA是未经修饰，且并不包含例如本领域中熟知及本文中披露的化学修饰和或接合。于另一方面中，本发明的iRNA的RNA如dsRNA是经化学修饰以提升稳定性或其它有益特性。于本发明的某些方面中，本发明的iRNA的实质上全部核苷酸均经修饰。于本发明的方面中，本发明的iRNA的全部核苷酸皆是本发明的经修饰的iRNA，其中，“实质上全部核苷酸是经修饰”指大多数但并非全部经修饰，且可包括不超过5、4、3、2、或1个未修饰的核苷酸。[0227]本发明中所述特征的核苷酸可借由本领域中良好构建的方法合成和或修饰，如Currentprotocolsinnudeicacidchemistry,Beaucage，S·L.etal.Edrs.,JohnWileySons，Inc.，NewYork，NY，USA中披露的，该文献是借由引用而并入本文。修饰是包括，举例而言，终端修饰如5’-端修饰磷酸化、接合、反转键联或3’-端修饰接合、DNA核苷酸、反转键联等）；碱基修饰，如以稳定化的碱基、去稳定化的碱基、或与配偶体的延伸碱基配对的碱基替换，碱基移除（去碱基核苷酸）、或接合的碱基;糖修饰如，于2’-位或4’-位）或糖替换;和或主链修饰，包括磷酸二酯键联的修饰或替换。可用于本文中披露的方面中的iRNA化合物的具体事例是包括，但不限于，含有经修饰的主链或没有天然核苷酸间键联的RNA。具有经修饰主链的RNA是包括，那些于主链中并不具有磷原子者，以及其他。对于本说明书的目的，且本领域中时有参考者，于其核苷酸间主链中并不具有磷原子的经修饰RNA亦可视为寡核苷酸。于某些方面中，经修饰的iRNA将于其核苷酸间主链中具有磷原子。[0228]经修饰的RNA主链是包括，举例而言，硫代磷酸酯类、手性硫代磷酸酯类、二硫磷酸酯类、磷酸三酯类、氨基烷基磷酸三酯类、包括3’_伸烷基磷酸酯类及手性磷酸酯类的甲基及其他烷基磷酸酯类、次磷酸酯类、包括3’-氨基磷酰胺类及氨基烷基磷酰胺类的磷酰胺类、硫磷酰胺类、硫代羰基烷基磷酸酯类、硫代羰基磷酸三酯类、及具有正常3’_5’键联的硼代磷酸酯类、此类2’-5’_键联的类似物、以及那些具有反向极性者，其中相邻的核苷酸单元对是键联为3’-5’连接5’-3’或2’-5’连接5’-2’。还包括各种盐类、混合盐类及游离酸形式。[0229]教示上揭含磷键联的制备的代表性美国专利是包括，但不限于，第3,687,808号、第4,469,863号、第4,476,301号、第5,023,243号、第5,177,195号、第5,188,897号、第5，264,423号、第5,276,019号、第5,278,302号、第5,286,717号、第5,321,131号、第5,399,676号、第5,405,939号、第5,453,496号、第5,455,233号、第5,466,677号、第5,476,925号、第5，519,126号、第5,536,821号、第5,541,316号、第5,550,111号、第5,563,253号、第5,571,799号、第5，587,361号、第5,625,050号、第6,028，188号、第6，124,445号、第6，160，109号、第6，169,170号、第6,172,209号、第6,239,265号、第6,277,603号、第6,326,199号、第6,346,614号、第6,444,423号、第6，531，590号、第6，534,639号、第6,608,035号、第6,683，167号、第6，858,715号、第6,867,294号、第6,878,805号、第7,015,315号、第7,041,816号、第7,273,933号、第7,321，029号、及第1^39464号美国专利，这些专利的各自整体内容是借由引用而并入本文。[0230]其内部不包括磷原子的经修饰的RNA主链是具有借由短链烷基或环烷基核苷酸间键联、经混合的杂原子及烷基或环烷基核苷酸间键联、或一个或多个短链杂原子或杂环核苷酸间键联而形成的主链。此类是包括那些具有下列者：吗啉基键联部分自核苷酸的糖部分体形成）；硅氧烷主链;硫醚、亚砜及砜主链；甲酰乙酰基及硫甲酰乙酰基主链;亚甲基甲酰乙酰基及硫甲酰乙酰基主链;含烯烃主链;氨基磺酸酯主链;亚甲基亚氨基及亚甲基肼基主链;磺酸酯及磺酰胺主链;酰胺主链;及其他具有混合N、0、S及CH2组成份者。[0231]教示上揭寡核苷酸的制备的代表性美国专利是包括，但不限于，第5,034,506号、第5,166,315号、第5,185,444号、第5,214,134号、第5,216,141号、第5,235,033号、第5,64，562号、第5,264,564号、第5,405,938号、第5,434,257号、第5,466,677号、第5,470,967号、第5,489,677号、第5,541,307号、第5,561,225号、第5,596,086号、第5,602,240号、第5，608,046号、第5,610,289号、第5,618,704号、第5,623,070号、第5,663,312号、第5,633,360号、第5,677,437号、及第5,677,439号美国专利，这些专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0232]于其他方面中，适宜的RNA模拟物是考虑用于iRNA中，其中，核苷酸单元的糖及核苷酸间键联两者即主链是经新颖基团替换。这些碱基单元是经维持，用来与适合的核苷酸靶标化合物杂交。一种此类寡聚化合物，已经显示为具有优异杂交特性的RNA模拟物，是指称为肽核苷酸PNA。于PNA化合物中，RNA的糖主链是经含有酰胺的主链特别是氨基乙基甘氨酸替换。核酸碱基被保留，且直接或间接键结至该主链的酰胺部分的氮杂氮原子。教示PNA化合物的制备的代表性美国专利是包括，但不限于，美国专利案第5,539,082号、第5，714,331号及第5,719,262号，这些专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。举例而言，适用于本发明的iRNA中的额外的PNA化合物是披露于Nielsenetal.,Science,1991，254，1497-1500中。[0233]本发明中所述特征的某些方面是包括具有硫代磷酸酯主链的RNA及具有杂原子主链的寡核苷酸，这些主链尤其为上文引用的第5,489,677号美国专利的--〇12--1€1--〇12-、--CH2-NCH3-O--CH2--[称为亚甲基（甲基亚氨基）或MMI主链]、--CH2--〇--NCH3--CH2-、一CH2--NCH3-NCH3-CH2-及一NCH3--CH2--CH2-[其中，天然磷酸二酯主链是以--O--P--O--CH2--为代表]，以及上文引用的第5,602,240号美国专利的酰胺主链。于某些方面中，本文中所述特征的RNA是具有上文引用的第5，034，506号美国专利的N-吗啉基主链。[0234]经修饰的RNA亦可含有一个或多个经取代的糖部分。本文中所述特征的iRNA，如dsRNA，包括在2’-位具有下列的一者:OH;F;0-、S-、或N-烷基;0-、S-、或N-烯基;0-、S-或N-炔基;或〇-烷基-〇-烷基，其中，该烷基、烯基及炔基可为经取代或未经取代的至：1烷基或C2至Ciq烯基及炔基。例示性适宜的修饰是包括0[CH2n0]mCH3、0CH2-n0CH3、0CH2ηΝΗ2、0CH2nCH3、0CH2η0ΝΗ2、及0CH2n0N[CH2nCH3]2，其中，η及m是自1至约10。于其他方面中，dsRNA是于2’-位置包括下列的一者=C1SCiq低级烷基、经取代的低级烷基、烷芳基、芳烷基、〇-烷芳基或〇-芳烷基、SH、SCH3、OCN、CI、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、杂环烧基、杂环烧芳基、氨基烧基氨基、多烧基氨基、经取代的娃基、RNA裂解基、报导了基团、嵌入剂、用于改善iRNA的药物动力学特性的基团、或用于改善iRNA的药物动力学特性的基团、及其他具有相似特性的取代基。于某些方面中，该修饰是包括2’-甲氧基乙氧基2’-0—CH2CH2OCH3,亦认知为2’-〇-2_甲氧基乙基）或2’_M0EMartinetal.，Helv.Chim.Acta，1995，78:486-504，S卩，烷氧基-烷氧基。另一例示性修饰是2二甲基氨基氧基乙氧基，即，0CH220NCH32基，亦认知为2’-DMAOE，其如下文实施例中披露的；以及2二甲基氨基乙氧基乙氧基（本领域中亦认知为2’-0_二甲基氨基乙氧基乙基或2’-DMAE0E，即，2’-0—CH2--O-CH2--NCH22o[0235]其他修饰是包括2’-甲氧基2’-OCH3、2’_氨基丙氧基2’-OCH2CH2CH2NH2及2’-氟2’-F。亦可于iRNA的RNA的其他位置进行类似的修饰，特别是3’末端核苷酸上或2’-5’键联dsRNA中糖的3’位置，以及5’末端核苷酸的5’位置。iRNA亦可具有糖模拟物，如替代呋喃戊糖的环丁基。教示此类经修饰的糖的制备的代表性美国专利是包括，但不限于，第4,981，957号；第5,118,800号；第5,319,080号；第5,359,044号；第5,393,878号；第5,446,137号；第5,466,786号；第5,514,785号；第5,519,134号；第5,567,811号；第5,576,427号；第5，591,722号；第5,597,909号；第5,610,300号；第5,627,053号；第5,639,873号；第5,646,265号;第5,658,873号；第5,670,633号;及第5,700,920号美国专利，这些专利的某些是通常与本申请共有。前述专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0236]iRNA亦可包括核酸碱基本领域中一般简称为“碱基”）修饰或取代。本文中，“未经修饰”或“天然”核酸碱基是包括嘌呤碱基腺嘌呤A及鸟嘌呤〇；，以及嘧啶碱基胸腺嘧啶T、胞嘧啶⑹及尿嘧啶⑼。经修饰的核酸碱基是包括其他合成性及天然核酸碱基，如脱氧胸腺嘧啶dT;5-甲基胞嘧啶5-me-C;5-羟甲基胞嘧啶;黄嘌呤;次黄嘌呤;2-氨基腺嘌呤;腺嘌呤及鸟嘌呤的6-甲基及其他烷基衍生物；腺嘌呤及鸟嘌呤的2-丙基及其他烷基衍生物;2-硫尿嘧啶、2-硫胸腺嘧啶、及2-硫胞嘧啶;5-卤尿嘧啶及胞嘧啶;5-丙炔基尿嘧啶及胞嘧啶;6-偶氮尿嘧啶、胞嘧啶、及胸腺嘧啶、5-尿嘧啶假尿嘧啶）；4-硫尿嘧啶;8-卤、8-氨基、8-巯基、8-硫烷基、8-羟基及其他8-经取代的腺嘌呤及鸟嘌呤；5-卤，特别是5-溴、5-三氟甲基及其他5-经取代的尿嘧啶及胞嘧啶；7-甲基鸟嘌呤及7-甲基腺嘌呤;8-氮杂鸟嘌呤及8-氮杂腺嘌呤;7-去氮杂鸟嘌呤及7-去氮杂腺嘌呤;及3-去氮杂鸟嘌呤及3-去氮杂腺嘌呤。进一步的核酸碱基是包括那些于美国专利案第3，687,808号中披露的；那些于ModifiedNucleosidesinBiochemistry,BiotechnologyandMedicine,Herdewijn,P.ed.ffiley-VCH,2008中披露的；那些于TheConciseEncyclopediaOfPolymerScienceAndEngineering,pages858-859，Kroschwitz,J.L,ed.JohnWileySons,1990中披露的；那些由Englisch等人于AngewandteChemie,InternationalEdition,1991,30,613中披露的；以及那些由Sanghvi，YS.于Chapter15,dsRNAResearchandApplications,pages289-302,0〇〇1«5,5.1'.31111^131611，8.31.，0^?代88，1993中披露者。此类核酸碱基的某些是特别有用于增加本发明中所述特征的寡聚化合物的结合亲和性。此类是包括5-经取代的嘧啶;6-氮杂嘧啶;及N-2、N-6及0-6经取代的嘌呤，包括2-氨基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶及5-丙炔基胞嘧啶。已经显示，5-甲基胞嘧啶取代是将核酸双螺旋稳定性增加0.6-1.2°CSanghvi,Y.S.,Crooke,S.T.andLebleu1B-,Eds.,dsRNAResearchandApplications,CRCPress，BocaRaton,1993，pp.276-278，且为碱基取代实例，特别是当与2’-0-甲氧基乙基糖修饰合并时，此效应尤其明显。[0237]教示上文标注的某些经修饰的核酸碱基以及其他经修饰的核酸碱基的制备的代表性美国专利是包括，但不限于，上文标注的第3，687，808号；第4，845，205号；第5，130，30号;第5，134，066号;第5，175，273号;第5，367，066号；第5，432，272号;第5，457，187号;第5，459，255号；第5，484，908号；第5，502，177号；第5，525，711号；第5，552，540号；第5，587，469号；第5,594,121,5,596,091号；第5,614,617号；第5,681,941号；第5,750,692号；第6,015，886号；第6,147,200号；第6,166,197号；第6,222,025号；第6,235,887号；第6,380,368号；第6,528,640号;第6,639,062号;第6,617,438号；第7,045,610号；第7,427,672号;及第7，495,088号美国专利，这些专利的各自整体内容是借由引用而并入本文。[0238]iRNA的RNA亦可经修饰以包括一个或多个双环糖部分。“双环糖”是借由两个原子的桥接而修饰的呋喃糖环。“双环核苷”（“BNA”）是具有糖部分的核苷，该糖部分是包含连结该糖环的两个碳原子的桥，从而形成双环系统。于某些方面中，该桥是键联该糖环的4’-碳与2’-碳。因此，于一些方面中，本发明的剂可包括一个或多个锁核苷酸LNA。锁核苷酸是具有经修饰的核糖部分的核苷酸，其中，该核糖部分是包含连接2’与4’碳的桥连。换言的，LNA是包含具有4’-CH2-0-2’桥的双环糖部分的核苷酸。此结构是有效地将该核糖「锁」为3’_内结构构型。已经显示，将锁核苷酸加至SiRNA是增加SiRNA于血清中的稳定性，并降低脱革巴效应（Elmen，J.etal·，（2005NucleicAcidsResearch331:439_447;Mook，0R.etal.，（2007MolCancTher63:833-843;Grunweller，A.etal.,2003核酸sResearch3112:3185-3193。用于本发明的多核苷酸的双环核苷的实例是包括而不限于，包含界于4’与2’核糖基环原子间的桥的核苷。于某些方面中，本发明的反义多核苷酸剂是包括一个或多个包含4’至2’桥的双环核苷。此类4’至2’桥双环核苷的实例是包括，但不限于，4’-亦指称为“约束性乙基”或“cEt”）及4’-CHCH20CH3-0-2’（及其类似物;参见，例如美国专利案第7，399，845号）；4’-：〇13〇13-0-2’（及其类似物；参见，例如美国专利案第8,278,283号）；4’-〇1240〇13-2’（及其类似物;参见，例如美国专利案第8,278,425号）；4’-〇12-04〇13-2’渗见，例如美国专利公开案第20040171570号）；4’-CH2-N⑻-0-2’，其中，R是H、Q-C12烷基、或保护基（参见，例如美国专利案第7,427,672号）；4’-012-^扣（013-2’（参见，例如，Chattopadhyayaetal.,J.Org.Chem.，2009,74，118-134;以及4’-CH2-C-CH2-2’及其类似物;参见，例如美国专利案第8,278,426号）。前述者各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0239]教示经锁核酸核苷酸的制备的额外代表性美国专利及美国专利公开案是包括，但不限于，下列：第6,268,490号；第6,525，191号；第6,670,461号；第6,770,748号；第6,794，499号；第6，998，484号；第7，053，207号；第7，034，133;7，084，125号；第7，399，845号；第7，427,672号；第7,569,686号；第7,741,457号；第8,022,193号；第8,030,467号；第8,278,425号；第8，278，426号；第8，278，283号；US20080039618;及20090012281号美国专利，这些专利各自的整体内容是借由引用并入本文。[0240]前述双环核苷的任意者可制备为具有一种或多种立体化学化学糖构型，这些构型是包括，举例而言，α-L-呋喃核糖及β-D-呋喃核糖参见，国际公开案案号WO9914226。[0241]iRNA的RNA亦可经修饰以包括一个或多个约束性乙基核苷酸。本文中，“约束性乙基核苷酸”或“cEt”是包含双环糖部分的经核酸，该糖部分是包含4’-CHCH3-0-2’桥。于一方面中，约束性核苷酸是S构型，本文中指称为“S-cEt”。[0242]本发明的iRNA亦可包括一种或多种“构型限定核苷酸”（“CRN”）XRN是核苷酸类似物，其是具有连结核糖的C2’与C4’碳或核糖的C3与-C5’碳的键联体。CRN是将核糖环锁定为适宜的构型，并增加mRNA的杂交亲和性。该键联体的长度是足以将氧置于对于稳定性及亲和性最优的位置，导致核糖环更少起皱。[0243]教示上文标注的某些CRN的制备的代表性专利公开案是包括，但不限于，第20130190383号美国专利公开案;及第WO2013036868号，这些专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0244]本发明的iRNA的一个或多个核苷酸亦可包括经羟甲基取代的核苷酸。“经羟甲基取代的核苷酸”是非环状2’-3’-开环核苷酸，亦指称为“未锁的核酸”（“UNA”）修饰。[0245]教示UNA的制备的代表性美国专利公开案是包括，但不限于，第8,314,227号美国专利；及第20130096289号；第20130011922号；及第20110313020号美国专利公开案，这些专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0246]对于RNA分子末端的潜在稳定化修饰可包括N-乙酰基氨基己酰基-4-羟基脯氨醇（Hyp-C6-NHAc、N-己酰基-4-羟基脯氨醇（Hyp-C6、N-乙酰基-4-羟基脯氨醇（Hyp-NHAc、胸腺嘧啶-2’-0-脱氧胸苷醚）、N-氨基己酰基-4-羟基脯氨醇Hyp-C6-氨基）、2_二十二碳酰基-尿苷-3"-磷酸酯、反转碱基dTidT等。本修饰的披露可于第WO2011005861号PCT公开案中发现。[0247]本发明的iRNA的核苷酸的其他修饰是包括5’磷酸酯或5’磷酸酯模拟物，如RNAi剂的反义链上的5’-末端磷酸酯或磷酸酯模拟物。适宜的磷酸酯模拟物是披露于例如美国专利公开案第20120157511号中，其整体内容是借由引用而并入本文。[0248]A.包含本发明的基序的经修饰的iRNA[0249]于本发明的某些方面，本发明的双链RNAi剂是包括具有在2012年11月16日递交的第TO2013075035号申请案中披露的化学修饰的剂，该申请案的整体内容是借由引用而并入本文。如本文及第WO2013075035号PCT申请案中所示，可借由将一个或多个位于三个连续核苷酸上的三种相同修饰的基序引入RNAi剂的正义链和或反义链中，尤其是裂解位点或邻近该裂解位点处，从而获得杰出结果。于某些方面中，RNAi剂的正义链及反义链可能经完全修饰。此类基序的引入干扰了正义链和或反义链的修饰形式若存在）。该RNAi剂可视需要与GalNAc衍生物配体接合，例如在正义链上。所得RNAi剂是存在杰出的基因沉默活性。[0250]具体地，已经使人惊奇地发现，当双链RNAi剂的正义链及反义链经完全修饰以具有位于RNAi剂的至少一链的裂解位点或邻近该裂解位点处的一个或多个位于三个连续核苷酸上的三种相同修饰的基序时，该RNAi剂的基因沉默活性得以显著提升。[0251]据此，本发明是提供一种能于活体内抑制靶标基因（S卩，HDV基因）表达的双链RNAi剂。该RNAi剂是包含正义链及反义链。该RNAi剂的每一链的长度可以是12至30个核苷酸的范围。举例而言，每一链的长度可以是界于14至30个核苷酸之间，17至30个核苷酸的长度，25至30个核苷酸的长度，27至30个核苷酸的长度，17至23个核苷酸的长度，17至21个核苷酸的长度，17至19个核苷酸的长度，19至25个核苷酸的长度，19至23个核苷酸的长度，19至21个核苷酸的长度，21至25个核苷酸的长度，或21至23个核苷酸的长度。[0252]正义链及反义链典型是形成双螺旋双链RNA“dsRNA”），本文中亦指称为“RNAi剂”。RNAi剂的双螺旋区域的长度可以是12至30对核苷酸。举例而言，该双螺旋区域是界于14至30对核苷酸的长度，17至30对核苷酸的长度，27至30对核苷酸的长度，17至23对核苷酸的长度，17至21对核苷酸的长度，17至19对核苷酸的长度，19至25对核苷酸的长度，19至23对核苷酸的长度，19至21对核苷酸的长度，21至25对核苷酸的长度，或21至23对核苷酸的长度。于另一实例中，该双螺旋区域是选自15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、及27对核苷酸的长度。[0253]于一方面中，该RNAi剂可含有位于一链或两链的3’-端、5’-端、或两端的一个或多个突出端区域和或封端基。该突出端可以是1至6个核苷酸的长度，例如，2至6个核苷酸的长度、1至5个核苷酸的长度、2至5个核苷酸的长度、1至4个核苷酸的长度、2至4个核苷酸的长度、1至3个核苷酸的长度、2至3个核苷酸的长度、或1至2个核苷酸的长度。该突出端可以是一链长于另一链的结果，或是相同长度的两链交错的结果。该突出端可与靶标mRNA形成错配，或其可与正在作为靶标的基因序列互补，或可以是另一序列。该第一链及第二链亦可接合，例如，借由额外的碱基以形成发夹圈，或借由其他非碱基键联体接合。[0254]于一方面中，该RNAi剂的突出端区域中的核苷酸可各自独立为经修饰或未经修饰的核苷酸，包括但不限于，2’-糖修饰，如2-F、2’-0甲基、胸苷⑺、2’-0-甲氧基乙基-5-甲基尿苷Teo、2’-0-甲氧基乙基腺苷Aeo、2’-0-甲氧基乙基-5-甲基胞苷m5Ceo、及其任意组合。举例而言，TT可以是任意链上任意末端的突出端序列。该突出端可与靶标mRNA形成错配，或其可与正在作为靶标的基因序列互补，或可以是另一序列。[0255]RNAi剂的正义链、反义链或两链上的5’-或3’-突出端可经磷酸化。于某些方面中，该突出端区域是含有两个核苷酸且于该两个核苷酸之间具有硫代磷酸酯，其中，该两个核苷酸可以是相同或不同。于一方面中，该突出端是存在于正义链、反义链、或两链的3’-末端。于一方面中，此3’-突出端是存在于反义链中。于一方面中，此3’-突出端是存在于正义链中。[0256]该RNAi剂可仅含有一个突出端，其可强化该RNAi的干扰活性，而不影响其整体稳定性。举例而言，单链突出端可位于正义链的3’-末端或者反义链的3’-末端。该RNAi亦可于反义链的5’-末端具有钝端或正义链的3’-末端），反的亦然。通常，该RNAi的反义链是具有位于3’-末端的核苷酸突出端，且5’-末端为钝端。尽管不欲受缚于理论，位于反义链5’-末端的不对称钝端及反义链3’-末端的突出端是有利于引导该链加加载RISC过程。[0257]于一方面中，该RNAi剂是长度为19个核苷酸的双钝端者，其中，正义链是含有至少一个位于自5’端起位置7、8、9三个连续核苷酸上的三个2’-F修饰的基序。反义链是含有至少一个位于自5’端起位置11、12、13三个连续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序。[0258]于另一方面中，该RNAi剂是长度为20个核苷酸的双钝端者，其中，正义链是含有至少一个位于自5’端起位置8、9、10三个连续核苷酸上的三个2’-F修饰的基序。反义链是含有至少一个位于自5’端起位置11、12、13三个连续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序。[0259]于再一方面中，该RNAi剂是长度为21个核苷酸的双钝端者，其中，正义链是含有至少一个位于自5’端起位置9、10、11三个连续核苷酸上的三个2’-F修饰的基序。反义链是含有至少一个位于自5’端起位置11、12、13三个连续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序。[0260]于一方面中，该RNAi剂是包含21个核苷酸的正义链及23个核苷酸的反义链，其中，该正义链是含有至少一个位于自5’端起位置9、10、11三个连续核苷酸上的三个2’-F修饰的基序;该反义链是含有至少一个位于自5’端起位置11、12、13三个连续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序，其中，该RNAi剂的一端是钝端，而另一端是包含2个核苷酸的突出端。优选地，该2个核苷酸的突出端是位于该反义链的3’-末端。[0261]当该2个核苷酸的突出端位于反义链的3’-末端时，于末端三个核苷酸之间可存在两个硫代磷酸酯类核苷酸间键联，其中，该三个核苷酸中的两个是突出端核苷酸，且第三个核苷酸是与该突出端核苷酸的下一个核苷酸配对。于一方面中，该RNAi剂是于正义链的5’-末端及反义链的5’-末端两处具有位于末端三个核苷酸之间的两个硫磷酸酯类核苷酸间键联。于一方面中，该RNAi剂的正义链及反义链中的每一个核苷酸，包括作为基序的一部分的核苷酸，皆是经修饰的核苷酸。于一方面中，每一残基是独立经2’-0-甲基或3’-氟修饰，如，于交替基序中。视需要地，该RNAi剂是进一步包含配体优选是GalNAc3。[0262]于一方面中，该RNAi剂是包含正义链及反义链，其中，该正义链的长度是25至30个核苷酸残基，其中，自第一链的5’末端核苷酸位置1位置1至位置23，是包含至少8个核糖核苷酸;该反义链的长度是36至66个核苷酸残基，自3’末端核苷酸起始，于与正义链的位置1至23配对以形成双螺旋的位置，是包含至少8个核糖核苷酸;其中，至少反义链的3’末端核苷酸是未与正义链配对，且最多6个连续的3’末端核苷酸是未与正义链配对，从而形成具有1至6个核苷酸的3’单链突出端;其中，反义链的5’端是包含10至30个连续的未与正义链配对的核苷酸，从而形成具有10至30个核苷酸的单链5’突出端;其中，当正义与反义链是依最大互补性进行对准时，至少该正义链的5’末端及3’末端核苷酸是与反义链的核苷酸进行碱基配对，从而于正义链与反义链之间形成实质上双螺旋的区域；以及，当将该双链的核酸引入哺乳动物细胞内时，反义链是沿着该反义链长度有至少19个核糖核苷酸与靶标RNA充分互补，以降低靶标基因表达；以及，其中，该正义链是含有至少一个位于三个接续核苷酸上的三个2’-F修饰的基序，其中，这些基序中的至少一个是出现于裂解位点或邻近该裂解位点处。该反义链是含有至少一个位于裂解位点或邻近该裂解位点处的三个连续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序。[0263]于一方面中，该RNAi剂是包含正义链及反义链，其中，该RNAi剂是包含长度为至少25个且至多29个核苷酸的第一链，以及长度为至多30个核苷酸的第二链，且具有至少一个位于自5’末端位置11、12、13三个接续核苷酸上的三个2’-0-甲基修饰的基序;其中，该第一链的3’末端及第二链的5’末端是形成钝端，且该第二链是于其3’末端比该第一链长1至4个核苷酸，其中，该双螺旋区域的长度是至少25对核苷酸，且当将该RNAi剂引入哺乳动物细胞内时，该第二链是沿着该第二链长度的至少19个核苷酸与靶标mRNA充分互补，以降低靶标基因表达;以及，其中，切丁酶裂解RNAi剂是最佳产生包含该第二链3’末端的siRNA，从而降低该靶标基因于哺乳动物体内的表达。RNAi剂是视需要进一步包含配体。[0264]于一方面中，该RNAi剂的正义链是含有至少一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序，其中，这些基序的一者是出现于该正义链的裂解位点。[0265]于一方面中，该RNAi剂的反义链是含有至少一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序，其中，这些基序的一者是出现于该反义链的裂解位点。[0266]对于具有长度为17至23个核苷酸的双螺旋区域的RNAi剂，反义链的裂解位点典型是位于自5’-末端起的10、11及12位置左右。因此，三个相同修饰的基序可出现于自反义链的9、10、11位置；10、11、12位置；11、12、13位置；12、13、14位置;或13、14、15位置，自反义链的5’-末端的第一个核苷酸开始计数，或于该双螺旋区域内自反义链5’-末端的第一对成对核苷酸开始计数。反义链中的裂解位点也可根据RNAi的双螺旋区域从5’-末端起的长度而改变。[0267]该RNAi剂的正义链可含有至少一个位于该链裂解位点处三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序;且其反义链可具有至少一个位于该链裂解位点或邻近该位点处三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序。当该正义链与该反义链形成dsRNA双螺旋时，可对准该正义链及该反义链，以使该正义链上三个核苷酸的一个基序与该反义链上三个核苷酸的一个基序是具有至少一个核苷酸重叠，即，该正义链中基序的三个核苷酸的至少一者是与该反义链中基序的三个核苷酸的至少一者形成碱基对。可替代地，至少两个核苷酸可重叠，或全部三个核苷酸可重叠。[0268]于一方面中，该RNAi剂的正义链可含有超过一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序。第一基序可出现于该链的裂解位点或邻近该位点处，其他基序可以是翼修饰。本文中，术语「翼修饰」是指称出现于同一链的另一部位的基序其与出現在该链的裂解位点或邻近该裂解位点处的基序分开。翼修饰或可与第一基序相邻，或借由至少一个或多个核苷酸与后者分离。当这些基序彼此紧邻时，则这些基序的化学性是彼此截然不同；而当这些基序是借由一个或多个核苷酸分离时，则其化学性可以是相同或不同。可存在两种或更多种翼修饰。例如，当存在两种翼修饰时，相对于位于裂解位点或邻近裂解位点处的第一基序，每一翼修饰可出现于该第一基序的一端或该主基序的另一侧。[0269]与正义链相同，该RNAi剂的反义链可含有超过一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序，且这些基序中的至少一个是出现于该链的裂解位点或邻近裂解位点处。此反义链亦可含有一个或多个翼修饰，这些翼修饰的对准与可能存在于该正义链中的翼修饰类似。[0270]于一方面中，该RNAi剂的正义链或反义链上的翼修饰典型是不包括该链的3’-末端、5’-末端或两端的第一个或两个末端核苷酸。[0271]于另一方面中，该RNAi剂的正义链或反义链的翼修饰典型是不包括该链的3’-末端、5’-末端或两端的双螺旋区域内的第一对或前两对配对核苷酸。[0272]当该RNAi剂的正义链与反义链各自含有至少一个翼修饰时，该翼修饰可落入双螺旋区域的同一端，且具有一、二或三个核苷酸的重叠。[0273]当该RNAi剂的正义链与反义链各自含有至少两个翼修饰时，可将该正义链与反义链对准，以使各自来自一链的两个修饰落入该双螺旋区域的一端，且具有一、二或三核苷酸的重叠;使各自来自一链的两个修饰落入该双螺旋区域的另一端，且具有一、二或三核苷酸的重叠;来自一链的两个修饰各自落入该主基序的两侧，且于双螺旋区域中具有一、二或三核苷酸的重叠。[0274]于一方面中，该RNAi剂的正义链及反义链中的核苷酸，包括作为这些基序的一部分的核苷酸，皆可经修饰。每一核苷酸可经相同或不同的修饰方式进行修饰，这些修饰方式是包含一个或两个非键联磷酸酯氧和或一个或多个键联磷酸酯氧的一种或多种修改;核糖的组成如核糖上2’羟基的修改；以「去磷酸」键联体完全替换该磷酸酯基;天然出现的碱基的修饰或替换；以及，核糖-磷酸酯主链的替换或修饰。[0275]由于核酸是次单元的聚合物，故多个修饰是出现于核酸内的重复位置，如碱基、或磷酸酯部分、或磷酸酯部分的非键联〇的修饰。于某些例子中，该修饰将出现于该核酸内全部个别位置，但许多例子中并不会如此。举例而言，修饰可仅出现于3’或5’末端位置，可仅出现于末端区域，如一链的末端核苷酸或最末2、3、4、5、或10个核苷酸。修饰可出现于双链区域中、单链区域中、或两者中。修饰可仅出现于RNA的双链区域中，或仅出现于RNA的单链区域中。举例而言，于非键联0位置处的硫磷酸酯修饰可仅出现于一端或两端，可仅出现于末端区域如一链的末端核苷酸位置处或最末2、3、4、5、或10个核苷酸位置处，或可出现于双链区域及单链区域内尤其是末端。5’端或两端可经磷酸化。[0276]为了如提升稳定性，可于突出端中包括特定的碱基、或在单链突出端中如5’或3’突出端或两者中包括经修饰的核苷酸或核苷酸代替品。举例而言，所希望的可能是于突出端中包括嘌呤核苷酸。于某些方面中，3’或5’突出端中的全部或某些碱基可经修饰，如以本文中披露的修饰。修饰可包括，例如，使用本领域中熟知的修饰形式于核糖的2’位置进行修饰，如使用脱氧核糖核苷酸、经2’-脱氧-2’-氟2’-F或2’-0-甲基修饰者替代该核酸碱基中的核糖、以及磷酸酯中的修饰如硫代磷酸酯修饰。突出端并不需要与靶标序列同源。[0277]于一方面中，正义链及反义链的残基是各自独立经LNA、CRN、cET、UNA、HNA、CeNA、2’-甲氧基乙基、2’-〇-甲基、2’-〇-稀丙基、2’-C-稀丙基、2’-脱氧、2’-轻基、或2’-氣修饰。这些链可含有超过一种的修饰。于一方面中，正义链及反义链的残基是各自独立经2’-0-甲基或2’-氟修饰。[0278]该正义链及反义链是典型存在至少两种不同的修饰。那些两种修饰可以是2’-0-甲基或2’-氟修饰或其他。[0279]于一方面中，冗和或Nb是包含交替修饰形式。本文中，术语「交替基序」是指称具有一种或多种修饰的基序，且各修饰是于一链的交替核苷酸上出现。该交替核苷酸可指称每隔一个核苷酸有一个修饰、或每隔三个核苷酸有一个修饰、或类似形式。举例而言，若A、B及C是各自表示核苷酸的一种类型的修饰，则交替基序可以是“ABABABABABAB…”、“AABBAABBAABB···”、“AABAABAABAAB···”、“AAABAAABAAAB···”、“AAABBBAAABBB···”、或“ABCABCABCABC…，，等。[0280]交替基序中含有的修饰的类型可以是相同或不同。举例而言，若A、B、C、D是各自表示核苷酸的一种类型的修饰，则交替模式，即，每隔一个核苷酸上的修饰，可相同，但正义链或反义链可各自选自交替基序中修饰的若干可能性，如“ABABAB···”、“ACACAC···”、“BDBDBD···”、或“CDCDCD···”等。[0281]于一方面中，本发明的RNAi剂是包含下述修饰形式，正义链上交替基序的修饰形式是相对于反义链上交替基序的修饰形式位移。该位移可以是如下述者，正义链的核苷酸的经修饰组是与反义链的核苷酸的经不同修饰组对应，反的亦然。举例而言，当dsRNA双螺旋中的正义链与反义链配对时，正义链中的交替基序可从该链的5’-3’以“ABABAB”起始，而反义链中的交替基序可从双螺旋区域内从该链的5’-3’以“BABABA”起始。作为另一实例，正义链中的交替基序可从该链的5’-3’以“AABBAABB”起始，而反义链中的交替基序可从双螺旋区域内从该链的5’-3’以“BBAABBAA”起始，故该正义链与反义链之间的修饰模式为完全或部分位移。[0282]于一方面中，该RNAi剂是包含下述交替形式，正义链上的2’-0-甲基修饰及2’-F修饰的初始交替基序形式是具有相对于反义链上的2’-0-甲基修饰及2’-F修饰的初始交替基序模式的位移，即，正义链上的经2’-0-甲基修饰的核苷酸是与反义链上经2’-F修饰的核苷酸进行碱基配对，反的亦然。正义链的位置1可起始于2’-F修饰，而反义链的位置1可起始于2’-0-甲基修饰。[0283]将一个或多个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序引入正义链和或反义链，是干扰存在于该正义链和或反义链中的初始修饰形式。借由将一个或多个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序引入正义链和或反义链而造成的该正义链和或反义链的修饰模式的这一干扰，使人惊奇地提升了对于靶标基因的基因沉默活性。[0284]于一方面中，当将位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序引入这些链的任意者时，该基序的下一个核苷酸上的修饰是不同于该基序的修饰。举例而言，含有基序的序列部位是uNaYYYNb…”，其中，“Y”表示位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序的修饰，以及，“Na”及“Nb”表示位于基序“YYY”下一个核苷酸上的不同于Y的修饰的修饰，以及，其中，1与他可以是相同或不同的修饰。可替代地，当存在翼修饰时，1和或Nb可存在或不存在。[0285]该RNAi剂可进一步包含至少一个代磷酸酯类或甲基磷酸酯类核苷酸间键联。该硫代磷酸酯类或甲基磷酸酯类核苷酸间键联修饰可出现于正义链或反义链或两者的链中任意位置的任意核苷酸上。例如，该核苷酸间键联修饰可出现于正义链和或反义链的每一个核苷酸上;核苷酸间键联修饰可各自出现于正义链和或反义链的交替形式中；或正义链或反义链可于交替形式中含有两种核苷酸间键联修饰。正义链上核苷酸间键联修饰的交替形式可与反义链相同或不同，且正义链上核苷酸间键联修饰的交替形式可具有相对于反义链上核苷酸间键联修饰的交替形式的位移。于一方面中，双链RNAi剂是包含6至8个硫代磷酸酯类核苷酸间键联。于一方面中，该反义链包含两个位于5’-末端的硫代磷酸酯类核苷酸间键联以及两个位于3’-末端的硫代磷酸酯类核苷酸间键联，且该正义链包含至少两个或位于5’-末端或位于3’-末端的硫代磷酸酯类核苷酸间键联。[0286]于一方面中，该RNAi是包含位于突出端区域内的硫代磷酸酯类或甲基磷酸酯类核苷酸间键联修饰。举例而言，该突出端区域可含有两个核苷酸，其在该两个核苷酸之间具有硫代磷酸酯类或甲基磷酸酯类核苷酸间键联。亦可作成核苷酸间键联修饰以键联突出端核苷酸与双螺旋区域内的末端配对核苷酸。举例而言，至少2、3、4个或全部突出端核苷酸可通过硫代磷酸酯类或甲基磷酸酯类核苷酸键联而键联，以及，视需要，可存在额外的硫代酯类或甲基磷酸酯类核苷酸间键联将突出端核苷酸与处于该突出端核苷酸下一个位置的配对核苷酸键联。例如，可能存在位于末端三个核苷酸之间的两个硫代酯类核苷酸间键联，其中，该三个核苷酸中的两者是突出端核苷酸，而第三个是处于该突出端核苷酸下一个位置的配对核苷酸。此类末端三个核苷酸可位于反义链的3’-端、正义链的3’-端、反义链的5’-端、和或反义链的5’端。[0287]于一方面中，该2个核苷酸的突出端是位于反义链的3’-端，且于这些末端三个核苷酸之间存在两个硫代磷酸酯类核苷酸间键联，其中，这些三个核苷酸的两者是突出端核苷酸，而第三个核苷酸是处于该突出端核苷酸下一个位置的配对核苷酸。视需要，该RNAi剂可额外具有位于正义链5’-端及反义链5’-端两处的末端三个核苷酸之间的两个硫代磷酸酯类核苷酸间键联。[0288]于一方面中，该RNAi剂是包含一个或多个与靶标的错配、双螺旋内的错配、或其组合。该错配可出现于突出端区域或双螺旋区域。该碱基对可依据其促进解离或熔融的倾向排序如，以特定配对的缔合或解离的自由能为基准，最简单的途径是以单独的碱基对为基准而检查这些碱基对，但亦可使用下一相邻者或类似的分析）。以促进解离的观点而言:A:U是优于G:C;G:U是优于G:C;且I:C是优于G:CI是肌苷）。错配如非正则non-canonical配对或除正则配对以外的配对如本文中他处披露的）是优于正则A:T、A:U、G:C配对;且包括通用碱基的配对是优于正则配对。[0289]于一方面中，该RNAi剂是包含，双螺旋区域内自反义链5’-端起前1、2、3、4、或5对碱基对的至少一者是独立选自A:U、G:U、I:C、及错配碱基对如非典型配对或典型配对以外的配对或包括通用碱基的配对所组成组，以促进反义链于双螺旋的5’-端的解离。[0290]于一方面中，双螺旋区域内自反义链5’-端起位置1的核苷酸是选自A、dA、dU、U、dT所组成的组。可替代地，双螺旋区域内自反义链5’-端起前1、2、或3对碱基对的至少一者是AU碱基对。举例而言，双螺旋区域内自反义链5’-端起的第一对碱基对是AU碱基对。[0291]于另一方面中，正义链3’-端的核苷酸是脱氧胸腺嘧啶dT。于另一方面中，反义链3’-端的核苷酸是脱氧胸腺嘧啶dT。于一方面中，正义链和或反义链的3’-端是存在脱氧胸腺嘧啶核苷酸的短序列，举例而言，两个dT核苷酸。[0292]于一方面中，正义链序列可借由式⑴表示：[0293]5，nP-Na-XXXi-Nb-YYY—Nb-ZZZj-Na-nq3，I[0294]其中：[0295]i与j是各自独立为0或I;[0296]p与q是各自独立为0至6;[0297]Na是各自独立表示包含0至25个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列，各序列是包含至少两个经不同修饰的核苷酸；[0298]Nb是各自独立包含0至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列；[0299]办与〜是各自独立表示突出端核苷酸；[0300]其中，Nb与Y并不具有相同修饰；以及[0301]XXX、YYY及ZZZ是各自独立表示一个位于三个连续核苷酸上三个相同修饰的基序。优选地，YYY皆是经2’-F修饰的核苷酸。[0302]于一方面中，1和或Nb是包含交替形式的修饰。[0303]于一方面中，该YYY基序是出现于正义链的裂解位点或邻近该裂解位点处。举例而言，当该RNAi剂具有长度为17至23个核苷酸的双螺旋区域时，该YYY基序可出现于正义链的裂解位点或该裂解位点周围，如，可出现于位置6、7、8,7、8、9,8、9、10,9、10、11，10、11、12或11、12、13位置，自5’-端的第一个核苷酸开始计数;或视需要地，自双螺旋区域内5’-端的第一对配对核苷酸开始计数。[0304]于一方面中，i为1且j为0,或i为0且j为1，或i与j两者均为1。正义链可因此借由下式表示的：[0305][0306][0307][0308]当正义链是借由式（Ib表示时，Nb是表示包含0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。Na可各自独立表示包含2至20、2至15、或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0309]当正义链表示为式（Ic时，Nb是表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列可各自独立表示包含2至20、2至15,或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0310]当正义链表示为时（Id时，Nb是各自独立表示包含0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。优选地，Nb是0、1、2、3、4、5或6可各自独立表示包含2至20、2至15,或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0311]X、Y及Z的每一个可彼此相同或不同。[0312]于其他方面中，i为0且j为0,且正义链可借由下式表示的：[0313][0314]当正义链是借由式（Ia表示时，Na可各自独立表示包含2至20、2至15、或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0315]于一方面中，该RNAi的反义链序列可借由式II表示的：[0316]II[0317]其中：[0318]k与1是各自独立为0或1;[0319]p’与q’是各自独立为0至6;[0320]Na’是各自独立表示包含0至25个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列，每一序列是包含至少两个经不同修饰的核苷酸；[0321]Nb’是各自独立表示包含0至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列；[0322]nP’与nq’是各自独立表示突出端核苷酸；[0323]其中，Nb’与Y’并不具有相同的修饰；以及[0324]X’X’X’、Y’Y’Y’及Z’Z’Z’是各自独立表示一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序。[0325]于一方面中，Na’和或Nb’是包含交替形式的修饰。[0326]Y’Y’Y’基序是出现于反义链的裂解位点或邻近该裂解位点处。举例而言，当该RNAi剂具有长度为17至23个核苷酸的双螺旋区域时，该Υ’Υ’Υ’基序可出现于反义链的位置9、10、11;10、11、12;11、12、13;12、13、14;或13、14、15,自5’-端的第一个核苷酸开始计数；或视需要地，于双螺旋区域内自5’-的第一个配对核苷酸开始计数。优选地，该Υ’Υ’Υ’基序是出现于位置11、12、13。[0327]于一方面中，Y’Y’Y’基序皆是经2’-OMe修饰的核苷酸。[0328]于一方面中，k为1且1为0,或k为0且1为1，或k与1两者均为1。[0329]反义链因此可借由下式表示的：[0330][0331][0332][0333]当该反义链是借由式（IIb表示时，Nb’是表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。Na’是各自独立表示包含2至20、2至15，或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0334]当该反义链表示为式（IIc时，Nb’是表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。Na’是各自独立表示包含2至20、2至15,或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0335]当该反义链表示为式（IId时，Nb’是各自独立表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。Na’是各自独立表示包含2至20、2至15，或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。优选地，Nb是0、1、2、3、4、5或6。[0336]于其他方面中，k为0且1为0,且该反义链可借由下式表示的：[0337][0338]当该反义链表示为式（IIa时，Na’是各自独立表示包含2至20、2至15、或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0339]X’、Y’及Z’的每一个可彼此相同或不同。[0340]正义链及反义链的核苷酸可各自经LNA、CRN、UNA、cEt、HNA、CeNA、2’-甲氧基乙基、2’-0-甲基、2’-0-烯丙基、2’-C-烯丙基、2’-羟基、或2’-氟修饰。举例而言，正义链及反义链的核苷酸是各自独立经2’-0-甲基或2’-氟修饰。特别地，X、Y、Z、X’、Y’及Z’的每一者可表示2’-0-甲基修饰或2’-氟修饰。[0341]于一方面中，当双螺旋区域为21nt时，该RNAi剂的正义链可含有出现于该链的9、1〇、11位置处的YYY基序，自5’-端的第一个核苷酸开始计数，或视需要地，于双螺旋区域内自5’-端的第一个配对核苷酸开始计数;且Y是表示2’-F修饰。该正义链可额外含有XXX基序或ZZZ基序作为双螺旋区域相反端的翼修饰;且XXX与ZZZ是各自独立表示2’-OMe修饰或2’-F修饰。[0342]于一方面中，反义链可含有出现于该链的11、12、13位置处的¥’¥’¥’基序，自5’-端的第一个核苷酸开始计数，或视需要，于双螺旋区域内自5’-端的第一个成对核苷酸开始计数;且Y’是表示2’-0-甲基修饰。该反义链可额外含有X’X’X’基序或Z’Z’Z’基序作为双螺旋区域相反端的翼修饰;且X’X’X’与Z’Z’Z’是各自独立表示2’-OMe修饰或2’-F修饰。[0343]借由上式（Ia、（Ib、（Ic、及（Id的任一者表示的正义链是分别与借由式（IIa、IIb、（IIc、及（IId的任一者表示的反义链形成双螺旋。[0344]据此，用于本发明的方法的RNAi剂可包含正义链及反义链，各链是具有14至30个核苷酸，该RNAi双螺旋是借由式III表示的：[0345]正义[0346]反义[0347]HI[0348]其中：[0349]i、j、k、及I是各自独立为0或I;[0350]p、p’、q、及q’是各自独立为0至6;[0351]1与1’是各自独立表示包含0至25个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列，每一序列是包含至少两个经不同修饰的核苷酸；[0352]Nb与Nb’是各自独立表示包含0至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列；[0353]其中，11、11[、111’、及111的每一者可存在或不存在，且是各自独立表示突出端核苷酸；以及[0354]及Z’Z’Z’是各自独立表示一个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序。[0355]于一方面中，i为0且j为0;或i为1且j为0;或i为0且j为1;或i及j两者皆为0;或i及j两者皆为1。于另一方面中，k为0且1为0;或k为1且1为0;k为0且1为1;或k及1两者皆为0;或k及1两者皆为1。[0356]形成RNAi双螺旋的正义链与反义链的例示性组合是包括下式：[0357][0358][0359][0360][0361][0362][0363][0364][0365][0366][0367][0368][0369]当该RNAi剂是借由式（IIIa表示时，Na是各自独立表示包含2至20、2至15、或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0370]当该RNAi剂是借由式（IIIb表示时，Nb是各自独立表示包含1至10、1至7、1至5或1至4个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列是各自独立表示包含2至20、2至15,或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0371]当该RNAi剂表示为式（IIIc时，Nb、Nb’是各自独立表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列是各自独立表示包含2至20、2至15，或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。[0372]当该RNAi剂表示为式（IIId时，Nb、Nb’是各自独立表示包含0至10、0至7、0至10、0至7、0至5、0至4、0至2或0个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列。Na、Na’是各自独立表示包含2至20、2至15,或2至10个经修饰的核苷酸的寡核苷酸序列’、Nb及Nb’是各自独立包含交替模式的修饰。[0373]式（III、（Ilia、（IIIb、（IIIc、及（IIId中每一X、Y及Z可以是彼此相同或不同。[0374]当该RNAi剂是借由式III、（Ilia、（IIIb、（IIIc、及IIId表示时，Y核苷酸的至少一个可与Y’核苷酸的一者形成碱基对。可替代地，Y核苷酸的至少两个与对应Y’核苷酸形成碱基对;或Y核苷酸的全部三个皆与对应Y’核苷酸形成碱基对。[0375]当该RNAi剂是借由式（IIIb或（IIId表示时，Z核苷酸的至少一个可与Z’核苷酸的一者形成碱基对。可替代地，Z核苷酸的至少两个与对应Z’核苷酸形成碱基对;或Z核苷酸的全部三个皆与对应Z’核苷酸形成碱基对。[0376]当该RNAi剂表示为式（IIIc或（IIId时，X核苷酸的至少一个可与X’核苷酸的一者形成碱基对。可替代地，X核苷酸的至少两个与对应X’核苷酸形成碱基对;或X核苷酸的全部三个皆与对应X’核苷酸形成碱基对。[0377]于一方面中，Y核苷酸上的修饰是不同于Y’核苷酸上的修饰，Z核苷酸上的修饰是不同于Z’核苷酸上的修饰，和或X核苷酸上的修饰是不同于X’核苷酸上的修饰。[0378]于一方面中，当该RNAi剂是借由式（IIId表示时，Na修饰是2’-0-甲基或2氟修饰。于另一方面中，当该RNAi剂是借由式IIId表示时，这些Na修饰是2’-0-甲基或2氟修饰，nP’0,以及，至少一个nP’是经由硫代磷酸酯键联而键联至相邻核苷酸。于再一方面中，当该RNAi剂是借由式（IIId表示时，这些Na修饰是2-0-甲基或2氟修饰，nP’0，以及，至少一个nP’是经由硫代磷酸酯键联而键联至相邻核苷酸，且正义链是接合至通过二价或三价分支链连接子披露于下）附接的一个或多个GalNAc衍生物。于另一方面中，当该RNAi剂是借由式（IIId表示时，这些1修饰是2-0-甲基或2-氟修饰，nP’0，以及，至少一个nP’是经由硫代磷酸酯键联而键联至相邻核苷酸，该正义链包含至少一个硫代磷酸酯键联，且该正义链是接合至通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0379]于一方面中，当该RNAi剂是借由式（IIIa表示时，这些Na修饰是2-0-甲基或2-氟修饰，nP，0，以及，至少一个IV是经由硫代磷酸酯键联而键联至相邻核苷酸，该正义链包含至少一个硫代磷酸酯键联，且该正义链是接合至通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。[0380]于一方面中，该RNAi剂是含有至少借由式（III、（Ilia、（IIIb、（IIIc、及IIId表示的两个双螺旋的多聚体，其中，这些双螺旋是借由键联体而连结。该键联体可以是可裂解或不可裂解。该多聚体视需要进一步包含配体。这些双螺旋各自可靶标相同基因或两种不同基因；或这些双螺旋各自可靶标相同基因的两个不同靶标位点。[0381]于一方面中，该RNAi剂是含有三个、四个、五个、六个或更多个借由式（III、Ilia、（IIIb、（IIIc、及IIId表示的双螺旋的多聚体，其中，这些双螺旋是借由键联体而连结。该键联体可以是可裂解或不可裂解。视需要地，该多聚体进一步包含配体。这些双螺旋各自可靶标相同基因或两种不同基因；或这些双螺旋各自可靶标相同基因的两个不同革巴标位点。[0382]于一方面中，借由式（III、（Ilia、（IIIb、（IIIc、及（IIId表示的RNAi剂是于5’端与一个或两个3’端彼此键联，且视需要接合至配体。每一剂可以相同基因或两个不同基因为靶标;或每一剂可以相同基因的两个不同靶标位点为靶标。[0383]多种不同文献披露了可用于本发明的方法中的多聚性RNAi剂。此类文献是包括国际公开案第WO2007091269号、美国专利案第7858769号、国际公开案第WO2010141511号、国际公开案第WO2007117686号、国际公开案第WO2009014887号及国际公开案第WO2011031520号，这些专利各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0384]如下文更详细披露的，含有一个或多个碳水化合物部分与RNAi剂接合的RNAi剂可优化该RNAi剂的一种或多种特性。于很多例中，该碳水化合物部分将附接至该RNAi剂的经修饰的次单元。举例而言，dsRNA剂的一个或多个核糖核苷酸次单元的核糖可经另一部分如其上附接有碳水化合物配体的非碳水化合物优选环状载剂替换。本文中，其核糖经如此替换的核糖核苷酸次单元是指称为核糖替换修饰次单元RRMS。环状载剂可以是碳环状环系，即，全部环原子皆为碳原子者;或是杂环状环系，即，一个或多个环原子可以是杂原子如氮、氧、硫。该环状载剂可以是单环状环系，或可含有两个或更多个环如稠合环。该环状载剂可以是完全饱和环系，或其可含有一个或多个双键。[0385]该配体可经载剂附接至多核苷酸。这些载剂是包括⑴至少一个“主链附接点”，优选两个“主链附接点”，以及，（ii至少一个“系链附接点”。本文中，“主链附接点”是指称可用于且适用于将该载剂并入该主链的官能基如羟基或通常为键结，如磷酸酯或经修饰的磷酸酯如含硫者、核糖核酸的主链。于某些方面中，“系链附接点”（TAP是指称该环状载剂的连结所选部分的组成环原子，如碳原子或杂原子不同于提供主链附接点的原子）。该部分可以是，碳水化合物如单糖、二糖、三糖、四糖、寡糖及多糖。视需要，所选部分可借由中介系链连结至该环状载剂。因此，该环状载剂一般将会包括官能基如氨基或通常提供一键结，其是适用于将另一化学受试者如配体合并或系链至组成环。[0386]该RNAi剂可经由载剂接合至配体，其中，该载剂可以是环状基团或非环状基团；优选地，该环状基团是选自吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、昵啶基、昵嗪基、[1，3]-二氧杂环戊烷、噁唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、四氢噻唑基、异四氢噻唑基、喹喔啉基、U达嗪酮基pyridazinonyl、四氢呋喃基及十氢萘;优选地，该非环状基团是选自丝氨醇主链或二乙醇胺主链。[0387]于某些具体方面中，用于本发明的方法中的RNAi剂是选自表11、12、31、及32任一者中列述的剂所组成的组。此类剂可进一步包含配体。于一方面中，该剂是选自AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1所组成的组。于另一方面中，该剂是选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、或AD-70295.1所组成的组。[0388]IV.接合至配体的iRNA[0389]本发明iRNA的RNA的另一修饰是包括将一个或多个提升该iRNA的活性、细胞分布或细胞吸收的配体、部分或接合物键联至RNA。此类部分是包括，但不限于，脂质部分如胆固醇部分（Letsingeretal.,Proc.Natl.Acid.Sci.USA，1989,86:6553-6556、胆酸Manoharanetal·,Biorg.Med.Chem.Let.，1994,4:1053-1060、硫酿如己基-S-三苯甲基硫醇（Manoharanetal.，Ann.N.Y.Acad.Sci.，1992,660:306_309;Manoharanetal·，Biorg.Med.Chem.Let.，1993,3:2765-2770、疏基胆固醇（Oberhauseretal·,Nucl.AcidsRes.,1992,20:533-538、脂族链如十二烷二醇或^-一烷基残基（Saison-Behmoarasetal.,EMB0J,1991,10:llll-1118；Kabanovetal.,FEBSLett.,1990,259:327-330；Svinarchuketal.,Biochimie,1993,75:49-54、磷脂如二-十六烧基-外消旋甘油或1,2-二-〇-十六烧基-外消旋甘油-3-磷酸三乙基铵盐Manoharanetal·,TetrahedronLett·,1995,36:3651-3654;Sheaetal.,Nucl.AcidsRes.,1990,18:3777-3783、聚胺或聚乙二醇链（Manoharanetal·,NucleosidesNucleotides,1995,14:969-973、或金刚烧乙酸Manoharanetal·,TetrahedronLett.,1995,36:3651-3654、棕榈基部分（Mishraetal·,Biochim·Biophys.Acta,1995,1264:229-237、或十八烧基胺或己基氨基-羰基氧基胆固醇部分（Crookeetal.,J.Pharmacol.Exp.Ther.,1996,277:923-937。[0390]于一方面中，配体是改变该配体所并入的iRNA剂的分布、靶向或寿命。于优选方面中，相较诸如没有此配体者，该配子是提供提升对于所选靶标的亲和性，该靶标是诸如分子、细胞或细胞类型、隔室如细胞或器官隔室、组织、器官或身体区域。优选的配体将不参与双螺旋核酸中的双螺旋配对。[0391]配体可包括天然产生物质，如蛋白质（如，人血清白蛋白（HSA、低密度脂蛋白LDL、或球蛋白）；碳水化合物如，葡聚糖、聚三葡萄糖pullulan、几丁质、几丁聚糖、菊糖、环糊精、N-乙酰基半乳胺糖、或玻尿酸）；或脂质。该配体亦可为重组或合成分子，如合成聚合物如合成聚氨基酸。聚氨基酸的实例是包括聚赖氨酸PLL、聚L-天冬氨酸、聚L-谷氨酸、苯乙烯-马来酸酐共聚物、聚L-乳交酯-共-乙交酯共聚物、二乙烯基醚-马来酸酐共聚物、N-2-羟基丙基）甲基丙烯基酰胺共聚物HMPA、聚乙二醇PEG、聚乙烯醇PVA、聚胺酯、聚（2-乙基丙稀酸）、N_异丙基丙稀基酰胺聚合物、或聚膦polyphosphazine。聚胺的实例是包括:聚乙烯亚胺、聚赖氨酸PLL、精四胺、精三胺、多胺、伪肽-多胺、拟肽多胺、树枝状多胺、精氨酸、脒、鱼精蛋白、阳离子脂质、阳离子卟啉、多胺的四级盐、或α螺旋肽。[0392]配体亦可包括靶向基团，如细胞或组织靶向剂，如凝集素、糖蛋白、脂质或蛋白质如抗体，其是结合至特定的细胞类型如肾细胞。靶向基团可以是促甲状腺素、促黑素、凝集素、糖蛋白、表面活性剂蛋白Α、黏蛋白碳水化合物、多价乳糖、多价半乳糖、N-乙酰基-半乳胺糖、N-乙酰基-葡萄糖胺多价甘露糖、多价海藻糖、糖基化聚氨基酸、多价半乳糖、运铁蛋白、双磷酸酯、聚谷氨酸盐、聚天冬氨酸盐、脂质、胆固醇、类固醇、胆酸、叶酸盐、维他命Β12、维他命A、生物素、或R⑶肽或R⑶肽模拟物。[0393]配体的其他实例是包括染料、螯合剂（如，吖啶）、交联剂如，补骨脂素、丝裂霉素C、卩卜啉（TPPC4、德卩卜啉（texaphyrin、噻啉（Sapphyrin、多环芳经类如，吩嗪、二氢吩嗪）、人工核酸内切酶如，EDTA、亲脂性分子如，胆固醇、胆酸、金刚烷乙酸、1-芘丁酸、二氢睪酮、1，3-双-0十六烷基甘油、香叶基氧基己基、十六烷基甘油、冰片、薄荷脑、1，3-丙二醇、十七烷基、棕榈酸、肉豆蔻酸、03-油酰基石胆酸、03-油酰基胆烯酸、二甲氧基三苯甲基、或吩噁嗪）及肽接合物（如，触角足肽、Tat肽）、烷基化剂、磷酸根、氨基、巯基、PEG如，PEG-40K、MPEG、[MPEG]2、多氨基、烷基、经取代的烷基、放射性标记的标记物、酶、半抗原（如，生物素）、输送吸收促进剂如，阿司匹林、维他命E、叶酸）、合成核糖核酸酶如，咪唑、双咪唑、组胺、咪唑簇、吖啶-咪唑接合物、四氮杂大环的Eu3+错合物）、二硝基苯基、HRP、或AP。[0394]配体可以是蛋白质如糖蛋白，或肽如对于共配体具有特别亲和性的分子，或抗体如结合特定细胞类型如肝细胞的抗体。配体亦可包括激素及激素受体。他们亦可包括非肽者，如脂质、凝集素、碳水化合物、维他命、辅因子、多价乳糖、多价半乳糖、N-乙酰基-半乳胺糖、N-乙酰基-葡萄糖胺多价甘露糖、或多价海藻糖。该配体可以是，举例而言，脂质多糖、P38MAP激酶的活化剂、或NF-kB的活化剂。[0395]该配体可以是一物质如药物，其可增加iRNA剂至细胞内的吸收，举例而言，借由破坏该细胞的细胞骨架，如借由破坏该细胞的微管、微丝、和或中间丝。该药物可以是，举例而言，紫杉醇taxon、长春新碱、长春碱、细胞松弛素、诺考达唑nocodazole、促进微丝聚合剂（japlakinolide、微丝解聚剂（IatrunculinA、鬼笔环肽phalIoidin、海洋苔藓素swinholideA、印丹诺辛（indanocine、或迈尔素myoservin〇[0396]于某些方面中，本文所披露的结合至iRNA的配体是作为药物动力学调节剂PK调节剂而作动。PK调节剂是包括亲脂质体、胆酸、类固醇、磷脂质类似物、肽、蛋白质接着剂、PEG、维他命等。例示性PK调节剂是包括，但不限于，胆固醇、脂肪酸、胆酸、石胆酸、二烷基甘油酯、二酰基甘油酯、磷脂质、神经脂质、萘普生naproxen、伊布洛芬（ibuprofen、维他命E、生物素等。亦已知，包含大量硫代磷酸酯键联的寡核苷酸可结合血清蛋白，故于主链中包含多个硫代磷酸酯键联的短寡核苷酸如约5个碱基、10个碱基、15个碱基或20个碱基的寡核苷酸，亦可作为适用于本发明的配体如，作为PK调节配体）。此外，接合血清成分（如，血清蛋白）的适体亦适用于作为本文披露的方面中的PK调节配体。[0397]本发明的接合有配体的寡核苷酸可使用承载有侧链反应性官能度的寡核苷酸合成，该侧链反应性官能度是诸如衍生自键联分子于该寡核苷酸上的附接者披露于下）。此反应性寡核苷酸可直接与可商购的配体、承载多种保护基的任一者的合成配体、或其上附接有键联部分的配体反应。[0398]于本发明的接合物中使用的寡核苷酸可通过固相合成的熟知技术便利且常规地制造。用于此合成的设备是由多个供货商贩卖，包括，举例而言，应用生物系统AppliedBiosystemsFosterCity,Calif.。可额外或替代使用该技术领域中熟知的用于此合成的任意其他手段。亦熟知者是使用类似技术指标其他寡核苷酸，如这些硫代磷酸酯类及烷基化衍生物。[0399]与本发明的接合有配体的寡核苷酸及承载配体分子的序列专一性键联的核苷酸中，可在合适的DNA合成仪上使用标准核苷酸或核苷前驱物、或已经承载有该键联部分的核苷酸或核苷接合物前驱物、已经承载有该配体分子的配体-核苷酸或核苷接合物前驱物、或承载有配体的非核苷构成嵌段组装成寡核苷酸及寡核苷。[0400]当使用已经承载有键联部分的核苷酸-接合物前驱物时，通常是完成与该序列专一性键联的核苷的合成，且该配体分子随后与该键联部分反应以形成该接合有配体的寡核苷酸。于某些方面中，本发明的寡核苷酸或键联的核苷是借由自动合成器自动合成，使用原料除了可商购且常规用于寡核苷酸合成的标准亚磷酰胺及非标准亚磷酰胺外，亦使用衍生自配体-核苷接合物的亚磷酰胺。[0401]A.脂质接合物[0402]于一方面中，该配体或接合物是脂质或脂质是分子。此脂质或脂质是分子优选是接合血清蛋白如人血清白蛋白（HSAAAS接着配体是容许该接合物分布在靶标组织如身体的非肾脏靶标组织。举例而言，该靶标组织可以是肝脏，包括肝脏的实质细胞。其他可接合HAS的分子亦可作为配体。举例而言，可使用萘普生或阿司匹林。脂质或脂质是配体可a增加接合物对降解的抗性、〇3增加靶向或输送至靶标细胞或细胞膜内，和或c可用以调整至血清蛋白如HAS的结合性。[0403]脂质是配体可用以抑制，如控制接合物至靶标组织的结合。举例而言，HAS与脂质或脂质是配体的结合性越强时，将更不容易以肾脏为靶标，并因此更不容易自体内清除。与HAS结合性较低的脂质或脂质是配体可用以使该接合物以肾脏为靶标。[0404]于优选的方面中，该脂质是配体是结合HAS。优选地，其是以足够的亲和性结合HAS，故该接合物将优选分布至非肾脏组织。然而，优选是该亲和性并未强至使该HSA-配体结合不可逆。[0405]于另一优选方面中，该脂质是配体是弱结合至HSA或完全未结合后者，故该接合物将优选分布至肾脏。以肾脏细胞为iBaby的其他部分亦可用于替代该脂质是配体，或除了使用该质子是配体外亦使用这些其他部分。[0406]于另一方面，该配体是借由靶标细胞如增殖细胞摄取的部分如维他命。此类是特别可用于治疗以非所希望的细胞增殖如恶性或非恶性类型者为特征的病症。例示性维他命是包括维他命A、E、及K。其他例示性维他命是包括B族维他命如叶酸、B12、核黄素、生物素、吡哆醛、或借由靶标细胞如肝脏细胞摄取的其他维他命或营养素。还包括HAS及低密度脂蛋白（LDL。[0407]B.细胞渗透剂[0408]于另一方面，该配体是细胞渗透剂，优选是螺旋细胞渗透剂。优选地，该剂为两亲性。例示性剂是肽如tat或触角足肽antennopedia。若该剂是肽，其可经修饰，包括肽模拟物、反演体（invertomer、非肽或伪肽键联、以及D-氨基酸的使用。该螺旋剂优选是α-螺旋剂，其优选是具有亲脂及疏脂相。[0409]该配体可以是肽或肽模拟物。肽模拟物本文中亦指称为寡肽模拟物是能折叠为所定义的类似天然肽的三维结构。肽及肽模拟物与iRNA剂的结合可借由诸如提升细胞识别及吸收而影响该iRNA的药物动力学分配。该肽或肽模拟物部分的长度可以是约5至50个氨基酸，如长度为约5、10、15、20、25、30、35、40、45、或50个氨基酸。[0410]肽或肽模拟物可以是，举例而言，细胞渗透肽、阳离子肽、两亲性肽、或疏水性肽如，主要由Tyr、Trp或Phe组成者）。该肽部分可以是树枝状肽、约束性肽、或交联肽。于另一备选中，该肽部分可包括疏水性膜转位序列MTS。例示性疏水性含MTS的肽是具有氨基酸序列AAVALLPAVLLALLAPSEQIDN0:1831的RFGF。含有疏水性MTS的RFGF类似物（如，氨基酸序列AALLPVLLAAPSEQIDN0:1832亦可以是靶向部分。该肽部分可以是「递送」肽，其可携带包括肽、寡核苷酸及蛋白质的极性大分子而越过细胞膜。举例而言，已经发现，来自HIVTat蛋白的序列（GRKKRRQRRRPPQSEQIDN0:1833及果蝇触角足蛋白（DrosophilaAntennapediaproteinRQIKIWFQNRRMKWKKSEQIDNO:1834能有递送肽的功能。肽或肽模拟物可借由DNA的随机序列而编码，如经噬菌体显示库或一珠一化合物（one-bead-one-compound0B0C组合库（Lametal.,Nature,354:82-84,1991鉴别者。经所并入的细胞靶向目标用单体单元而系链至dsRNA剂的肽或仿真物的实例是精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸RGD-肽或R⑶模拟物。肽部分的长度可以是约5个氨基酸至约40个氨基酸的范围。这些肽部分可具有结构性修饰，如用以增加稳定性或引导构型特性。可使用下文披露的任意结构性修饰。[0411]用于本发明的组合物及方法的RGD肽可以是线性或环状，且可经修饰如经糖基化或甲基化，以促进对于具体组织的靶向。含有RGD的肽及肽模拟物可包括D-氨基酸以及合成性RGD模拟物。除了RGD外，亦可使用以整联蛋白配体为靶标的其他部分。此配体的优选接合物是以PECAM-I或VEGF为靶标。[0412]“细胞渗透肽”是能渗透细胞如微生物细胞如细菌或真菌细胞、或哺乳动物细胞如人细胞。微生物细胞渗透肽可以是，举例而言，α-螺旋线性肽如，LL-37或CeropinPl、含有二硫键的肽如，α-防卫素、防卫素或牛抗菌肽bactenecin、或仅含有一种或两种主要氨基酸的肽如，PR-39或indolicidin。细胞渗透肽亦可包括核定位讯号NLS。举例而言，细胞渗透肽可以是二分性两亲性肽如MPG，其是衍生自HIV-lgp41的融合肽域及SV40大T抗原的NLSSimeonietal.，Nucl.AcidsRes.31:2717-2724,2003〇[0413]C.碳水化合物接合物[0414]于本发明的组合物及方法的某些方面中，iRNA寡核苷酸进一步包含碳水化合物。如本文中披露的，该接合有碳水化合物的iRNA于核酸的体内递送以及使用于体内治疗用途的组合物方面具有优势。本文中，“碳水化合物”是指称化合物，其为本身由一个或多个具有至少6个碳原子的单糖单元其可以是线性、分支链或环状作成的碳水化合物，且每一碳原子上键结有氧、氮或硫原子;或为其一部分是由一个或多个各具有至少6个碳原子的单糖单元其可以是线性、分支链或环状作成的碳水化合物部分的化合物，且每一碳原子上键结有氧、氮或硫原子。代表性碳水化合物是包括糖类单糖、二糖、三糖及含有约4、5、6、7、8、或9个单糖单元的寡糖），以及多糖类如淀粉、肝糖、纤维素及多糖胶。具体的单糖是包括HDV及上述如，C6、C7、或C8糖类;二糖及三糖是包括具有两个或三个单糖单元如，C6、C7、或C8的糖类。[0415]于一方面中，用于本发明的组合物及方法中的碳水化合物接合物是单糖。于一方面中，该单糖是N-乙酰基半乳胺糖，如[0417]于另一方面中，用于本发明的组合物及方法中的碳水化合物接合物选自下组，该组由以下各项组成：[0423]用于本文披露的方面中的另一代表性碳水化合物接合物是包括，但不限于，[0425]试XXIII，当X或Y的一者为寡核苷酸时，另一者为氢。[0426]于某些方面中，该碳水化合物接合物进一步包含如上文披露的一个或多个额外的配体，例如，但不限于，PK调节剂或细胞渗透肽。[0427]D·键联体[0428]于某些方面中，本文披露的接合物或配体可经多种键联体结合至iRNA寡核苷酸，这些键联体可以是可裂解或不可裂解。[0429]术语“键联体”或“键联基”是意指连结化合物两部分的有机部分，如将化合物的两部分共价结合。键联体典型是包含直接键结;或诸如氧或硫的原子;诸如NR8、C0、C⑼NH、S0、S02、S02NH的单元;或原子的链，例如，但不限于，经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的烯基、经取代或未经取代的炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、杂芳基烷基、杂芳基烯基、杂芳基炔基、杂环基烷基、杂环基烯基、杂环基炔基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基、环稀基、焼基芳基焼基、焼基芳基稀基、焼基芳基块基、稀基芳基焼基、稀基芳基稀基、稀基芳基块基、块基芳基焼基、块基芳基稀基、块基芳基块基、焼基杂芳基焼基、焼基杂芳基稀基、焼基杂芳基块基、稀基杂芳基焼基、稀基杂芳基稀基、稀基杂芳基块基、块基杂芳基焼基、块基杂芳基稀基、块基杂芳基块基、焼基杂环基焼基、焼基杂环基稀基、焼基杂环基块基、稀基杂环基焼基、稀基杂环基稀基、稀基杂环基块基、块基杂环基焼基、块基杂环基稀基、炔基杂环基炔基、烷基芳基、烯基芳基、炔基芳基、烷基杂芳基、烯基杂芳基、炔基杂芳基，其一个或多个亚甲基可借由〇、S、S0、S〇2、NR8、C⑼、经取代或未经取代的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的杂环中断或终止;其中，R8是氢、酰基、脂族或经取代的脂族。于一方面中，该键联体是界于约1至24个原子之间、2至24个原子之间、3至24个原子之间、4至24个原子之间、5至24个原子之间、6至24个原子之间、6至18个原子之间、7至18个原子之间、8至18个原子之间、7至17个原子之间、8至至17个原子之间、6至16个原子之间、7至16个原子之间、或8至16个原子之间。[0430]可裂解键联基是于细胞外足够稳定者，但其进入靶标细胞时，则裂解以释放该键联体握持在一起的两部分。于一优选的方面中，该可裂解的键联基于靶标细胞内或第一参考条件其可例如选择为模拟或呈现细胞内条件）下的裂解比在受试者血液中或第二参考条件其可例如选择为模拟或呈现于血液或血清中找到的条件下快至少约10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍或更快、或至少约100倍。[0431]可裂解的键联基是对裂解剂如PH、氧化还原电位或可降解分子的存在敏感。通常，裂解剂于细胞内比血清或血液中更常见，或发现其在细胞内比血清或血液中的含量或活性更高。此类可降解剂的实例是包括，选择用于特定底物或不具底物专一性的氧化还原剂，包括诸如细胞内存在的氧化性或还原性酶或还原剂如硫醇，其可借由还原而降解可经氧化还原裂解的键联基;酯酶;可创制酸性环境的内体或剂，如那些导致PH为5或更低者;可借由作为一般性酸作动而水解或降解酸可裂解的键联基的酶;肽酶其可以是底物专一性者）；以及，磷酸酯酶。[0432]可裂解的键联基，如二硫键，可对pH敏感。人血清的pH为7.4，而细胞内平均pH略低，为约7.1至7.3的范围。内体是具有酸性更强的pH，其范围是5.5至6.0;而溶酶体则具有酸性甚至更强的PH，约为5.0。某些键联体将具有可裂解的键联基，该键联基在优选的pH裂解，从而自配体释放阳离子脂质于细胞内或释放入细胞的所欲隔室中。[0433]键联体可包括可借由特定酶裂解的可裂解键联基。并入键联体的可裂解键联基的类型可取决于待作为靶标的细胞。举例而言，肝脏靶向配体可通过包括酯基的键联体连结至阳离子脂质。肝脏细胞是富含酯酶，因此该键联体于肝脏细胞中将会比在酯酶不丰富的细胞类型中更有效裂解。其他富含酯酶的细胞类型是包括肺细胞、肾皮质细胞及睪丸细胞。[0434]当靶向富含肽酶的细胞类型如是肝脏细胞及滑膜细胞时，可使用含有肽键的键联体。[0435]通常，候选可裂解的键联基的适用性可借由测试降解剂或条件裂解该候选键联基的能力而评估。还希望地是，也测试该候选可裂解的键联基于血液中或当与其他非靶标组织接触时抵抗裂解的能力。因此，可确定第一条件与第二条件之间的相对易感性，其中，该第一条件是经选择以指示于靶标细胞中的裂解，而第二条件是经选择以指示于其他组织或生物流体如血液或血清中的裂解。这些评估可于无细胞的系统、细胞内、细胞培养物内、器官内或组织培养内、或于完整动物体内进行。可用者是于无细胞条件或培养条件下作出评估，并借由在完整动物体内的进一步评估而证实的。于优选的方面中，可用的后续化合物于细胞中（或于选择为模拟细胞内条件的体外条件下）的裂解是比在血液或血清中（或于选择为模拟细胞外条件的体外条件下快至少约2、4、10、20、30、40、50、60、70、80、90、或约100倍。[0436]i.氧化还原可裂解的键联基[0437]于一方面中，可裂解的键联基是可经氧化还原裂解的键联基，该基团是于还原或氧化时裂解。还原性可裂解的键联基的实例是二硫键联基-S-S-。可依靠本文中披露的方法来确定候选的可裂解的键联基是否为适宜的“还原性可裂解的键联基”，或举例而言，是否为适用于与特定iRNA部分或特定靶向剂合用。举例而言，候选者可借由以二硫苏糖醇DTT或使用本领域中熟知的还原剂培养，其是模拟会于细胞如靶标细胞中观察到的裂解的速率。这些候选者亦可于选择为模拟血液或血清条件的条件下评估的。于一方面中，候选化合物是于血液中裂解最多约10%。于另一方面中，可用的候选化合物于细胞中（或于选择为模拟细胞内条件的体外条件下）的降解比血液中（或于选择为模拟细胞外条件的体外条件下）快至少约2、4、10、20、30、40、50、60、70、80、90、或约100倍。候选化合物的裂解速率可使用标准酶动力学试验于选择为模拟细胞内介质的条件下测定，并与在选择为模拟细胞外介质的条件下试验者比较。[0438]ii.基于磷酸酯的可裂解的键联基[0439]于另一方面中，可裂解的键联体是包含基于磷酸酯的可裂解的键联基。基于磷酸酯的可裂解的键联基是借由降解或水解该磷酸酯基团的剂裂解。于细胞内裂解磷酸酯基团的剂的实例是细胞内的酶，如磷酸酯酶。基于磷酸酯的键联基的实例是-O-PW〇Rk-〇-、-〇-、-5-卩5!?1〇-〇-、-5-?©1?1〇-5-、-«^51?1〇-5-。优选的方面是-〇-?©0!1-〇-、-⑻-〇-、-S-P⑼⑻-s-、-o-p⑸⑹-S-。优选的方面是-O-P⑼（0H-0-。此类候选者可使用类似于上揭那些的方法评估。[0440]iii.酸可裂解的键联基[0441]于另一方面中，可裂解的键联体是包含酸可裂解的键联基。酸可裂解的键联基是于酸性条件下裂解的键联基。于优选的方面中，酸可裂解的键联基是于PH位约6.5或更低如，约6.0、5.75、5.5、5.25、5.0、或更低）的酸性环境裂解，或借由诸如可作为通常的酸而作动的酶裂解。于细胞内，特定的低PH胞器如内体及溶酶体可向酸可裂解的键联基提供裂解环境。酸可裂解的键联基的实例是包括，但不限于，腙类、酯类、及氨基酸的酯类。酸可裂解的基团可具有通式-C=NN-X⑼0、或-OC⑼。当碳结合至酯烧氧基）的氧时，优选的方面是芳基、经取代的烷基、或第三烷基，如二甲基苯基或第三丁基。此类候选者可使用类似于上述的那些的方法评估。[0442]iv.基于酯的键联基[0443]于另一方面中，可裂解的键联体是包含基于酯的可裂解的键联基。基于酯的可裂解的键联基是借由细胞内的酶如酯酶及酰氨酶裂解。基于酯的可裂解的键联基的实例是包括，但不限于，伸烷基、伸烯基、及伸炔基的酯类。酯可裂解的键联基是具有通式-C⑼〇-或-OC0_。此类候选者可使用类似于上述的那些的方法评估。[0444]V.基于肽的可裂解基团[0445]于再一方面中，可裂解的键联体是包含基于肽的可裂解的键联基。基于肽的可裂解的键联基是借由细胞内的酶如肽酶及蛋白酶裂解。基于肽的可裂解的键联基是于氨基酸之间形成肽键以获得寡肽如，二肽、三肽等及多肽。基于肽的可裂解的基团并不包括酰氨基团-C⑼NH-。该酰氨基团可形成于任意伸烷基、伸烯基或伸炔基之间。肽键是特殊类型的酰胺键，其是形成于氨基酸之间以获得肽及蛋白质。该基于肽的可裂解的基团通常是限制为形成于氨基酸之间以获得肽的蛋白质的肽键（即，酰胺键），且并不包括整体酰胺官能基。基于肽的可裂解的键联基是具有通式-NHCHRAC⑼NHCHRBC⑼-，其中，RA与RB是两个相邻的氨基酸的R基团。此类候选者可使用类似于上述的那些的方法评估。[0446]于一方面中，本发明的iRNA是通过键联体接合至碳水化合物。本发明的组合物及方法的具有键联体的iRNA-碳水化合物接合物的非限制性实例是包括，但不限于，[0449]当X或Y的一者是寡核苷酸时，另一者是氢。[0450]于本发明的组合物及方法的某些方面中，配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个“GalNAc”（N-乙酰基半乳胺糖衍生物。[0451]于一方面中，本发明的dsRNA是接合至选自式XXXII至XXXV中任一者显示的结构所组成组的二价或三价分支链连接子：[0454]其中：[0455]于每次出现是独立表示0至20,以及，该重复单元可以是相同或不同；[0456]于每次出现是各自独立为不存在、C0、NH、0、S、0C⑼、NHC⑼、CH2、CH2NH或CH2O;[0457]于每次出现是各自独立为不存在、伸烷基、经取代的伸烷基，其中，一个或多个亚甲基可借由0、S、S0、S02、NRn、CR’）=CR〃）、C=C或C〇中的一个或多个中断或终止；[0458]!?'1^、1^、1^、1^、1^、1^、1^、1^于每次出现是各自独立为不存在、冊、0、3、〇12、或杂环基；[0459]及L5e是表示配体；S卩，于每次出现是各自独立为单糖（如GalNAc、二糖、三糖、四糖、寡糖、或多糖;且Ra是H或氨基酸侧链。三价接合GalNAc衍生物是特别可用于与用于抑制靶标基因的表达的RNAi剂合用，如那些具式XXXV者：[0461]其中，L5A、L5^L5G是表示单糖如GalNAc衍生物。[0462]适宜的接合GalNAc衍生物的二价及三价分支链连接子的实例是包括，但不限于，上文如式11，11、父1、父、及父111引述的结构。[0463]教示RNA接合物的代表性美国专利是包括，但不限于，第4，828，979号；第4，948，882号；第5,218,105号；第5,525,465号；第5,541,313号；第5,545,730号；第5,552,538号；第5,578,717号；第5,580,731号；第5,591,584号；第5,109,124号；第5,118,802号；第5，138,045号；第5,414,077号；第5,486,603号；第5,512,439号；第5,578,718号；第5,608,046号；第4,587,044号；第4,605,735号；第4,667,025号；第4,762,779号；第4,789,737号；第4，824,941号；第4,835,263号；第4,876,335号；第4,904,582号；第4,958,013号；第5,082,830号；第5,112,963号；第5,214,136号；第5,082,830号；第5,112,963号；第5,214,136号；第5，245，022号；第5，254，469号；第5，258，506号；第5，262，536号；第5，272，250号；第5，292，873号;第5,317,098号;第5,371,241号;第5,391,723号；第5,416,203号;第5,451,463号;第5，510,475号；第5,512,667号；第5,514,785号；第5,565,552号；第5,567,810号；第5,574,142号；第5，585，481号；第5，587，371号；第5，595，726号；第5，597，696号；第5，599，923号；第5，599,928及5,688,941号；第6,294,664号；第6,320,017号；第6,576,752号；第6,783,931号；第6,900,297号；第7,037,646号；第8，106,022号，其各自的整体内容是借由引用而并入本文。[0464]对于给定化合物的全部位置进行均匀修饰并非必需，事实上，超过一种前述修饰修饰可并入同一化合物中，或甚至iRNA内的同一核苷上。本发明还包括作为嵌合化合物的iRNA。[0465]于本发明的上下文中，“嵌合”iRNA化合物或“嵌合体”是iRNA化合物，优选是dsRNA，其是含有两个或更多个化学上截然不同的区域，每一个区域由至少一个单体单元作成，S卩，于dsRNA化合物的例中的核苷酸。此类iRNA典型是含有至少一个区域，其中，该RNA是经修饰以赋予该iRNA增加的对于核酸酶降解的抗性、增加的细胞摄取、和或增加的对于靶标核酸的亲和性。iRNA的额外区域可作为能裂解RNA:DNA或RNA:RNA杂交物的酶的底物。举例而言，RNaseH是细胞核酸内切酶，其是裂解RNA:DNA双螺旋的RNA链。因此，RNaseH的活化是导致RNA靶标的裂解，从而极大提升iRNA抑制基因表达的效率。所以，当使用嵌合dsRNA时，一般可使用较短的iRNA获得与杂交至相同靶标区域的硫磷酸酯脱氧dsRNA相当的结果。RNA靶标的裂解可借由凝胶电泳常规侦检的，且若需要，可与本领域中熟知的核酸杂交技术联合。[0466]于某些例子中，iRNA的RNA可借由非配体基团修饰。大量非配体分子已经接合至iRNA，以提升iRNA的活性、细胞分配或细胞摄取，且用于施行此类接合的过程是可于科技文献中获得。此类非配体部分已经包括脂质部分，如胆固醇（Kubo，T.etal.，Biochem.Biophys.Res.Comm.,2007,3651:54-61；LetsingeretaI.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1989,86:6553、月旦酉爱（ManoharanetaI.,Bioorg.Med·Chem.Lett·，1994，4:1053、硫酿如己基-S-三苯甲硫醇（Manoharanetal·，Ann.N.Y.Acad.Sci.,1992,660:306；Manoharanetal.,Bi〇〇rg.Med.Chem.Let.,1993,3:2765、硫代胆固醇（Oberhauseretal·,Nucl.AcidsRes.,1992,20:533、脂肪族链如十二碳二醇或十一烧基残基（Saison-Behmoarasetal·,EMBOJ.,1991,10:111;Kabanovetal·,FEBSLett.,1990,259:327;Svinarchuketal·,Biochimie,1993,75:49、磷脂质如二-十六烷基-外消旋甘油或1，2-二-0-十六烷基-外消旋甘油-3-H-磷酸三乙铵Manoharanetal.,TetrahedronLett1995,36:3651；Sheaetal.,Nucl.AcidsRes.,1990,18:3777、多胺或聚乙二醇链Manoharanetal.,NucleosidesNucleotides,1995,14:969、或金刚烧乙酸（Manoharanetal·,TetrahedronLett.,1995,36:3651、棕榈基部分Mishraetal·,Biochim·Biophys.Acta,1995,1264:229、或十八烧基胺或己基氨基-幾基-氧胆固醇部分Crookeetal·,J.Pharmacol.Exp.Ther.,1996,277:923。教不此类RNA接合物的制备的代表性美国专利已经列述如上。典型的接合策略是涉及，于该序列的一个或多个位置承载氨基连接子的RNA的合成。该氨基随后是与使用适宜的耦合剂或活化剂接合的分子反应。该接合反应可使用仍结合至固体支持的RNA或RNA于溶液相中的裂解后而施行。借由HPLC进行的RNA接合物的纯化典型是得到纯接合物。[0467]V.本发明的iRNA的递送[0468]本发明的iRNA至细胞如受试者如人类受试者（如，由此需要的受试者，如患有与HDV感染相关的疾病、病症或症状的受试者体内的细胞的递送可使用一些同途径达成。举例而言，可借由使细胞与本发明的iRNA与细胞于体外或体内接触而施行。体内递送亦可借由给药包含iRNA如dsRNA的组合物至受试者而直接施行。可替代地，体内递送可借由给药编码且引导该iRNA的表达的一种或多种载体而间接施行。此类备选方案是进一步讨论如下。[0469]通常，递送核酸分子（体外或体内）的任意方法可以是适于与本发明的iRNA合用参见，如，AkhtarS.andJulianRL.1992TrendsCell.Biol.25:139-144及第TO9402595号世界专利，其是借由引用而以其整体并入本文）。对于体内递送，为了递送iRNA分子而考虑的因素是包括，举例而言，所递送的分子的生物稳定性、非专一性效果的防止、及所递送的分子于靶标组织中的蓄积。iRNA的非专一性效果可借由局部给药而最小化，举例而言，借由直接注射或植入组织内或外用给药该制剂。局部给药至治疗部位是最大化该剂的局部浓度;限制该剂向全身组织的暴露，该暴露是可借由该剂而造成伤害或可降解该剂；以及，容许该iRNA分子以更低的总剂量给药。若干研究已经显示，当局部给药iRNA时，显示成功减量knockdown的基因产物。举例而言，于年龄相关的黄斑点退化的实验模型中，借由玻璃体内注射而对马来猴进行的VEGFdsRNA眼内递送（Tolentino，MJ.，etal2004Retina24:132-138以及借由视网膜下注射对小鼠进行的VEGFdsRNA眼内递送Reich,SJ.，etal2003M〇1.Vis.9:210-216两者皆显示防止新血管生成。此外，于小鼠内进行的dsRNA的直接肿瘤内注射减小了肿瘤体积Pille，J.，etal2005Mol.Ther.11:267-274，且可延长有肿瘤的小鼠的存活寿命Kim，WJ.，etal2006Mol.Ther.l4:343-350;Li，S.，etal2007Mol.Ther.15:515-523ANA干扰亦显示，借由直接注射而成功局部递送至CNS0〇1'11，6.，6七1.2004核酸832:649;丁11，？!1.，6七12005661161']161'.12:59-66;Makimura,H.,etal2002BMCNeurosci.3:18；Shishkina,GT.,etal2004Neuroscience129:521-528；Thakker,ER.,etal2004Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.101:17270-17275;Akaneya,Y.,etal2005J.Neurophysiol.93:594-602，且借由鼻腔内给药而成功递送至肺部（Howard，ΚΑ·，etal2006Mol·Ther·14:476-484;Zhang，X·，etal2004J.Biol.Chem.279:10677-10684;Bitko，V.，etal2005Nat.Med.il:50-55。对于全身性给药iRNA来治疗疾病，该RNA可以是经修饰或使用药物递送系统而递送;两种方法皆作动以防止体内的核酸内切酶及核酸外切酶对于dsRNA的快速降解。该RNA或药学载剂的修饰亦可使该iRNA组合物以靶标组织为靶向，并防止非所希望的脱靶效应。iRNA分子可借由化学接合至亲脂性基团如胆固醇而修饰，以提升细胞摄取并防止其降解。举例而言，定向为朝向接合至亲脂性胆固醇部分的ApoB的iRNA是经全身性注射入小鼠体内，并造成对于肝脏及空肠两者中apoBmRNA的减量（Soutschek,J.，etal2004Nature432:173-178dRNA至适体的接合已经显示，其在前列腺癌的小鼠模型内抑制肿瘤生长并介导肿瘤的退缩McNamaraJO.，etal2006Nat.Biotechnol.24:1005-1015。于一备选方面中，该iRNA可使用药物递送系统如纳米粒子、树枝状聚合物、聚合物、脂质体或阳离子递送系统进行递送。带正电的阳离子递送系统是促进iRNA分子带负电）的接着，亦提升于带负电的细胞膜处的相互反应以容许细胞对于iRNA的有效摄取。阳离子脂质、树枝状聚合物、或聚合物可键结至iRNA或经诱导以形成封装iRNA的泡囊或微胞参见，如，KimSH.，etal2008JournalofControlledRelease1292:107-116。当进行全身性给药时，泡囊或微胞的形成进一步防止iRNA的降解。作成并给药阳离子iRNA错合物的方法是处于本领域普通技术人员的能力范围内（参见，如，Sorensen,DR.，etal2003J.Mol.Biol327:761-766;Verma，UN.，etal2003Clin.CancerRes.9:1291-1300；Arnold,ASetal2007J.Hypertens.25:197-205,其是借由引用而整体并入本文）。可用于iRNA的全身性递送的药物递送系统的一些非限制性实例是包括DOTAP上述Sorensen，DR.，etal2003;上述Verma，UN·，etal2003、01igofectamine“固体核酸脂质粒子”Zimmermann，TS·，etal2006Nature441:111-114、心磷脂（Chien，PY.，etal2005CancerGeneTher.12:32卜328;Pal，A·，etal2005IntJ.0ncol.26:1087-1091、聚乙亚胺（BonnetME·,etal2008Pharm.Res.AugI6Epubaheadofprint；Aigner,A.2006J·Biomed·Biotechnol·71659、Arg-Gly-AspRGD肽（Liu，S·2006Mol·Pharm·3:472-487、及聚酰氨基胺（Tomalia，DA.，etal2007Biochem.Soc.Trans.35:61_67;Yoo，H·，etal1999Pharm.Res.16:1799-1804。于某些方面中，iRNA是与环糊精形成错合物而用于全身性给药。iRNA与环糊精的给药方法及药物组合物可于第7，427，605号美国专利中找到，该专利是借由引用方式而整体并入本文。[0470]A.编码本发明的iRNA的载体[0471]以HDV基因为靶向的iRNA可从插入DNA或RNA载体中的转录单位表达（参见，如，Couture，A，etal.，TIG.1996，12:5-10;Skillern，A.，etal·，第WO0022113号国际PCT申请案；Conrad，第WO0022114号国际PCT申请案；以及，Conrad，第6，054，299号美国专利）。取决于所使用的具体构建及靶标组织或细胞类型表达可以是暂时性几小时至几周的级别或持续性几周至几个月或更长）。此类转基因可作为直链构建、圆形质体或病毒载体而引入，该病毒载体可以是整合型或非整合型载体。该转基因亦可经构建以使其作为染色体外质体而遗传Gassmann，etal·,Proc.Natl.Acad.Sci.USA199592:1292。[0472]iRNA的独立链或两链可从位于表达载体上的启动子转录。若两链单独的链是经表达以产生诸如dsRNA，可将两种单独的表达载体共同引入（如，借由转染或感染靶标细胞中。可替代地，dsRNA的各独立链可借由两种皆位于相同表达质体上的启动子而转录。于一方面中，dsRNA是表达为借由键联体多核苷酸序列结合在一起的逆序重复多核苷酸，故该dsRNA是具有茎杆及圈状结构。[0473]iRNA表达载体通常是DNA质体或病毒载体。可与真核细胞相容的表达载体，优选是那些与脊髓细胞兼容者，可用以制造用于表达本文披露的iRNA的重组构建。真核细胞表达载体是本领域中熟知者，且可自大量商业来源获得。典型地，此类载体是提供为含有用于插入所欲核酸片段的便利限制位点。iRNA表达载体的递送可以是全身性，如借由静脉给药或肌肉给药、借由给药至来自患者的外植靶标细胞并随之再次引入该患者体内、或借由容许引入所希望的靶标细胞的任意其他手段。[0474]iRNA表达质体可作为与阳离子脂质载剂如，Oligofectamine或非阳离子脂质是载剂如，Transit-TKOTM的错合物而转染入靶标细胞。本发明亦虑及多种脂质转染，这些转染是用于在一周或更长期间内以靶标RNA的不同区域为靶向的iRNA介导的减量。可使用多种熟知方法来监控载体至宿主细胞中的成功引入。举例而言，暂时性转染可使用报导子reporter如荧光标记物如绿色荧光蛋白（GFP发出信号报告。离体细胞的适宜转染可使用标记物而确保的，这些标记物是向经转染的细胞提供对于具体环境因素如，抗生素及药物的抗性如对潮霉素B的抗性。[0475]可与本文中披露的方法及组合物合用的病毒载体系统是包括，但不限于，（a腺病毒载体；⑹逆转录病毒载体，其包括，但不限于，慢病毒载体、莫罗尼鼠白血病病毒载体等；c腺伴随病毒载体；⑹单纯疱瘆病毒载体；（eSV40载体；（f多瘤病毒载体；（g乳突瘤病毒载体；⑹小核糖核酸病毒载体；（i痘病毒载体，如天花如牛痘病毒载体或鸟类痘病毒如金丝雀痘病毒或鸡痘病毒；以及j依赖辅助病毒的腺病毒载体或裸腺病毒载体。复制缺陷性病毒亦可以是优选的。不同载体将被并入或不并入该细胞的基因组。若需要，该构建可包括用于转染的病毒序列。可替代地，该构建可并入能进行附加型复制的载体内，如EPV载体及EBV载体。用于iRNA的重组表达的构建通常会需要调控组件如启动子、增强子等，以确保iRNA于靶标细胞内的表达。考虑载体及构建的其他方面是进一步披露于下。[0476]可用于递送iRNA的载体将会包括足以满足在所希望的靶标细胞或组织中表达该iRNA的调控组件（启动子、增强子等）。这些调控组件可选择为提供组成型表达或经调控诱导型表达。[0477]该iRNA的表达可精确调控的，举例而言，借由使用对于某些生理学调控物如循环葡萄糖含量或激素Dochertyetal.，1994，FASEBJ.8:20-24敏感的诱导型调控序列。此类适用于控制dsRNA于细胞或哺乳动物体内的表达的诱导型表达系统是包括，举例而言，借由蜕皮激素、雌激素、黄体酮、四环素、二聚作用的化学诱导剂、及异丙基-β-Dl-硫代吡喃半乳糖苷IPTG的调控。本领域普通技术人员将能基于该iRNA转基因的倾向用途而选择适宜的调控启动子序列。[0478]可使用含有编码iRNA的核酸序列的病毒载体。举例而言，可使用逆转录病毒载体参见，Milleretal.，Meth.Enzymol.217:581-5991993。此类逆转录病毒载体是含有正确封装该病毒基因组并将其整合至宿主细胞DNA内所必需的组分。该编码iRNA的核酸序列是于一个或多个载体内选殖，这促进该核酸至患者体内的递送。关于逆转录病毒载体的更详细披露可于诸如Boesenetal.,Biotherapy6:291-3021994中找到，该文献是披露使用逆转录病毒载体来递送mdrl基因至造血干细胞，以使该肝细胞更能对抗化疗。其他例示性说明逆转录病毒载体于基因疗法中用途的参考文献是：Clowesetal.，J.Clin.Invest.93:644-6511994；Kiemetal.,Bl〇〇d83:1467-14731994；SalmonsandGunzberg,HumanGeneTherapy4:129-1411993;以及GrossmanandWilson,Curr.Opin.inGeneticsandDevel.3:110_1141993。虑及可用的慢病毒载体是包括，举例而言，于第6，143,520号、第5,665,557号、及第5,981，276号美国专利中披露的!11¥是载体，这些专利是借由引用方式而并入本文。[0479]亦预期腺病毒用于递送本发明的iRNA。腺病毒是尤其具有吸引力的运载剂，如用于递送基因至呼吸道上皮。腺病毒天然地感染呼吸道上皮，并于该处造成轻微疾病。腺病毒是递送系统的其他靶标是肝脏、中枢神经系统、内皮细胞、及肌肉。腺病毒于能感染非分化细胞方面具有优势。KozarskyandWiIson,CurrentOpinioninGeneticsandDevelopment3:499-5031993是一篇腺病毒是基因疗法的综述。Boutetal·,HumanGeneTherapy5:3-101994说明腺病毒载体将基因转移至恒河猴上皮细胞的用途。腺病毒于基因疗法中用途的其他例子可于Rosenfeldetal.,Science252:431-4341991;Rosenfeldetal.,Cell68:143-1551992；Mastrangelietal.,J.Clin.Invest.91:225-2341993;第W09412649号PCT公开案；及Wang,etal·,GeneTherapy2:775-7831995中找到。用于表达本发明提出的iRNA的适当AV载体、构建该重组AV载体的方法、以及递送该载体至靶标细胞内的方法，是披露于XiaHetal.2002,Nat.Biotech.20:1006-1010中。[0480]腺伴随病毒（AAV载体亦可用以递送本发明的iRNAWalshetal.，Proc·Soc·Exp·Biol.MecL204:289-3001993;第5，436，146号美国专利）。于一方面中，该iRNA可从具有诸如U6或HlRNA启动子或巨细胞病毒CMV启动子的重组AAV载体表达为两链分离且互补的单链RNA分子。适用于表达本发明提出的dsRNA的AAV载体、构建该重组AV载体的方法、以及递送该载体至革巴标细胞内的方法是披露于SamulskiRetal.1987，J.Virol.61:3096-3101；FisherKJetal.1996,J.Virol,70:520-532；SamulskiRetal.1989，J.Virol.63:3822-3826;第5,252,479号美国专利;第5,139,941号美国专利;第TO9413788号国际专利申请案；及第WO9324641号国际专利申请案，这些文献的整体披露是借由引用而并入本文。[0481]适用于递送本发明的iRNA的另一病毒载体是痘病毒如牛痘病毒，例如致弱疫苗如经修饰的痘病毒安卡拉株ModifiedVirusAnkaraMVA或NYVAC，鸟类痘病毒如鸡痘病毒或金丝雀痘病毒的载体。[0482]病毒载体的趋向性可借由以来自其他病毒的包膜蛋白或其他表面抗原假型化该载体、或借由如适宜者取代不同的病毒壳蛋白而修饰。举例而言，慢病毒载体可使用来自水泡型口炎病毒VSV、狂犬病病毒、埃博拉病毒Ebola、摩卡拉病毒Mokola等的表面蛋白予以假型化。可借由操纵AAV载体以表达不同的衣壳蛋白血清型，而将该载体作成以不同细胞为靶标;参见，如，RabinowitzJEetal.2002JVirol76:791-801，其整体披露是借由引用而并入本文。[0483]载体的药学制剂可包括处于适宜稀释剂内的载体，或可包括缓释基质，且该基因递送运载剂是包埋于该基质中。可替代地，若该完全基因递送载体可自重组细胞如逆转录病毒载体完整无缺地产生，则该药学制剂可包括一种或多种产生该基因递送系统的细胞。[0484]VI.本发明的药物组合物[0485]本发明还包括包含本发明的iRNA的药物组合物及配制品。于一方面中，本文所提供者是含有如本文披露的的iRNA以及药学可接受的载剂的药物组合物。该含有iRNA的药物组合物是有用于治疗与HDV基因的表达或活性相关的疾病或病症。此类药物组合物是基于递送模式而配制。一个实例是配制为用于经由非肠道递送如借由皮下（SC、肌肉内（IM、或静脉IV递送的全身性给药的组合物。另一实例是配制为借由输液入脑如借由连续栗输液而直接递送至脑实质的组合物。本发明的药物组合物可以足以抑制HDV基因表达的剂量给药。[0486]于一方面中，本发明iRNA剂是作为体重为基准的剂量而给药至受试者。“体重为基准的剂量”（如以毫克mg公斤kg计的剂量是iRNA剂的剂量，其将会依据受试者体重而改变。于另一方面中，iRNA剂是作为固定剂量而给药至受试者。“固定剂量”（如以毫克mg计的剂量是意指，一剂量的iRNA剂是用于全部受试者，而无需虑及任何有关于受试者的具体因素如体重。于一特别方面中，固定剂量的本发明的iRNA剂是以预先确定的体重或年龄为基准。[0487]通常，本发明的iRNA的适当剂量将是每公斤接受者体重每天约0.001至约200.0毫克的范围，通常是每公斤体重每天约1至50毫克。举例而言，该dsRNA可以每单剂量约0.01mgkg、约0.05mgkg、约0.5mgkg、约lmgkg、约1.5mgkg、约2mgkg、约3mgkg、约1Omgkg、约20mgkg、约30mgkg、约40mgkg、或约50mgkg给药。[0488]举例而言，该dsRNA可以约0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、1·1、1·2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5·1、5·2、5·3、5·4、5·5、5·6、5·7、5·8、5·9、6、6·1、6·2、6·3、6·4、6·5、6·6、6·7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、或约1〇11^1^的剂量给药。处于限定值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0489]于另一方面中，该dsRNA是以约0.1至约50mgkg、约0.25至约50mgkg、约0.5至约50mgkg、约0·75至约50mgkg、约1至约50mgkg、约1·5至约50mgkg、约2至约50mgkg、约2·5至约50mgkg、约3至约50mgkg、约3·5至约50mgkg、约4至约50mgkg、约4·5至约50mgkg、约5至约50mgkg、约7·5至约50mgkg、约10至约50mgkg、约15至约50mgkg、约20至约50mgkg、约20至约50mgkg、约25至约50mgkg、约25至约50mgkg、约30至约50mgkg、约35至约50mgkg、约40至约50mgkg、约45至约50mgkg、约0·1至约45mgkg、约0·25至约45mgkg、约0·5至约45mgkg、约0·75至约45mgkg、约1至约45mgkg、约1·5至约45mgkg、约2至约45mgkg、约2.5至约45mgkg、约3至约45mgkg、约3·5至约45mgkg、约4至约45mgkg、约4.5至约45mgkg、约5至约45mgkg、约7.5至约45mgkg、约10至约45mgkg、约15至约45mgkg、约20至约45mgkg、约20至约45mgkg、约25至约45mgkg、约25至约45mgkg、约30至约45mgkg、约35至约45mgkg、约40至约45mgkg、约0·1至约40mgkg、约0·25至约40mgkg、约0·5至约40mgkg、约0.75至约40mgkg、约1至约40mgkg、约1.5至约40mgkg、约2至约40mgkg、约2·5至约40mgkg、约3至约40mgkg、约3·5至约40mgkg、约4至约40mgkg、约4·5至约40mgkg、约5至约40mgkg、约7·5至约40mgkg、约10至约40mgkg、约15至约40mgkg、约20至约40mgkg、约20至约40mgkg、约25至约40mgkg、约25至约40mgkg、约30至约40mgkg、约35至约40mgkg、约0·1至约30mgkg、约0·25至约30mgkg、约0·5至约30mgkg、约0·75至约30mgkg、约1至约30mgkg、约1.5至约30mgkg、约2至约30mgkg、约2.5至约30mgkg、约3至约30mgkg、约3.5至约30mgkg、约4至约30mgkg、约4.5至约30mgkg、约5至约30mgkg、约7·5至约30mgkg、约10至约30mgkg、约15至约30mgkg、约20至约30mgkg、约20至约30mgkg、约25至约30mgkg、约0·1至约20mgkg、约0.25至约20mgkg、约0.5至约20mgkg、约0.75至约20mgkg、约1至约20mgkg、约1.5至约20mgkg、约2至约20mgkg、约2.5至约20mgkg、约3至约20mgkg、约3.5至约20mgkg、约4至约20mgkg、约4.5至约20mgkg、约5至约20mgkg、约7.5至约20mgkg、约10至约20mgkg、或约15至约20mgkg的剂量给药处于所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0490]举例而言，该dsRNA可以约0·01、0·02、0·03、0·04、0·05、0·06、0·07、0·08、0·09、0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5·1、5·2、5·3、5·4、5·5、5·6、5·7、5·8、5·9、6、6·1、6·2、6·3、6·4、6·5、6·6、6·7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9·3、9·4、9·5、9·6、9·7、9·8、9·9、或约10mgkg的剂量给药。处于限定值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0491]于另一方面中，该dsRNA是以约0.5至约50mgkg、约0.75至约50mgkg、约1至约50mgkg、约1.5至约50mgkg、约2至约50mgkg、约2.5至约50mgkg、约3至约50mgkg、约3.5至约50mgkg、约4至约50mgkg、约4.5至约50mgkg、约5至约50mgkg、约7.5至约50mgkg、约10至约50mgkg、约15至约50mgkg、约20至约50mgkg、约20至约50mgkg、约25至约50mgkg、约25至约50mgkg、约30至约50mgkg、约35至约50mgkg、约40至约50mgkg、约45至约50mgkg、约0·5至约45mgkg、约0.75至约45mgkg、约1至约45mgkg、约1·5至约45mgkg、约2至约45mgkg、约2·5至约45mgkg、约3至约45mgkg、约3·5至约45mgkg、约4至约45mgkg、约4·5至约45mgkg、约5至约45mgkg、约7·5至约45mgkg、约10至约45mgkg、约15至约45mgkg、约20至约45mgkg、约20至约45mgkg、约25至约45mgkg、约25至约45mgkg、约30至约45mgkg、约35至约45mgkg、约40至约45mgkg、约0.5至约40mgkg、约0.75至约40mgkg、约1至约40mgkg、约1·5至约40mgkg、约2至约40mgkg、约2.5至约40mgkg、约3至约40mgkg、约3.5至约40mgkg、约4至约40mgkg、约4.5至约40mgkg、约5至约40mgkg、约7·5至约40mgkg、约10至约40mgkg、约15至约40mgkg、约20至约40mgkg、约20至约40mgkg、约25至约40mgkg、约25至约40mgkg、约30至约40mgkg、约35至约40mgkg、约0·5至约30mgkg、约0·75至约30mgkg、约1至约30mgkg、约1.5至约30mgkg、约2至约30mgkg、约2·5至约30mgkg、约3至约30mgkg、约3·5至约30mgkg、约4至约30mgkg、约4·5至约30mgkg、约5至约30mgkg、约7·5至约30mgkg、约10至约30mgkg、约15至约30mgkg、约20至约30mgkg、约20至约30mgkg、约25至约30mgkg、约0·5至约20mgkg、约0·75至约20mgkg、约1至约20mgkg、约1·5至约20mgkg、约2至约20mgkg、约2·5至约20mgkg、约3至约20mgkg、约3·5至约20mgkg、约4至约20mgkg、约4·5至约20mgkg、约5至约20mgkg、约7·5至约20mgkg、约10至约20mgkg，或约15至约20mgkg的剂量给药于一方面中，该dsRNA是以约10mgkg至约30mgkg的剂量给药。处于所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0492]举例而言，可对受试者诸如经皮下、经肌肉或经静脉给药单一治疗量的iRNA，该治疗量是如约0·1、0·125、0·15、0·175、0·2、0·225、0·25、0·275、0·3、0·325、0·35、0·375、0·4、0·425、0·45、0·475、0·5、0·525、0·55、0·575、0·6、0·625、0·65、0·675、0·7、0·725、0·75、0·775、0·8、0·825、0·85、0·875、0·9、0·925、0·95、0·975、1、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5·1、5·2、5·3、5·4、5·5、5·6、5·7、5·8、5·9、6、6·1、6·2、6·3、6·4、6·5、6·6、6·7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9·3、9·4、9·5、9·6、9·7、9·8、9·9、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18·5、19、19·5、20、20·5、21、21·5、22、22·5、23、23·5、24、24·5、25、25·5、26、26·5、27、27·5、28、28·5、29、29·5、30、31、32、33、34、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或约5〇11^1^。处于所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0493]于某些方面中，是经诸如皮下、肌肉内或静脉将多剂量的治疗量的iRNA给药至受试者，该剂量是如约〇·1、〇·125、0·15、0·175、0·2、0·225、0·25、0·275、0·3、0·325、0·35、45、46、47、48、49、或约5〇11^1^的剂量。多剂量策略可包括每天给药治疗量的11«^，如给药两天、三天、四天、五天、六天、七天或更长时间。[0494]于其他方面中，是经由诸如皮下、肌肉内或静脉将重复剂量的治疗量的iRNA给药至受试者，如约0·1、0·125、0·15、0·175、0·2、0·225、0·25、0·275、0·3、0·325、0·35、0·375、46、47、48、49、或约5〇11^1^的剂量。重复剂量的策略可包括规律性给药治疗量的11?熟，如每两天一次、每三天一次、每四天一次、每周两次、每周一次、每两周一次、或每月一次。[0495]于某些方面中，举例而言，当本发明的组合物包含本文所披露的dsRNA以及脂质时，可对受试者给药治疗量的iRNA，如约0·01mgkg至约5mgkg、约0·01mgkg至约10mgkg、约0·05mgkg至约5mgkg、约0·05mgkg至约10mgkg、约0·lmgkg至约5mgkg、约0·lmgkg至约10mgkg、约0·2mgkg至约5mgkg、约0·2mgkg至约10mgkg、约0·3mgkg至约5mgkg、约0·3mgkg至约10mgkg、约0·4mgkg至约5mgkg、约0·4mgkg至约10mgkg、约0·5mgkg至约5mgkg、约0·5mgkg至约10mgkg、约lmgkg至约5mgkg、约lmgkg至约10mgkg、约1.5mgkg至约5mgkg、约1.5mgkg至约10mgkg、约2mgkg至约2.5mgkg、约2mgkg至约10mgkg、约3mgkg至约5mgkg、约3mgkg至约10mgkg、约3·5mgkg至约5mgkg、约4mgkg至约5mgkg、约4.5mgkg至约5mgkg、约4mgkg至约10mgkg、约4·5mgkg至约10mgkg、约5mgkg至约10mgkg、约5·5mgkg至约10mgkg、约6mgkg至约10mgkg、约6·5mgkg至约10mgkg、约7mgkg至约10mgkg、约7.5mgkg至约10mgkg、约8mgkg至约10mgkg、约8.5mgkg至约10mgkg、约9mgkg至约10mgkg、或约9.5mgkg至约lOmgkgc^处于所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0496]举例而言，该dsRNA可以约0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5·1、5·2、5·3、5·4、5·5、5·6、5·7、5·8、5·9、6、6·1、6·2、6·3、6·4、6·5、6·6、6·7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、或约1〇11^1^的剂量给药。处于所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0497]于本发明的某些方面中，举例而言，当双链RNAi剂包括修饰如，一个或多个位于三个连续核苷酸上的三个相同修饰的基序motif且该包括位于该剂的裂解位点或邻近该裂解位点处的一个此类基序、六个硫磷酸酯键联、及配体时，该剂是以约0.01至约〇.5mgkg、约0.01至约0.4mgkg、约0.01至约0.3mgkg、约0.01至约0.2mgkg、约0.01至约0.Imgkg、约0·01mgkg至约0·09mgkg、约0·01mgkg至约0·08mgkg、约0·01mgkg至约0·07mgkg、约0·01mgkg至约0·06mgkg、约0·01mgkg至约0·05mgkg、约0·02至约0·5mgkg、约0·02至约0·4mgkg、约0·02至约0·3mgkg、约0·02至约0·2mgkg、约0·02至约0·lmgkg、约0·02mgkg至约0·09mgkg、约0·02mgkg至约0·08mgkg、约0·02mgkg至约0·07mgkg、约0·02mgkg至约0·06mgkg、约0·02mgkg至约0·05mgkg、约0·03至约0·5mgkg、约0·03至约0.411^1^、约0.03至约0.311^1^、约0.03至约0.211^1^、约0.03至约0.111^1^、约0.0311^1^至约0·09mgkg、约0·03mgkg至约0·08mgkg、约0·03mgkg至约0·07mgkg、约0·03mgkg至约0.06mgkg、约0.03mgkg至约0.05mgkg、约0.04至约0.5mgkg、约0.04至约0.4mgkg、约0·04至约0·3mgkg、约0·04至约0·2mgkg、约0·04至约0·lmgkg、约0·04mgkg至约0·09mgkg、约0·04mgkg至约0·08mgkg、约0·04mgkg至约0·07mgkg、约0·04mgkg至约0·06mgkg、约0.05至约0.5mgkg、约0.05至约0.4mgkg、约0.05至约0.3mgkg、约0.05至约0.2mg1^、约0.05至约0.111^1^、约0.0511^1^至约0.0911^1^、约0.0511^1^至约0.0811^1^、或约0.05mgkg至约0.07mgkg的剂量给药。处于前述所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分，如，该RNAi剂可以约0.015mgkg至约0.45mgkg的剂量给药至受试者D[0498]举例而言，该RNAi剂，如药物组合物中的RNAi剂，可以约0.01mgkg、0.0125mgkg、0·015mgkg、0·0175mgkg、0·02mgkg、0·0225mgkg、0·025mgkg、0·0275mgkg、0·03mgkg、0·0325mgkg、0·035mgkg、0·0375mgkg、0·04mgkg、0·0425mgkg、0·045mgkg、0.0475mgkg、0.05mgkg、0.0525mgkg、0.055mgkg、0.0575mgkg、0.06mgkg、0.0625mgkg、0·065mgkg、0·0675mgkg、0·07mgkg、0·0725mgkg、0·075mgkg、0·0775mgkg、0·08mgkg、0·0825mgkg、0·085mgkg、0·0875mgkg、0·09mgkg、0·0925mgkg、0·095mgkg、0·0975mgkg、0·lmgkg、0·125mgkg、0·15mgkg、0·175mgkg、0·2mgkg、0·225mgkg、0·25mgkg、0·275mgkg、0·3mgkg、0·325mgkg、0·35mgkg、0·375mgkg、0·4mgkg、0.425mgkg、0.45mgkg、0.475mgkg、或约0.5mgkg的剂量给药D处于前述所载值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0499]于某些方面中，该RNAi剂是以界于约IOOmg至约900mg之间的固定剂量给药，如，界于约IOOmg至约850mg之间、界于约IOOmg至约800mg之间、界于约IOOmg至约750mg之间、界于约IOOmg至约700mg之间、界于约IOOmg至约650mg之间、界于约IOOmg至约600mg之间、界于约IOOmg至约550mg之间、界于约IOOmg至约500mg之间、界于约200mg至约850mg之间、界于约200mg至约800mg之间、界于约200mg至约750mg之间、界于约200mg至约700mg之间、界于约200mg至约650mg之间、界于约200mg至约600mg之间、界于约200mg至约550mg之间、界于约200mg至约500mg之间、界于约300mg至约850mg之间、界于约300mg至约800mg之间、界于约300mg至约750mg之间、界于约300mg至约700mg之间、界于约300mg至约650mg之间、界于约300mg至约600mg之间、界于约300mg至约550mg之间、界于约300mg至约500mg之间、界于约400mg至约850mg之间、界于约400mg至约800mg之间、界于约400mg至约750mg之间、界于约400mg至约700mg之间、界于约400mg至约650mg之间、界于约400mg至约600mg之间、界于约400mg至约550mg、或界于约400mg至约500mg之间。[0500]于某些方面中，该RNAi剂是以约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、200mg、约225mg、约250mg、约275mg、约300mg、约325mg、约350mg、约375mg、约400mg、约425mg、约450mg、约475mg、约500mg、约525mg、约550mg、约575mg、约600mg、约625mg、约650mg、约675mg、约700mg、约725mg、约750mg、约775mg、约800mg、约825mg、约850mg、约875mg、或约900mg的固定剂量给药。[0501]该药物组合物可借由静脉输液一段时间而给药，如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、及21、22、23、24、或约25分钟的时间段。该给药可诸如规律性重复，如每周一次、隔周一次（即，每两周一次），给药一个月、两个月、三个月、四个月或更长时间。于初始治疗策略后，给药治疗频次可减少。举例而言，于每周或每两周给药一次给药三个月后，可每月重复一次给药，持续时间为六个月或一年或更长时间。[0502]该药物组合物可每天给药一次，或该iRNA可作为两个、三个或更多个亚剂量以适宜的时间间隔贯穿全天给药，甚或使用连续输液或通过控释配制品递送。于该例中，每一亚剂量中含有的iRNA必须相应较小，以达成日总剂量。该剂量单位亦可复配以在几天内递送，如使用在几天时间段内提供iRNA的持续释放的传统持续释放配制品。持续释放配制品是本领域中周知的，且特别有用于特定位点的剂的递送，如可与本发明的剂合用。于此方面中，该剂量单位是含有相应的多重日剂量。[0503]于其他方面中，单剂的药物组合物可以是长效，故后续量给药的日间隔是不超过3、4、或5次，或周间隔是不超过1、2、3、或4次。于本发明的某些方面中，单剂的本发明的药物组合物是每周给药一次。于本发明的其他方面中，单剂的本发明的药物组合物是每两个月给药。域本发明的某些方面中，单剂的本发明的药物组合物是每月给药一次、每两个月给药一次或每季度即，每三个月）给药一次。[0504]技术人士将知悉，某些因素可影响有效治疗受试者所需的剂量及时间点，这些因素是包括，但不限于，疾病或病症的严重性、先前的治疗、受试者的一般健康状况和或年龄、以及其他存在的疾病。此外，使用治疗有效量的组合物治疗受试者是包括单一治疗或一系列治疗。本发明所涵盖的受试者iRNA的有效剂量及体内半衰期的评估可使用传统方法学或基于使用适宜动物模型的体内测试作出，如本文中他处所披露的。[0505]本发明的药物组合物可依据所希望的是否为局部或全身性治疗以及待治疗的面积而以多种途径给药。给药可以是外用给药如，借由透皮贴剂）、肺部给药如借由粉末或气溶胶的吸入或吹入包括借由喷雾器给药、气管内、鼻腔内、表皮及透皮给药、口服或肠胃外给药。肠胃外给药是包括静脉、动脉、皮下、腹膜或肌肉注射或输液;表皮下给药，如经由植入装置;或颅内给药，如借由薄壁组织、鞘内或心室内给药。[0506]该iRNA可经以特定组织如肝脏如，肝脏的肝细胞为靶标的模式递送。[0507]外用给药的药物组合物及配制品可包括透皮贴剂、软膏、洗剂、乳油、凝胶、滴剂、悬浮剂、喷雾剂、液体及粉剂。传统药学载剂、水性、粉末或油性基剂、增稠剂等可以是必需或所希望的。经涂覆的保险套、手套等亦可以是有用。适当的外用配制品是包括那些下述者，其中本发明提出的iRNA是与外用递送剂如脂质、脂质体、脂肪酸、脂肪酸酯、类固醇、螯合剂及表面活性剂混合。适当的脂质及脂质体是包括中性（如，二油酰基磷脂酰基乙醇胺DOPE、二肉豆蔻酰基磷脂酰基胆碱DMPC、二硬脂酰基磷脂酰基胆碱）、阴离子性（如，二肉豆蔻酰基磷脂酰基甘油DMPG及阳离子性如，二油酰基四甲基氨基丙基DOTAP及二油酰基磷脂酰基乙醇胺DOTMA。本发明提出的iRNA可封装于脂质体内或可与脂质体特别是阳离子性脂质体形成错合物。可替代地，iRNA可与脂质特别是阳离子性脂质错合。适当的脂肪酸及酯是包括，但不限于，花生四烯酸、油酸、花生酸、月桂酸、辛酸、癸酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、亚麻油酸、苏子油酸、二癸酸酯、三癸酸酯、单油酸甘油酯、二月桂酸甘油酯、甘油1-单癸酸酯、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、酰基肉碱、或C1-So烷基酯（如，肉豆蔻酸异丙酯（IPM、单甘油酯、二甘油酯或其药学可接受的盐）。局部用配制品是详细披露于第6，747,014号美国专利中，该专利是借由引用方式而并入本文。[0508]A.包含膜性分子集合体的iRNA配制品[0509]用于本发明的组合物及方法的iRNA可配制为用于以膜性分子集合体如脂质体或微胞递送。本文中，术语“脂质体”是指称由两亲性脂质组成的运载剂，这些脂质是排列为至少一个双层，如一个双层或复数个双层。脂质体是包括单层及多层运载剂，其是具有自亲脂性材质及水性内部形成的膜。该水性部份是含有iRNA组合物。该亲脂性材质是将该水性内部与水性外部分离开来，其典型是不包括该iRNA组合物，但于某些实例中可包含后者。脂质体是有用于将活性成分转移并递送至作动位点。因为脂质性膜是于结构上类似生物膜，当施加脂质体至组织时，该脂质性双层与细胞膜的双层融合。随着该脂质体与细胞的合并的进行，包括该iRNA的内部水性内容物被递送至细胞，于该处，该iRNA可专一性接着至靶标RNA并可介导iRNA。于某些例子中，这些脂质体亦为专一性靶向，如，将该iRNA引导至特定细胞类型。[0510]含有iRNA剂的脂质体可借由多种方法制备的。于一实例中，脂质体的脂质组分是溶解于洗涤剂中，使该脂质组分形成微胞。举例而言，该脂质组分可以是两亲性阳离子脂质或脂质接合物。该洗涤剂可具有高临界微胞浓度且可以是非离子性。例示性洗涤剂是包括胆酸盐、CHAPS、辛基葡萄糖苷、脱氧胆酸盐、及月桂酰基肌氨酸。随后，该iRNA剂制剂是加入包括该脂质组分的微胞中。该脂质上的阳离子基团是与该iRNA剂相互作用，并缩合于iRNA剂周围以形成脂质体。缩合之后，借由诸如渗析而移除该洗涤剂以获得iRNA剂的脂质性制剂。[0511]若需要，辅助缩合的载剂化合物是于该缩合反应期间借由诸如受控添加而加入。举例而言，该载剂化合物可以是除核酸之外的聚合物如，精四胺或精三胺）。亦可调节pH以助缩合。[0512]制造合并有多核苷酸阳离子性脂质错合物作为递送运载剂的结构组分的适当多核苷酸运载剂的方法是进一步披露于第WO9637194号世界专利中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。脂质体的形成亦可包括披露于Feigner,P.L.etal.，Proc.Natl.Acad.Sci·,USA8:7413-7417,1987;第4,897,355号美国专利；第5,171,678号美国专利；Bangham，etal.M.Mol.Biol.23:238,1965；01son,etal·Biochim·Biophys.Acta557:9,1979；Szoka,etal.Proc.Natl.Acad.Sci.75:4194,I978;Mayhew,etal.Biochim.Biophys.Acta775:I69,I984;Kim,etal·Biochim·Biophys.Acta728:339,1983;以及，Fukunaga,etaI.Endocrinol.115:757,1984中的例示性方法的一个或多个方面。一般用于制备适合作为递送运载剂的尺寸的脂质聚集体的技术是包括音波震荡及冻-融加上押出（参见，如，Mayer，etal·Biochim.Biophys.Acta858:161，1986。当所希望的是一致性的小（50to200nm且相对均勾的聚集体时，可使用微流化Mayhew，etal.Biochim.Biophys.Acta775:169，1984。此类方法是轻易适用于将iRNA剂制剂封装入脂质体中。[0513]脂质体是落入两个大类中。阳离子脂质体是带正电荷的脂质体，其与带负电荷的核酸分子反应以形成适当的错合物。该带正电荷的核酸脂质体错合物是接着至带负电荷的细胞表面，并内化于内体中。由于内体内的酸性pH，这些脂质体破裂，将其内容为释放入细胞质中（Wangetal.，Biochem.Biophys.Res.Commun.,1987,147,980-985〇[0514]pH敏感或带负电荷的脂质体更倾向于捕捉核酸，而非与其错合。由于该核酸与脂质两者皆带相似电荷，更容易出现排斥，而非错合物的形成。尽管如此，某些核酸是被捕捉入此类脂质体的水性内部中。pH敏感的脂质体已经用以于培养物中递送编码胸苷激酶的核酸至细胞单层。外源基因的表达是于革巴标细胞中侦检的（Zhouetal.，JournalofControlledRelease,1992,19,269-274〇[0515]—种主要类型的脂质性组合物是包括除天然衍生的磷脂酰基胆碱外的磷脂质。中性脂质体组合物，举例而言，可自二肉豆蔻酰基磷脂酰基胆碱DMPC或二棕榈酰基磷脂酰基胆碱DPPC形成。阴离子性脂质体组合物通常是自二肉豆蔻酰基磷脂酰基形成，而阴离子性促融脂质体主要自二油酰基磷脂酰基乙醇胺DOPE形成。另一类型的脂质性组合物是自磷脂酰基胆碱PC如，举例而言，大豆PC及卵PC形成。另一类型是自磷脂和或磷脂酰基胆碱和或胆固醇的混合物形成。[0516]于体外及体内将脂质体引入细胞中的其他方法的实例是包括第5，283,185号美国专利;第5，171，678号美国专利;第WO9400569号世界专利;第WO9324640号世界专利;第WO9116024号世界专利；Feigner，J.Biol.Chem.269:2550,1994;Nabel,Proc.Natl.Acad.Sci.90:11307,1993；Nabel,HumanGeneTher.3:649,1992；Gershon,Biochem.32:7143，1993;及StraussEMBOJ.ll:417，1992〇[0517]亦已经检查非离子性脂质性系统以确定其在递送药物至皮肤中的应用性，尤其是包含非离子性表面活性剂及胆固醇的系统。包含Novasome™I二月桂酸甘油酯胆固醇聚氧乙烯-10-硬脂基醚及Novasome™II二硬脂酸甘油酯胆固醇聚氧乙烯-10-硬脂基醚）的非离子性脂质性配制品是用以递送环孢霉素-A至鼠皮的真皮。结果表明，此类非离子性脂质性系统是有效于促进环孢霉素A沉积入皮肤的不同层中（Huetal.S.T.P.Pharma.Sci.,1994,46466〇[0518]脂质体还包括“经空间稳定化（stericallystabilized”的脂质体，如本文中使用，该术语是指称包含一种或多种专一化脂质，当将这些脂质并入脂质体中时，导致相对于缺乏此类专一化脂质的脂质体提升的循环寿命。经空间稳定化的脂质体的实例是下述那些:其中，脂质体的形成运载剂的脂质部份的一部分是A包含一种或多种糖脂质，如单唾液酸神经节苷脂GM1，或⑻使用一种或多种亲水性聚合物如聚乙二醇PEG节段衍生。尽管不欲受缚于任何特定理论，本领域中认为，至少对于含有神经节苷脂、神经鞘磷脂、或PEG衍生的脂质的经空间稳定化的脂质体，此类经空间稳定化的脂质体的提升的循环寿命是源自网状内皮细胞系统RES对其的摄取降低Allenetal.，FEBSLetters，1987,223,42;Wuetal.,CancerResearch,1993,53,3765〇[0519]包含一种或多种糖脂质的多种脂质体是本领域中熟知者。Papahadjopoulos等人Ann.N.Y.Acad.Sci.，1987，507，64报导了单唾液酸神经节苷脂GMl、硫酸半乳糖脑苷脂及磷脂酰基环己六醇改善脂质体的血液半衰期的能力。此类发现已经由Gabizon等人公布Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,1988,85,6949。第4,837,028号美国专利及第WO8804924号世界专利两者皆授权予Alien等人披露了包含1神经鞘磷脂及⑵神经节苷脂Gm1或半乳糖脑苷脂硫酸酯的脂质体。第5,543,152号美国专利Webb等人披露了包含神经鞘磷脂的脂质体。包含l，2-sn-二肉豆蔻酰基磷脂酰基胆碱的脂质体是披露于第WO9713499号世界专利Lim等人）中。[0520]于一方面中，是使用阳离子性脂质体。阳离子性脂质体是具有能融合至细胞膜的优势。非阳离子性脂质体尽管不能同样有效地与浆膜融合，但其是借由体内的巨噬细胞摄取，并用以递送iRNA剂至巨噬细胞。[0521]脂质体的进一步优势是包括：自天然磷脂获得的脂质体是生物可相容且生物可降解;脂质体可合并广范围的水及脂溶性药物;脂质体可保护封装于其内部隔室中的iRNA剂不被代谢或降角军（RosofT,PharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.，1988，volumel，p.245。于制备脂质体配制品中的重要考虑是脂质表面电荷、运载剂尺寸、及脂质体的水性体积。[0522]带正电荷的合成阳离子性脂质，N-[卜（2,3_二油基氧）丙基]-N，N，N_三甲基氯化铵DOTMA可用以形成小脂质体，该小脂质体与核酸自发反应以形成脂质-核酸错合物，这些错合物能与组织培养细胞的细胞膜上带负电荷的脂质融合，导致iRNA剂的递送（参见，如，Feigner,P.L.etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.,USA8:7413-7417,1987及第4,897,355号美国专利对于DOTM及其与DNA合用的说明）。[0523]DOTMA类似物（1，2-双（油酰氧基-3-三甲基氨丙烷DOTAP可用与磷脂质合用以形成DNA-错合运载剂。Lipofectin™BethesdaResearchLaboratories,Gaithersburg,Md.是递送高度阳离子性核酸至活体组织培养细胞中的有效剂，其是包含带正电荷的DOTMA脂质体，且该脂质体是与带负电荷的多核苷酸自发反应以形成错合物。当使用带足够正电荷的脂质体时，所得错合物上的网状电荷亦为正。以此途径制备的带正电荷的错合物是自发结合至带负电荷的细胞表面，与浆膜融合，并有效递送官能性核酸至诸如组织培养细胞内。另一可商购的阳离子性脂质，1，2-双油酰氧基-3，3-三甲基氨丙烷（“D0TAP”）BoehringerMannheim,Indianapolis,Indiana是与DOTMA区分开来，于前者中，油酰基部分是借由酯键联而非醚键联而键联。[0524]其他报导的阳离子性脂质化合物是包括那些已经接合至多种部分者，其包括，举例而言，已经接合至两种类型脂质的一者的羧基精四胺且包括化合物如5-羧基精四胺甘氨酸二八油酰胺（carboxyspermylglycinedioctaoleoylamide“DOGS”）（Transfectam™,Promega,Madison,Wisconsin及二棕榈酰基磷脂酰基乙醇胺5-羧基精四氨基-酰胺“DPPES”）（参见，如，第5，171，678号美国专利）。[0525]另一阳离子性脂质接合物是包括使用胆固醇（“DC-Chol”）使该脂质衍生化，该接合物已经配制入与DOPE组合的脂质体中（参见，如，Gao,X.andHuang，L.，Biochim.Biophys·Res·Commun·179:280，1991。已经报导，借由将聚赖氨酸接合至DOPE而作成的脂质聚赖氨酸于血清的存在下是有效用于转染（Zhou，X.etal.，Biochim.Biophys.Acta1065:8，1991。对于某些细胞株，此类含有经接合的阳离子性脂质的脂质体是称为显现较低毒性且提供比含DOTMA的组合物更有效的转染。其他可商购的阳离子脂质产品是包括DMRIE及DMRIE-HPVical,LaJolla，California、以及LipofectamineDOSPALifeTechnology，Inc·，Gaithersburg，Maryland〇其他适用于递送寡核苷酸的阳离子脂质是披露于第WO9839359号世界专利及第WO9637194号世界专利中。[0526]脂质体配制品是特别适用于局部给药，脂质体是相对于其他配制品存在若干优势。此类优势是包括，相对于所给药的药物的高全身性吸收，副效应降低、所给药的药物在所欲靶标处的累积增加、以及给药iRNA剂至皮肤内的能力增加。于某些实作中，脂质体是用于递送iRNA剂至表皮细胞且用以提升iRNA剂至真皮组织如皮肤内的渗透。举例而言，这些脂质体可局部施加。已经有文献记载，配制为脂质体的药物至皮肤的外用递送（参见，如，Weineretal.,JournalofDrugTargeting,1992,vol.2,405-41OandduPlessisetal.,AntiviralResearch,18,1992,259-265；Mannino,R.J.andFould-FogeritejS.,Biotechniques6:682-690,1988；Itani,T.etal.Gene56:267-276.1987；Nicolau,C.etal.Meth.Enz.149:157-176,1987；Straubinger,R.M.andPapahadjopoulos，D.Meth.Enz.101:512-527，1983;Wang，C.Y.andHuang，L.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:7851-7855,1987。[0527]亦检查非离子性脂质体系统以测定其在递送药物至皮肤中的应用性，特别是包含非离子性表面活性剂及胆固醇的系统。包含NovasomeI二月桂酸甘油酯胆固醇聚氧乙烯-10-硬脂基醚及NovasomeII二月桂酸甘油酯胆固醇聚氧乙烯-10-硬脂基醚）的非离子性脂质体配制品是用以递送药物至鼠皮的真皮。此类具有iRNA剂的配制品是用于治疗皮肤病。[0528]包括iRNA的脂质体可作成高度可变形。此变形能力能领这些脂质体通过小于该脂质体平均半径的孔而渗透。举例而言，传递体是一种类型的可变形脂质体。[0529]可借由加入表面边缘活化剂通常为表面活性剂至标准脂质性组合物而作成传递体transferosome。为了递送iRNA剂至皮肤中的角质细胞，举例而言，可借由感染而经皮下递送包括iRNA剂的传递体。为了横跨完好无缺哺乳动物皮肤，脂质运载剂必须在适宜的透皮梯度的影响下穿行通过一系列细孔，每一孔的直径为小于50纳米nm。此外，由于脂质特性，此类传递体可自优化适应诸如皮肤中孔的形状）、自修复，且可频繁到达其靶标而不碎裂且一般为自锁定。[0530]其他适合本发明的配制品是披露于，举例而言，第WO2008042973号PCT申请案中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。[0531]传递体是另一类型的脂质体，其是高度可变形的脂质聚集体其是药物递送运载剂的有吸引力的备选）。传递体可披露为脂质滴，其是高度可变形，故能轻易通过小于该滴的孔而渗透。传递体是可适应其所使用的环境，如，他们是自优化适应皮肤中孔的形状）、自修复，频繁到达其靶标而不碎裂且通常自锁定。可以是将表面边缘活化剂通常为表面活性剂）加入标准脂质性组合物中，以作成脂质体。传递体已经用以递送血清白蛋白至皮肤。已经显示，血清白蛋白的传递体介导的递送是与含有血清白蛋白的溶液的皮下注射一样有效。[0532]表面活性剂于多种配制品如乳液包括微乳液及脂质体中可广泛应用。归类及评级多种不同类型的天然及合成性两类表面活性剂的最常用途径，是使用亲水亲油平衡HLB。亲水性基团（亦认知为“头部”）的天性是提供将配制品中使用的不同表面活性剂分类的最有用手段（Rieger，in“PharmaceuticalDosageForms”，MarcelDekker,Inc.,NewYork，N.Y.，1988，ρ·285。[0533]若该表面活性剂分子未离子化，其是归类为非离子性表面活性剂。非离子性表面活性剂于药物及化妆产品中具有广泛应用且可于宽PH值范围内使用。通常，取决于其结构，其HLB范围是自2至约18。非离子性表面活性剂是包括非离子性酯类，如乙二醇酯类、丙二醇酯类、甘油酯类、聚甘油酯类、去水山梨醇酯类、鹿糖酯类、及乙氧基化酯类。非离子性烷醇酰胺类及醚类如脂肪醇乙氧基化物、丙氧基化醇类、及乙氧基化丙氧基化嵌段聚合物还包括于此类中。聚氧乙烯表面活性剂是该非离子性表面活性剂类别的最常见成员。[0534]若当表面活性剂分子溶解或分散于水中时载有负电荷，则该表面活性剂是归类为阴离子性。阴离子性表面活性剂是包括羧酸酯类如皂类、酰基乳酸酯类、氨基酸的酰基酰胺类、硫酸的酯类如硫酸烷基酯类及乙氧基化硫酸烷基酯类、磺酸酯类如苯磺酸烷基酯类、磺酸酰基羟乙基酯类、酒石酸酰基酯类及磺酰基琥珀酸酯类、及磷酸酯类。阴离子性表面活性剂类别的最重要成员是烷基硫酸盐类及皂类。[0535]若当表面活性剂分子溶解或分散于水中时载有正电荷，则该表面活性剂是归类为阳离子性。阳离子性表面活性剂是包括四级铵盐类及乙氧基化胺类。这些四级铵盐类是此类别的最常用成员。[0536]若表面活性剂分子是具有载有正电荷或负电荷的能力，则该表面活性剂是两性。两性表面活性剂是包括丙烯酸衍生物、经取代的烷基酰胺类、N-烷基甜菜碱类及磷脂类。[0537]已经回顾表面活性剂于药物产品、配制品及乳液中的用途（Rieger，in“PharmaceuticalDosageForms”，MarcelDekker，Inc·,NewYork，N.Y·，1988，p·285〇[0538]用于本发明的方法中的iRNA亦可提供为微胞配制品。本文中，“微胞”是定义为特定类型的分子集合体，其中，两性分子是排列为球状结构，故这些分子的全部疏水性部分是朝向内层，留下亲水性部分与周围水性相接触。若环境为疏水性，则存在逆向排列。[0539]使用于通过透皮膜递送的混合微胞配制品可借由混合siRNA组合物的水溶液、碱金属C8至C22烷基硫酸盐、与微胞形成化合物而制备的。例示性微胞形成化合物是包括卵磷月旨、玻尿酸、药学可接受的玻尿酸盐、乙醇酸、乳酸、洋甘菊提取物、黄瓜提取物、油酸、亚麻油酸、苏子油酸、单油酸甘油酯、单油酸酯类、单月桂酸酯类、琉璃苣油、月见草油、薄荷醇、三羟基侧氧基胆烷基甘氨酸及其药学可接受盐类、甘油、聚甘油、赖氨酸、聚赖氨酸、三油酸甘油酯、聚氧乙烯醚及其类似物、聚多卡醇烷基醚及其类似物、鹅脱氧胆酸盐、脱氧胆酸盐、及其混合物。这些微胞形成化合物可与碱金属烷基硫酸盐同时加入或于碱金属烷基硫酸盐之后加入。为了提供较小尺寸的微胞，混合微胞将使用除剧烈混合外的任意种类的混合将组分混合而得。[0540]于一方法中，是制备第一微胞组合物，其是含有该SiRNA组合物及至少该碱金属烷基硫酸盐。随后，该第一微胞组合物是与至少三种微胞形成化合物混合以形成混合微胞组合物。于另一方法中，该微胞组合物是借由下述制备:混合该SiRNA组合物、碱金属烷基硫酸盐、及至少一种该微胞形成化合物，之后于剧烈搅拌下加入剩余的微胞形成化合物。[0541]可将苯酚和或间甲酚加入该混合微胞组合物中，以稳定化该配制品且防止细菌生长。可替代地，可与苯酚和或间甲酚与这些微胞形成成分同时加入。亦可于形成该混合微胞组合物后，加入等渗剂如甘油。[0542]对于作为喷雾递送该微胞配制品，可将该配制品放入气溶胶分配器中，且该分配器是填充有推进剂。该推进剂是处于压力的下，且以液体形式位于该分配器中。调节这些成分的比，故水相与推进剂相变为一者，即，仅存在一相。若存在两相，则必需在诸如通过如计量阀分散一部分这些内容物之前摇动该分配器。分配剂量的药剂是以细小喷雾从该计量阀推进。[0543]推进剂可包括含氢的氟氯碳化物、含氢的氟碳化合物、二甲基醚及二乙基醚。于某些方面中，可使用HFA134al，l，l，2-四氟乙烧）。[0544]可借由相对直接的实验确定主成分的具体浓度。对于通过口腔的吸收，一般所希望的是将通过注射的剂量或通过胃肠道给药的剂量增加至少两倍或三倍。[0545]B.脂质粒子[0546]本发明的iRNAs如dsRNA可完全封装于脂质配制品如LNP中，或其他核酸-脂质粒子中。[0547]本文中，术语“LNP”是指称适宜的核酸-脂质粒子。LNP典型是含有阳离子脂质、非阳离子脂质、及防治该粒子聚焦的脂质（如，PEG-脂质接合物）INP是极其有用于全身性应用，盖因其在静脉i.v.注射后显现延长的循环寿命且于远程位点（如，与给药位点物理上分离的位点）蓄积。LNP是包括“pSPLP”，其是包括经封装的缩合剂-核酸错合物，如第WO0003683号PCT申请案中详述者。本发明的粒子典型是具有约50nm至约150nm的平均直径，更典型约60nm至约130nm，更典型约70nm至约110nm，最典型约70nm至约90nm，且是实质上无毒性。此外，当这些核酸存在于本发明的核酸-脂质粒子中时，其是于水溶液中具有对于核酸酶降解的抗性。核酸-脂质粒子及其制备方法是披露于第5，976，567号、第5，981，501号、第6,534,484号、第6,586,410号及第6,815,432号美国专利中；第20100324120号美国专利申请案中；及第WO9640964号PCT申请案中。[0548]于一方面中，该脂质与药物的比（质量质量比）（如，脂质与dsRNA比）的范围将是自约1:1至约50:1、自约1:1至约25:1、自约3:1至约15:1、自约4:1至约10:1、自约5:1至约9:1、或约6:1至约9:1。介于上文引述范围内的范围亦预期为本发明的一部分。[0549]该阳离子脂质可以是，举例而言，N，N-二油基-N，N-二甲基氯化铵DODAC、N，N-二硬脂酰基-N，N-二甲基溴化铵DDAB、N-I-2,3-二油酰氧基丙基-N，N，N-三甲基氯化铵DOTAP、N-I-2，3-二油氧基）丙基-N，N，N-三甲基氯化铵DOTMA、N，N-二甲基-2，3-二油氧基）丙基胺DODMA、1，2-二亚麻油氧基-N，N-二甲基氨基丙烷DLinDMA、1，2-二亚麻油氧基_N,N-二甲基氨基丙烧DLenDMA、1，2-二亚麻油基氨基甲酰氧基_3_二甲基氨基丙烷DLin-C-DAP、1，2_二亚麻油氧基-3-二甲基氨基）乙酰氧基丙烷DLin-DAC、1，2_二亚麻油氧基-3-吗啉基丙烷DLin-MA、1，2-二亚麻油酰基-3-二甲基氨基丙烷DLinDAP、1，2-二亚麻油基硫基-3-二甲基氨基丙烷DLin-S-DMA、1_亚麻油酰基-2-亚麻油氧基-3-二甲基氨基丙烷DLin-2-DMAP、1，2_二亚麻油氧基-3-三甲基氨基丙烷氯盐DLin-TMA.Cl、1，2-二亚麻油酰基-3-三甲基氨基丙烷氯盐DLin-TAP.Cl、1，2-二亚麻油氧基-3-N-甲基昵基丙烷DLin-MPZ、或3-N，N-二亚麻油基氨基-1，2_丙二醇DLinAP、3-N，N-二油基氨基-1，2-丙二醇DOAP、1，2-二油基氧基-3-2-N，N-二甲基氨基）乙氧基丙烷DLin-EG-DMA、1，2_二亚麻油氧基-N，N-二甲基氨基丙烷DLinDMA、2,2-二亚麻油基-4-二甲基氨基甲基-[1，3]-二氧杂环戊烷DLin-K-DMA或其类似物、（3aR，5s，6aS-N，N-二甲基-2，2-二92，122-十八碳-9，12-二烯基）四氢-3!1-环戊[1][1，3]二氧杂环戊烷-5-胺仏1^100、4-二甲基氨基丁酸6Z，9Z，28Z，31Z-三十七碳-6，9，28，31-四烯-19-酯MC3、1，Γ-θα-2-2-双2-羟基十二烷基氨基）乙基）（2-羟基十二烷基氨基）乙基昵-1-基）乙基氮烷二基）二十二烷-2-醇（TechGl、或其混合物。该阳离子脂质可于粒子中包含约20mo1%至约50mo1%或约40mo1%的总脂质。[0550]于另一方面中，化合物2，2-二亚麻油基-4-二甲基氨基乙基-[1，3]-二氧杂环戊烷可用以制备脂质-siRNA纳米粒子。2，2-二亚麻油基-4-二甲基氨基乙基-[1，3]-二氧杂环戊烷的合成是披露于2008年10月23日提交的第61107,998号美国临时专利申请案中，该申请案是借由引用并入本文。[0551]于一方面中，该脂质-siRNA粒子是包括40%的2,2_二亚麻油基-4-二甲基氨基乙基-[1，3]-二氧杂环戊烷、10%的DSPC、40%的胆固醇、10%的PEG-C-DOMG分子百分比），粒子尺寸为63·0±20nm，且具有0·027的siRNA脂质比。[0552]该可离子化的非阳离子性脂质可以是阴离子性脂质或中性脂质，其是包括，但不限于，二硬脂酰基磷脂酰基胆碱DSPC、二油酰基磷脂酰基胆碱DOPC、二棕榈酰基磷脂酰基胆碱DPPC、二油酰基磷脂酰基甘油DOPG、二棕榈酰基磷脂酰基甘油DPPG、二油酰基-磷脂酰基乙醇胺DOPE、棕榈酰基油酰基磷脂酰基胆碱POPC、棕榈酰基油酰基磷脂酰基乙醇胺POPE、二油酰基-磷脂酰基乙醇胺4-N-马来酰亚氨基甲基-环己烷-1-甲酸盐DOPE-mal、二棕榈酰基磷脂酰基乙醇胺DPPE、二肉豆蔻酰基磷酰基乙醇胺DMPE、二硬脂酰基-磷脂酰基-乙醇胺DSPE、16-0_单甲基PE、16-0-二甲基PE、18-1-反式PEU-硬脂酰基-2-油酰基-磷脂酰基乙醇胺SOPE、胆固醇、或其混合物。则该非阳离子性脂质可以总脂质的约5111〇1%至约9〇1]1〇1%、约1〇1]1〇1%、或约581]1〇1%若包括胆固醇存在于粒子中。[0553]抑制粒子的聚集的接合脂质可以是，举例而言，聚乙二醇PEG-脂质，其包括，而不限于，PEG-二酰基甘油DAG、PEG-二烷氧基丙基DAA、PEG-磷脂质、PEG-脑酰胺Cer、或其混合物。PEG-DAA接合物可以是，举例而言，PEG-二月桂基氧丙基C12、PEG-二肉豆蔻基氧丙基C14、PEG-二棕榈基氧丙基C16、或PEG-二硬脂基氧丙基C18。防止粒子聚集的接合脂质可以总脂质的Omo1%至约20mo1%或约2mo1%存在于粒子中。[0554]于某些方面中，该核酸-脂质粒子进一步包括胆固醇，如，以总脂质的约lOmol%至约60mol%或约48mol%存在于该粒子中。[0555]于一方面中，类脂质ND98·4HC1Mff1487参见，于2008年3月26日提交的第12056,230号美国专利申请案，其是借由引用方式而并入本文）、胆固醇（Sigma-Aldrich、及PEG-CeramideC16AvantiPolarLipids可用以制备脂质-dsRNA纳米粒子（即，LNPOl粒子）。可如下述者制备乙醇中的各原料溶液：ND98，133mgml;胆固醇，25mgml;PEG-CeramideC16，100mgml。随后，该ND98原料溶液、胆固醇原料溶液、及PEG-CeramideC16原料溶液可以42:48:10的摩尔比合并。经合并的脂质溶液可与水性dsRNA如，于pH5的醋酸钠水溶液中）混合，故最终乙醇浓度为约35至45%，且最终醋酸钠浓度为约100至300mM。月旨质-dsRNA纳米粒子典型是于混合时自发形成。依据所希望的粒子尺寸分布，所得纳米粒子混合物可使用诸如热筒押出器如Lipex押出器NorthernLipids，Inc通过聚碳酸酯膜如，IOOnm截留）押出。于某些例中，该押出步骤可省略。可借由诸如渗析或正切流动过滤实施乙醇的移除及同步缓冲液交换。缓冲液可与诸如磷酸盐缓冲液PBS于约pH7,如，约pH6.9、约pH7.0、约pH7.1、约pH7.2、约pH7.3、或约pH7.4进行交换。[0557]LNPOl配制品是披露于诸如第WO2008042973号国际申请公开案中，其是借由引用方式而并入本文。[0558]额外的例示性脂质-dsRNA配制品是披露于表1中。[0559]表1[0562][0563]DSPC:二硬脂酰基磷脂酰基胆碱[0564]DPPC:二棕榈酰基磷脂酰基胆碱[0565]PEG-DMG:PEG-二肉豆蔻酰基甘油（C14-PEG或PEG-C14平均分子量为2000的PEG[0566]PEG-DSG:PEG-二桂皮基甘油（C18-PEG或PEG-C18平均分子量为2000的PEG[0567]PEG-cDMA:PEG-氨基甲酰基-I，2-二肉豆蔻基氧丙基胺平均分子量为2000的PEG[0568]包含SNALPI，2-二亚麻油烯基氧基-N，N-二甲基氨基丙烷DLinDMA的配制品是披露于2009年4月15日提交的第WO2009127060号国际专利申请案中，其是借由引用方式而并入本文。[0569]包含XTC的配制品是披露于第WO2010088537号PCT申请案中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。[0570]包含MC3的配制品是披露于例如2010年6月10日提交的第20100324120号美国专利公开案中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。[0571]包含ALNY-100的配制品是披露于例如第WO2010054406号PCT申请案中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。[0572]包含C12-200的配制品是披露于第WO2010129709号PCT申请案中，其整体内容是借由引用方式而并入本文。[0573]用于经口给药的组合物及配制品是包括粉剂或粒子剂、微粒剂、纳米粒子剂、于水或非水性介质中的悬浮剂或溶液、胶囊剂、凝胶胶囊剂、袋剂、片剂或迷你片剂。增稠剂、调香剂、稀释剂、乳化剂、分散助剂或接着剂可以是所希望的。于某些方面中，那些经口配制品是下述者，其中，本发明提出的dsRNA是与一种或多种渗透增强表面活性剂及螯合剂联合给药。适宜的表面活性剂是包括脂肪酸类和或其酯类或盐类、胆汁酸类和或其盐类。适宜的胆汁酸类盐类是包括鹅脱氧胆酸CDCA及乌索脱氧鹅脱氧胆酸UDCA、胆酸、去氢胆酸、脱氧胆酸、葡萄糖胆酸、甘氨酸胆酸、糖脱氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺脱氧胆酸、牛磺-24,25-二氢-褐霉酸钠及糖二氢褐霉酸钠。适宜的脂肪酸类是包括花生四烯酸、十一酸、油酸、月桂酸、辛酸、癸酸、肉豆蔻酸、棕榈树、硬脂酸、亚麻油酸、苏子油酸、二癸酸酯、三癸酸酯、单油酸甘油酯、二月桂酸甘油酯、1-单癸酸甘油酯、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、酰基肉碱、酰基胆碱、或甘油单酸酯、甘油二酸酯或其药学可接受的盐如，钠盐）。于某些方面中，使用渗透增强剂的组合，举例而言，脂肪酸类盐类与胆酸类盐类组合。一个例示性组合是月桂酸的钠盐、癸酸与UDCA。进一步的渗透增强剂是包括聚氧乙烯-9-月桂基醚、聚氧乙烯-20-鲸蜡基醚。本发明提出的DsRNA可经口腔以包括喷雾干燥粒子或错合以形成微米粒子或纳米粒子的粒状形式递送。DsRNA错合剂是包括聚氨基酸;聚亚胺;聚丙烯酸酯；聚丙烯酸烷基酯、聚氧乙稀乙烧polyoxethanes、聚氰基丙稀酸烧基酯；阳离子化明胶、白蛋白、淀粉、丙稀酸酯、聚乙二醇（PEG及淀粉；聚氰基丙烯酸烷基酯；DEAE-衍生的聚亚胺、普鲁兰多糖pollulans、纤维素及淀粉。适宜的复合剂是包括几丁聚糖、N-三甲基几丁聚糖、聚-L-赖氨酸、聚组氨酸、聚鸟氨酸、聚精四胺、鱼精蛋白、聚乙烯基吡啶、聚硫代二乙基氨基甲基乙烯PTDAE、聚氨基苯乙烯（如，对氨基苯乙烯）、聚（氰基丙烯酸甲酯）、聚（氰基丙烯酸乙酯）、聚（氰基丙烯酸丁酯）、聚氰基丙烯酸异丁酯）、聚（氰基丙烯酸异己酯）、DEAE-甲基丙烯酸酯、DEAE-丙烯酸己酯、DEAE-丙烯酰胺、DEAE-白蛋白及DEAE-糊精、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯酸己酯、聚（D，L-乳酸）、聚（DL-乳酸-共-乙醇酸PLGA、海藻酸盐、及聚乙二醇PEG。dsRNA的口服配制品及其制备是详细披露于第6，887，906号美国专利、第20030027780号美国专利公开案、及第6,747,014号美国专利中，各自是借由引用而并入本文。[0574]用于非经肠道、实质内（至脑内）、鞘内、心室内或肝内给药的组合物及配制品可包括无菌水溶液，其亦可含有缓冲剂、稀释剂及其他适宜的佐剂，例如但不限于，渗透增强剂、载剂化合物及其他药学可接受的载剂或赋形剂。[0575]本发明的药物组合物是包括，但不限于，溶液、乳液、及含脂质体的配制品。此类组合物可自多种成分产生，这些成分是包括，但不限于，预形成的液体、自乳化固体、及自乳化半固体。特别优选地是，当治疗肝病如肝癌时以肝脏为靶标的配制品。[0576]本发明的药物配制品，其可以单位剂量形式便利地存在，可根据药学工业中熟知的传统技术制备。此类技术是包括将这些活性成分与药物载剂或赋形剂带至联合的步骤。通常，这些配制品是借由下述制备:将活性成分与液体载剂或精细分割的固体载剂或两者均匀且密切地带至联合，随后，若需要，使产品成型。[0577]本发明的组合物可配制为多种可能剂量形式的任一者，是例如，但不限于，片剂、胶囊剂、凝胶胶囊剂、液体糖浆剂、软凝胶剂、栓剂、及灌肠剂。本发明的组合物亦可配制为于水性、非水性或混合介质中的悬浮液。水性悬浮液可复含有增加该悬浮液黏度的物质，包括，举例而言，羧甲基纤维素钠、山梨醇、和或类糊精。该悬浮液亦可含有稳定剂。[0578]C.其他配制品[0579]i.乳液[0580]本发明的组合物可制备且配制为乳液。乳液典型是非均质的系统，其中一种液体是以一般为直径超过〇.1微米（μm的液滴分散于另一液体中（参见如AnseI’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystemsjAllenjLV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,LippincottWilliamsffilkins8thed.,NewYorkjNY;Idson,inPharmaceuticalDosageForms，Lieberman，RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker，Inc·，NewYorkjN.Y.,volumeI,p.199；RosoffjinPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds·，1988,MarcelDekkerjInc.,NewYork,N.Y.,VolumeI,p.245；BlockinPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekkerjInc.,NewYorkjN.Y.,volume2,p.335；Higuchietal.,inRemington’sPharmaceuticalSciencesjMackPublishingCo.,EastonjPa.,1985，p.301。乳液一般是双相系统，其是包含两种密切混合且分散于彼此中的不互混液体相。通常，乳液可以是油包水wo或水包油ow类型。当将水性精细分割为小滴并分散于大体积油性相中时，所得组合物是称为油包水wo乳液。可替代地，当将油相精细分割为小滴并分散于大体积水性相中时，所得组合物是称为水包油wo乳液。乳液除了含有经分散的相外，亦可含有额外的组分，以及可作为溶液存在于该水性相中、油性相中或自身作为独立相的活性药物。如需要，药学赋形剂如乳化剂、稳定剂、染料及抗氧化剂亦可存在于乳液中。药物乳液亦可以是由超过两相组成的复合乳液，例如，举例而言，于油包水包油〇w0及水包油包水wow乳液的例中。此类复杂配制品往往提供简单双相乳液不具备的某些优势。于0V乳液的受试者油滴封装小水滴的复合乳液是构建w0V乳液。同样，油滴被封装在稳定存在于油性连续相中的水球内的系统，是提供oVo乳液。[0581]乳液的特征在于极低或不具备热力学稳定性。通常，乳液的分散相或不连续相是良好分散于外部相或连续相中并通过乳化剂手段或该配制品的黏度而维持此形式。乳液的任一相可以是半固体或固体，如乳液型软膏基及乳油的例。稳定化乳液的其他手段必需使用能并入该乳液任一相中的乳化剂。乳化剂可大略分为四类:合成性表面活性剂、天然乳化剂、吸收基剂、及精细分散的固体参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork1NY；Idson,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p·199〇[0582]合成性表面活性剂（亦认知为表面活性剂）已经于乳液配制品中找到广泛应用性且已经回顾于文献中（参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork,NY；Rieger,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p.285；Idson,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,1988,volumeI,p.199。表面活性剂典型是两性，且是包含亲水性及疏水性部分。表面活性剂的亲水性与疏水性的比已经称为亲水亲脂平衡HLB，且是将表面活性剂酚类及在配制品的制备中选择表面活性剂的有价值的工具。基于亲水性基团的天性，表面活性剂可归为不同类别:非离子性、阴离子性、阳离子性及两性（参见，如，Ansel，sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork1NYRieger,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarceIDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumel,p.285〇[0583]用于乳液配制品的天然乳化剂是包括羊毛脂、蜂蜡、磷脂、卵磷脂及阿拉伯胶。吸收基剂如无水羊毛脂及亲水性石蜡脂是具备亲水特性，故他们可吸水以形成wο乳液，且仍保持其半固体稠度。精细分割的固体亦已经用作良好的乳化剂，尤其是与表面活性剂组合且用于黏性制剂中。此类是包括极性无机固体，如重金属氢氧化物，非膨润性黏土如皂土、美铝海泡石、水辉石、高岭土、蒙脱石、胶体硅酸铝、及胶体硅酸镁铝），颜料以及，非极性固体如碳或三硬脂酸甘油酯。[0584]大量非乳化性材质还包括于乳液配制品中，并对乳液的特性有贡献。此类是包括脂肪、油、蜡、脂肪酸、脂肪醇、脂肪酯、保湿剂、亲水性胶体、防腐剂及抗氧化剂Block，inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p.335；Idson,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI，p.l99〇[0585]亲水性胶体或水胶体是包括天然胶及合成性聚合物，如多糖举例而言，阿拉伯胶、琼脂、海藻酸、卡拉胶、瓜尔胶、刺梧桐胶、及黄蓍胶）、纤维素衍生物举例而言，羧甲基纤维素及羧丙基纤维素）、及合成性聚合物举例而言，卡波姆carbomer、纤维素醚类、及羧基乙烯基聚合物）。此类是于水中分散或溶胀以形成胶体溶液，其借由形成环绕分散相液滴的强界面间膜且借由增加外部相的黏度而稳定化乳液。[0586]由于乳液一般含有大量可轻易支持微生物生长的成分如碳水化合物、蛋白质、固醇及磷脂，此类配制品一般是合并有防腐剂。包括于乳液配制品中的常用防腐剂是包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、四级铵盐、氯化苄烷铵、对羟基苯甲酸酯、及硼酸。通常是将抗氧化剂加入乳液配制品中以防止该配制品的劣化。所使用的抗氧化剂可包括自由基捕捉剂如生育酚、五倍子酸烷基酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯;或还原剂如抗坏血酸及偏亚硫酸氢钠；以及抗氧化剂增效剂如柠檬酸、酒石酸、及卵磷脂。[0587]乳液配制品经由皮肤、口腔及肠胃外途径的应用即其制造方法已经回顾于文献中参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork,NY;Idson,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p.199。因为配制容易且自吸收及生物利用性观点看来的效率，用于口腔递送的乳液配制品已经非常广泛使用（参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork1NY；Rosoff,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p.245；Idson,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumel,p.l99。矿物油基轻泻剂、油溶性维他命、及高脂肪营养性制剂是已经通常作为〇V乳液而经口给药的材料。[0588]ii.微乳液[0589]于本发明的一方面中，iRNA与核酸的组合物是配制为微乳液。微乳液可定义为水、油及两亲的系统，其是单一的光学上各向同性且热力学上适宜的液体溶液（参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork，NY;RosofT，inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.，1988，MarcelDekker，Inc.，NewYork,N.Y.,volumel，p.245。典型地，微乳液是借由下述制备的系统:首先，将油分散于表面活性剂水溶液中，随后，加入足量的第四组分以形成透明系统，该第四组分通常是中等链长的醇。因此，已经披露微乳液是作为两种不互混液体的热力学稳定、各向同性的澄清分散液，其是借由表面活性分子的界面间膜而稳定化（LeungandShah,in:ControlledReleaseofDrugs:PolymersandAggregateSystems，Rosoff，M·，Ed.，1989，VCHPublishers，NewYork，pages185-215。微乳液一般是经由将三至五种组分包括油、水、表面活性剂、助表面活性剂及电解质组合而制备。微乳液是否为油包水wo或水包油ow类型，是取决于所使用的油及表面活性剂的特性以及该表面活性剂分子的极性头部与经尾部的结构及几何填充（Schott，inRemington’SPharmaceuticalSciences,MackPublishingCo·,Easton,Pa.，1985，p·271〇[0590]使用相图的现象学途径已经广泛研究，且熟识该技艺者已经获得如何配制微乳液的综合知识（参见，如，Ansel’sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,Allen,LV.,PopovichNG.,andAnselHC.,2004,Lippincottffilliamsffilkins8thed.,NewYork,NY；Rosoff,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker,Inc.,NewYork,N.Y.,volumeI,p.245；Block,inPharmaceuticalDosageForms,Lieberman,RiegerandBankerEds.,1988,MarcelDekker，Inc.,NewYork，N.Y.,volumel，p.335。与传统乳液相比，微乳液提供将水不溶性药物溶解于自发形成的热力学适宜的液滴配制品中的优势。[0591]于微乳液的制备中使用的表面活性剂是包括，但不限于，离子性表面活性剂、非离子性表面活性剂、Brij96、聚氧乙烯油基醚、聚甘油脂肪酸酯、四甘油单月桂酸酯ML310、四甘油单油酸酯M0310、六甘油单油酸酯P0310、六甘油五油酸酯P0500、十二甘油单癸酸酯MCA750、十二甘油单油酸酯M0750、十二甘油倍半油酸酯S0750、十二甘油十二油酸酯DA0750，单独使用或与助表面活性剂合用。该助表面活性剂通常是短链醇如乙醇、1-丙醇及1-丁醇，其是用以借由渗透如表面活性剂膜中，并因为在表面活性剂分子之间产生空洞空间而由此创制无序膜，从而增加界面间流动性。然而，微乳液可不使用助表面活性剂而制备，且无醇的自乳化的微乳液系统是本领域中熟知者。该水性相典型可以是，但不限于，水、药物的水溶液、甘油、PEG300、PEG400、聚甘油、丙二醇类、及乙二醇的衍生物。该油可包括，但不限于，材质如Captex300;Captex355;CapmulMCM;脂肪酸酯；中链C8-C12单、二、及三甘油酯；聚氧乙基化甘油脂肪酸酯；脂肪醇；聚乙二醇化甘油酯；饱和聚乙二醇化C8-C10甘油酯;植物油;及硅油。[0592]自药物溶解及提升的药物吸收观点看来，微乳液是特别感兴趣的。液体是微乳液ow及wo两者）已经提议以提升药物包括肽的口服生物应用性参见，如，第6，191，105号、第7,063,860号、第7,070,802号、及第7,157,099号美国专利；Constantinidesetal.，PharmaceuticalResearch,1994，11，1385_1390;Ritschel，Meth.Find.Exp.Clin.Pharmacol.，1993,13,205。微乳液是提供下述优势:提升药物溶解性、保护药物不被酶水解、由于表面活性剂诱导的膜流动性及渗透性的改变而对药物吸收的可能提升、容易制备、比固体剂量形式更容易口服给药、改善的临床潜力、及降低的毒性参见，如，第6，191，105号、第7,063,860号、第7,070,802号、及第7，157,099号美国专利；Constantinidesetal.,PharmaceuticalResearch，1994，11，1385;Hoetal.,J.Pharm.Sci.，1996，85，138-143。当将微乳液的组分于周边温度带至一起时，往往可自发形成微乳液。当配制热不稳定药物、肽或iRNA时，这可尤其具有优势。在化妆品及药学两种应用中，已经发现微乳液是有有效的活性组分的经皮递送。预期本发明的微乳液组合物及配制品将促进经胃肠道进行的iRNA及核酸的全身性吸收的增加，以及改善iRNA及核酸的局部细胞摄取。[0593]本发明的微乳液亦可含有额外的组分及佐剂，如失水山梨醇单硬脂酸酯Grill3、1^1^8〇1、及渗透增强剂，以改善配制品的特性并提升对本发明的11«^及核酸的吸收。于本发明的微乳液中使用的渗透增强剂可归类为属于五大类的一:表面活性剂、脂肪酸、胆盐、螯合剂、及非螯合剂非表面活性剂Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems，1991，p.92。此类类别的每一者是探讨如上。[0594]iii.微粒[0595]本发明的iRNA剂可并入粒子如微粒中。微粒可借由喷干生产的，但亦可借由其他方法包括冻干、蒸发、流动床干燥、真空干燥、或此类技术的组合生产的。[0596]iv.渗透增强剂[0597]于一方面中，本发明是采用多种渗透增强剂以影响核酸特别是iRNA至动物皮肤的有效递送。大多数药物是以离子化形式及非离子化两者形式存在于溶液中。然而，通常仅脂溶性或亲脂性药物可轻易跨越细胞膜。已经发现，若待跨越的细胞膜是经渗透增强剂处理，则甚至非亲脂性药物亦可跨越该膜。渗透争强剂处理有助于非亲脂性药物跨越细胞膜的扩散外，亦可增强亲脂性药物的渗透性。[0598]渗透增强剂可归类为属于五大类的一，S卩，表面活性剂、脂肪酸、胆盐、螯合剂、及非螯合非表面活性剂（参见，如，Malmsten,M.Surfactantsandpolymersindrugdelivery,InformaHealthCare,NewYork,NY,2002;Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991，p.92。上述渗透增强剂类别的每一者是更详细披露如下。[0599]表面活性剂或“表面活性剂”）是下述化学受试者：当将其溶解于水溶液中时，其是降低该溶液的表面张力或该水溶液与另一液体之间的接口张力，结果为通过黏膜的iRNA吸收得以提升。此类渗透增强剂处理包括胆汁盐及脂肪酸外，以包括，举例而言，十二烷基硫酸钠、聚氧乙稀-9-月桂基醚、及聚氧乙稀-20-鲸錯基醚（参见，如，MaImsten,M.Surfactantsandpolymersindrugdelivery,InformaHealthCare,NewYork,NY,2002；Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991,p·92;以及全氣化学乳液，如FC-43Takahashietal·,J.Pharm.Pharmacol·，1988,40，252〇[0600]其渗透增强剂作用的多种脂肪酸及其衍生物是包括，举例而言，油酸、月桂酸、癸酸正癸酸）、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、亚麻油酸、苏子油酸、二癸酸酯、三癸酸酯、单油酸甘油酯（1-单油酰基-外消旋-甘油）、二月桂酸甘油酯、辛酸、花生四烯酸、1-单癸酸甘油酯、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、酰基肉碱、酰基胆碱、其C1-20烷基酯（如，甲酯、异丙酯及第三丁酯）、及其单-甘油酯及二甘油酯（即，油酸酯、月桂酸酯、癸酸酯、肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯、硬脂酸酯、亚麻油酸酯等）（参见，如，Touitou,E.，etal.EnhancementinDrugDelivery,CRCPress，Danvers，MA,2006;Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991,p.92；Muranishi,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1990,7,1-33；ElHaririetal.,J.Pharm.PharmacoI.,1992,44,651-654〇[0601]胆汁的生理学角色是包括促进脂质及脂溶性维他命的分散及吸收（参见，如，Malmsten，M.Surfactantsandpolymersindrugdelivery,InformaHealthCare1NewYork，NY，2002;Brunton,Chapter38in:GoodmanGiImanJsThePharmacologicalBasisofTherapeutics,9thEd.,Hardmanetal.Eds.,McGraw-Hill,NewYork,1996,pp.934-935。多种天然胆汁盐类及其合成性衍生物，是作为渗透增强剂。因此，术语「胆盐类」是包括胆汁的天然出现组分及其任意合成性衍生物。适宜的胆盐类是包括，举例而言，胆酸或其药学可接受的钠盐，胆酸钠）、去氢胆酸去氢胆酸钠）、脱氧胆酸脱氧胆酸钠）、葡萄糖胆酸葡萄糖胆酸钠）、甘胺胆酸甘胺胆酸钠）、糖脱氧胆酸糖脱氧胆酸钠）、牛磺胆酸（牛磺胆酸钠）、牛磺脱氧胆酸（牛磺脱氧胆酸钠）、鹅脱氧胆酸（鹅脱氧胆酸钠）、乌索脱氧胆酸UDCA、牛磺-24,25-二氢-褐霉酸钠（STDHF、糖二氢褐霉酸钠、及聚氧乙烯-9-月桂基醚POE参见，如，Malmsten，M.Surfactantsandpolymersindrugdelivery,InformaHealthCare,NewYork,NY,2002;Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991,page92；Swinyard,Chapter39In:Remington’sPharmaceuticalSciences,18thEd.,Gennaro,ed.,MackPublishingCo.,Easton,Pa.,1990,pages782-783；Muranishi,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1990,7,1-33；Yamamotoetal.,J.Pharm.Exp.Ther.,1992,263,25；Yamashitaetal.,J·Pharm·Sci·,1990,79,579-583〇[0602]用于本发明的螯合剂可定义为借由与金属离子形成错合物而将该离子自溶液移除，结果为iRNA的通过黏膜的吸收得以提升的化合物。关于其在本发明中作为渗透增强剂的用途，螯合剂是具有亦作为DNase抑制剂的额外优势，盖因大多数经表征的DNA核酸酶是需要二价金属离子进行催化且因此借由螯合剂得以抑制（Jarrett，J.Chromatogr.，1993，618,315-339。适宜的螯合剂是包括，但不限于，乙二胺四乙酸二钠EDTA、柠檬酸、柳酸盐如，柳酸钠、5-甲氧基柳酸盐及香兰酸盐homovanilate、胶原的N-酰基衍生物、月桂醇聚醚（]^1^^1:11-9、及0-二酮的1'1-氨基酰基衍生物稀胺类）（参见，如，1^丨^代，4.6〖31·，Excipientdevelopmentforpharmaceutical,biotechnology,anddrugdelivery,CRCPress,Danvers,MA,2006；Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991,page92；Muranishi,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems，1990,7，l_33;Buuretal.，J.ControlRel.，1990，14,43_51〇[0603]如本文所使用，非螯合非表面活性剂渗透增强化合物可定义为其显示作为螯合剂或作为表面活性剂的活性不足，但尽管如此仍提升iRNA的通过消化道黏膜的吸收的化合物参见，如，Muranishi,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1990,7，1-33。此类渗透增强剂是包括，举例而言，不饱和环状脲、I-烷基-及I-烯基氮杂环-烷酮衍生物（Leeetal.,CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems,1991,page92;以及非类固醇性抗炎剂如双氯灭痛（diclofenacsodium、Π引噪美辛indomethacin及苯丁P比P坐酉同（phenylbutazoneYamashitaeta1.,J·Pharm·Pharmacol·，1987,39,621-626。[0604]于细胞含量提升iRNA摄取的剂也可加入本发明的药物组合物及其他组合物中。举例而言，亦已知阳离子性脂质如脂转染物Junichietal，U.S.Pat.No.5,705，188、阳离子性甘油衍生物、及聚阳离子性分子如聚赖氨酸Lolloetal.，PCTApplicationWO9730731是提升dsRNA的细胞摄取。可商购的转染试剂的实例是包括，举例而言，Lipofectamine™Invitrogen;Carlsbad，CA、Lipofectamine2000™Invitrogen；Carlsbad，CA、293fectin™Invitrogen;Carlsbad，CA、CeIIfectin™Invitrogen;Carlsbad，CA、DMRIE-CtmInVitrogen;Carlsbad，CA、FreeStyIe™MAXInvitrogen;Carlsbad，CA、Lipofectamine™2000CDInvitrogen;Carlsbad，CA、Lipofectamine™Invitrogen;Carlsbad，CA、iRNAMAXInvitrogen;Carlsbad，CA、Oligofectamine™Invitrogen;Carlsbad，CA、Optifect™Invitrogen;Carlsbad，CA、X_tremeGENEQ2车专染试剂（Roche;Grenzacherstrasse，Switzerland、DOTAP脂质体性转染试剂Grenzacherstrasse，Switzerland、DOSPER脂质体性转染试剂（Grenzacherstrasse，Switzerland或FugeneGrenzacherstrasse，Switzerland、Transfectam®试剂Promega;Madison，WI、TransFas七頂转染试剂（Promega;Madison，WI、Tfxtm_20试剂Promega;Madison，WI、TfxTM_50试剂、（Promega;Madison，WI、DreamFectTMOZBiosciences;MarseiIIe,France、EcoTransfectOZBiosciences;MarseiIIe,France，TransPassaDl转染试剂（NewEnglandBiolabs;Ipswich，MA，USA、LyoVecTMLipoGen™Invitrogen;SanDiego，CA，USA、PerFectin车专染试剂Genlantis;SanDiego，CA，USA、NeuroPORTER转染试剂®enlantis;SanDiego，CA，USA、GenePORTER转染试剂（Genlantis;SanDiego，CA，USA、GenePORTER2转染试剂®enlantis;SanDiego，CA，USA、Cytofectin转染试剂（Genlantis;SanDiego，CA，USA、BaculoPORTER转染试剂（Genlantis;SanDiego，CA，USA、TroganPORTER™转染试剂（Genlantis;SanDiego，CA，USA、RiboFectBioline;Taunton，MA，USA、PIasFectBioline;Taunton，MA，USA、UniFECTORB-BridgeInternational；MountainView，CA，USA、SureFECTORB-BridgeInternational；MountainView，CA，USA、或HiFect™B-BridgeInternational,MountainViewjCAjUSA等。[0605]其他剂可用以提升所给药的核酸的渗透，包括二醇类如乙二醇及丙二醇、吡咯类如2-吡咯、氮酮类、及萜烯类如柠檬烯及薄荷酮。[0606]V.载剂[0607]本发明的某些组合物是于配制品中合并有载剂化合物。如本文所使用，“载剂化合物”或“载剂”可指称核酸或核酸类似物，核酸类似物是惰性即，本身并不具有生物学活性）但被体内制程认定为核酸，该体内制程是借由诸如降解生物上活性核酸或促进其自循环移除而降低具有生物学活性的核酸的生物利用性。将核酸与载剂化合物共同给药且后者物质典型过量，可导致于肝脏、肾脏或循环系统外贮藏所中回收的核酸量的实质性下降，这大概是因为载剂化合物与核酸对于共同受体的竞争。举例而言，当将部分硫磷酸酯dsRNA与聚肌苷酸、硫酸葡聚糖、聚皮质酸polycytidicacid或4-乙酰氨基-4’-异硫氰基-二苯乙稀-2,2’_二磺酸共同给药时，于肝脏组织中回收的部分硫磷酸酯dsRNA的量下降（Miyaoetal.,DsRNARes.Dev.,1995,5,115-121；Takakuraetal.,DsRNANucl.AcidDrugDev.,1996,6，177-183〇[0608]vi.赋形剂[0609]相对于载剂化合物，“药学载剂”或“赋形剂”是药学可接受的溶剂、悬浮剂或用于递送一种或多种核酸至动物的任意其他药物动力学惰性运载剂。该赋形剂可以是液体或固体，根据心中的计划给药方式选择，以当与核酸及给定药物组合物的其他组分合并时提供所希望的整体性、一致性等。典型的药学载剂是包括，但不限于，接着剂如，预胶化玉米淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素等）；填料如，乳糖及其他糖类、微晶纤维素、果胶、明胶、硫酸钙、乙基纤维素、聚丙烯酸酯类或磷酸氢钙等）；润滑剂如，硬脂酸镁、滑石、氧化硅、胶体二氧化硅、硬脂酸、金属硬脂酸盐、氢化植物油、玉米淀粉、聚乙二醇、苯甲酸钠、醋酸钠等）；崩解剂如，淀粉、淀粉二醇钠等）；及润湿剂如，十二烷基硫酸钠等）。[0610]适用于非肠道给药且不与核酸进行有害反应的药物可接受的有机或无机赋形剂亦可用以配制本发明的组合物。适宜的药学可接受的载剂是包括，但不限于，水、盐溶液、醇、聚乙二醇、明胶、乳糖、支链淀粉、硬脂酸镁、滑石、硅酸、黏性石蜡、羟甲基纤维素、聚乙稀基啦略烧酬等。[0611]用于核酸的外用给药的配制品可包括无菌及非无菌水性溶液;于常用溶剂如醇中的非水性溶液;或核酸于液体或固体油基质中的溶液。这些溶液亦可含有缓冲剂、稀释剂及其他适宜的佐剂。可使用适用于非肠道给药且不与核酸进行有害反应的药学可接受的有机或无机赋形剂。[0612]适宜的药学可接受的赋形剂是包括但不限于，水、盐溶液、醇、聚乙二醇、明胶、乳糖、支链淀粉、硬脂酸镁、滑石、硅酸、黏性石蜡、羟甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮等。[0613]vii.其他组分[0614]本发明的组合物可额外含有其他于药物组合物发现的传统附属组分，其用量为技艺中披露的使用含量。因此，举例而言，这些组合物可含有额外、兼容、药学上活性的材料，例如，举例而言，止痒剂、收敛剂、局部麻醉剂或抗炎剂;或可含有可用于物理配制本发明组合物的多种剂型的额外材料，如染料、芳香剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、增稠剂及稳定剂。然而，当加入此类材料时，应不过度干扰本发明组合物的组分的生物学活性。这些配制品可经无菌化，以及，若需要，与不与该配制品的核酸进行有害反应的辅助剂混合，该辅助剂是诸如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、用于影响渗透压的盐类、缓冲剂、着色剂、调香剂和或芳香物质等。[0615]水性悬浮液可含有增加该悬浮液黏度的物质，该物质是包括，举例而言，羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。该悬浮液亦可含有稳定剂。[0616]于某些方面中，本发明提出的药物组合物是包括a—种或多种iRNA化合物及b一种或多种借由非iRNA机制发挥功效且可用于治疗HDV感染的剂。此类剂的实例是包括，但不限于，借由感染并非复制而有助于压制或摧毁HDV和或HBV的抗病毒剂；以及有助于帮助人免疫系统安装病毒防御机制的免疫调节剂。反之，免疫调节剂如皮质类固醇其是诱发病毒及病毒抗原的表达的提升以及T-淋巴细胞功能的压制的增强）、或腺嘌呤阿糖胞苷、无环鸟苷或二脱氧肌苷，对于慢性B型肝炎病毒和或慢性D型肝炎病毒的治疗并无益处。适宜的剂是更详细探讨如下。[0617]此类化合物的毒性及疗效可借由标准药学过程于细胞培养物或实验动物体内测定，如测定LD50将群落的50%致死的剂量及ED50对群落的50%产生疗效的剂量）。毒性与疗效之间的计量比是治疗指数，且其可表达为LD50ED50比。显现高治疗指数的化合物是优选的。[0618]自细胞培养分析及动物研究获得的数据可用于配制用于人类的剂量范围。本发明中本文提出的组合物剂量通常是处于包括具有低毒性或无毒性的ED50的循环浓度范围内。该剂量是依据所采用的剂型及所使用的给药途径而于此范围内变化。对于本发明中提出的方法中使用的任意化合物，可从细胞培养分析实验初步评估治疗有效剂量。一剂药可配制于动物模型中，以达成该化合物的循环血浆浓度范围，可替代地，当适宜时，靶标序列的多肽产物的循环血浆浓度范围（如，达成多肽浓度的降低），该范围包括于细胞培养中测得的IC50S卩，达成症候的半最大抑制的测试化合物浓度）。此信息可用以更准确测定在人体内可用的剂量。举例而言，可借由高效液相色层分析术量测血浆中的含量。[0619]除了上文探讨的给药外，本发明提出的iRNA亦可与其他有效于治疗借由HDV表达介导的病原制程的其他熟知剂组合。无论如何，基于使用本领域中熟知或本文中披露的标准效能量测所观察的结果，给药医生可调节iRNA给药的量及时机。[0620]VII.本发明的方法[0621]本发明是提供治疗及预防方法，其是包括对患有受试者给药包含本发明的iRNA剂的组合物、或包含iRNA剂的药物组合物的组合物、或包含iRNA的载体的组合物，该受试者是患有HDV感染和或HDV相关疾病、病症和或症状、或被证实正在发展出HDV相关疾病、病症和或症状如，CHB。[0622]本发明的方法是可用于治疗患有HDV感染的受试者，如，将受益于HDV基因表达和或HDV复制的下降的受试者。一方面，本发明是提供降低感染HDV的受试者体内B型肝炎病毒cccDNA含量的方法。另一方面，本发明是提供降低感染HDV的受试者体内的HDV抗原如HBsAg和或HBeAg的含量的方法。另一方面，本发明是提供降低感染HDV的受试者体内HDV的病毒负载的方法。本发明还提供降低感染HDV的受试者体内丙氨酸转氨酶ALT和或天冬氨酸转氨酶AST的含量的方法。一方面，本发明是提供增加感染HDV的受试者的抗HDV抗体的含量的方法。另一方面，本发明是提供治疗患有HDV感染的受试者的方法。一方面，本发明是提供治疗患有HDV相关疾病的受试者的方法，该疾病是诸如急性D型肝炎;B型肝炎病毒感染、急性B型肝炎、急性爆发性D型肝炎;慢性D型肝炎;肝纤维化;晚期肝病;肝细胞癌。本发明的治疗方法及用途是包括对受试者如人给药治疗有效量的以HDV基因为靶向的本发明的iRNA剂、或包含以HDV基因为靶向的本发明的iRNA剂的药物组合物、或包含以HDV基因为靶向的iRNA剂的本发明的载体。[0623]一方面，本发明是提供预防患有HDV感染的受试者体内至少一种症候的方法。[0624]另一方面，本发明是提供治疗有效量的本发明的iRNA剂在治疗受试者中的用途，如，会受益于HDV基因表达的降低和或抑制的受试者。[0625]再一方面，本发明是提供本发明的以HDV基因为靶向的iRNA剂如dsRNA或包含在医药制造中以HDV基因为靶向的iRNA剂的药物组合物在治疗受试者中的用途，该受试者是诸如将会受益于HDV基因和或HDV复制的降低和或抑制的受试者，如患有将受益于HDV基因表达下降的病症如HDV相关疾病的受试者。[0626]另一方面，本发明是提供本发明的iRNA如dsRNA在预防受试者体内至少一种症候的用途，该受试者是患有将会受益于HDV基因表达和或HDV复制的下降和或复制的病症。[0627]再一方面，本发明是提供本发明的iRNA剂在医药制造中用于预防受试者体内至少一种症候的用途，该受试者是患有将会受益于HDV基因表达和或HDV复制的下降和或复制的病症如HDV相关疾病。[0628]于一方面中，以HDV为靶向的iRNA剂是给药至患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者，故当将该dsRNA剂给药至受试者时，该受试者的细胞、组织、血液或其他组织或体液内一种或多种HDV基因的表达、HDV抗原含量、和或HDV病毒负载含量被降低至少约10%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或至少约99%或更多。[0629]于一方面中，以HDV为靶向的iRNA剂是给药至患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者，故当将该dsRNA剂给药至受试者时，该受试者的细胞、组织、血液或其他组织或体液内的抗HDV抗体被增加至少约10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、95%、96%、97%、98%、或至少约99%或更多。[0630]本发明的方法及用途是包括给药本文所披露的组合物，故靶标HDV基因的表达得以降低诸如约1、2、3、45、6、7、8、12、16、18、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、或约80小时。于一方面中，靶标HDV基因的表达的降低持续延长的时间，如至少约2、3、4、5、6、7天或更长，如约1、2、3、或约4周或更长。[0631]根据本发明的方法及用途给药dsRNA可导致患有HDV感染和或HDV相关疾病的患者体内此类疾病或病症的严重性、表观症状、症候、和或标记物的下降。本上下文中，“下降”是意指此含量的统计学显著降低。该下降可以是，举例而言，至少约5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、或约100%。[0632]举例而言，可借由量测疾病进程、疾病缓解、症候严重性、疼痛下降、生命质量、延续治疗效果所需的药剂量、疾病标记物或适用于待治疗或作为预防靶向的给定疾病的任一其他可量测参数的含量，而评测疾病的治疗或预防效能。借由量测任一此类参数或参数的任意组合而监控治疗或预防的效能，是完全处于熟识该技艺者的能力范围内。举例而言，可借由诸如监控病毒堵在及转氨酶含量而评估CHB的治疗效能。将晚期读取数据与初始读取数据比较，是对医生提供治疗是否有效的指引。借由量测任此类参数的一或参数的任意组合而监控治疗或预防的效能，是完全处于熟识该技艺者的能力范围内。对于给药以HDV为靶向的iRNA或其药物组合物，“有效对抗”HDV相关的疾病是表明，以临床适宜方式给药是对至少统计学显著分数的患者导致有益效果，如症候改善、治愈、疾病下降、生命延长、生命质量改善、或熟悉HDV感染和或HDV相关疾病的治疗及相关事件的医疗工作者通常认定的正面效应。[0633]当疾病状态的一个或多个参数存在统计学显著的改善、或症候未恶化或被预期的症候未发展时，证实具有治疗或预防效果。作为一实例，疾病的可量测参数的顺利改变至少10%，且优选至少20%、30%、40%、50%或更多可以是有效治疗的指标。亦可使用本领域中熟知的对于给定疾病的实验动物模型，判断给定iRNA药物的效能或该药物的配制品。当使用实验动物模型时，当观察到标记物或症候的统计学显著下降时，则证实治疗的效能^[0634]可对受试者给药治疗量的iRNA，如约0.01mgkg、0.02mgkg、0.03mgkg、0.04mg或约50mgkgdsRNA。处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分D[0635]于某些方面中，举例而言，当本发明的组合物是包含本文所披露的dsRNA及脂质时，可对受试者给药治疗量的iRNA，如约0.01mgkg至约5mgkg、约0.01mgkg至约10mgkg、约0·05mgkg至约5mgkg、约0·05mgkg至约10mgkg、约0·lmgkg至约5mgkg、约0·lmgkg至约10mgkg、约0·2mgkg至约5mgkg、约0·2mgkg至约10mgkg、约0·3mgkg至约5mgkg、约0.3mgkg至约10mgkg、约0.4mgkg至约5mgkg、约0.4mgkg至约10mgkg、约0.5mgkg至约5mgkg、约0.5mgkg至约10mgkg、约lmgkg至约5mgkg、约lmgkg至约10mgkg、约1.5mgkg至约5mgkg、约1.5mgkg至约10mgkg、约2mgkg至约2.5mgkg、约2mgkg至约10mgkg、约3mgkg至约5mgkg、约3mgkg至约10mgkg、约3.5mgkg至约5mgkg、约4mgkg至约5mgkg、约4.5mgkg至约5mgkg、约4mgkg至约10mgkg、约4.5mgkg至约10mgkg、约5mgkg至约10mgkg、约5.5mgkg至约10mgkg、约6mgkg至约10mgkg、约6.5mgkg至约10mgkg、约7mgkg至约10mgkg、约7.5mgkg至约10mgkg、约8mgkg至约10mgkg、约8.5mgkg至约10mgkg、约9mgkg至约10mgkg、或约9.5mgkg至约lOmgkgc^处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0636]举例而言，该dsRNA可以约0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5·1、5·2、5·3、5·4、5·5、5·6、5·7、5·8、5·9、6、6·1、6·2、6·3、6·4、6·5、6·6、6·7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、或约1〇11^1^的剂量给药。处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0637]于其他方面中，举例而言，当本发明的组合物是包含本文披露的dsRNA及N-乙酰基半乳胺糖时，可对受试者给药治疗量的iRNA，如约0.1至约50mgkg、约0.25至约50mgkg、约0·5至约50mgkg、约0·75至约50mgkg、约1至约50mgkg、约1·5至约50mgkg、约2至约50mgkg、约2·5至约50mgkg、约3至约50mgkg、约3·5至约50mgkg、约4至约50mgkg、约4·5至约50mgkg、约5至约50mgkg、约7.5至约50mgkg、约10至约50mgkg、约15至约50mgkg、约20至约50mgkg、约20至约50mgkg、约25至约50mgkg、约25至约50mgkg、约30至约50mgkg、约35至约50mgkg、约40至约50mgkg、约45至约50mgkg、约0·1至约45mgkg、约0·25至约45mgkg、约0·5至约45mgkg、约0.75至约45mgkg、约1至约45mgkg、约1·5至约45mgkg、约2至约45mgkg、约2·5至约45mgkg、约3至约45mgkg、约3·5至约45mgkg、约4至约45mgkg、约4·5至约45mgkg、约5至约45mgkg、约7·5至约45mgkg、约10至约45mgkg、约15至约45mgkg、约20至约45mgkg、约20至约45mgkg、约25至约45mgkg、约25至约45mgkg、约30至约45mgkg、约35至约45mgkg、约40至约45mgkg、约0.1至约40mgkg、约0.25至约40mgkg、约0·5至约40mgkg、约0·75至约40mgkg、约1至约40mgkg、约1·5至约40mgkg、约2至约40mgkg、约2.5至约40mgkg、约3至约40mgkg、约3·5至约40mgkg、约4至约40mgkg、约4.5至约40mgkg、约5至约40mgkg、约7.5至约40mgkg、约10至约40mgkg、约15至约40mgkg、约20至约40mgkg、约20至约40mgkg、约25至约40mgkg、约25至约40mgkg、约30至约40mgkg、约35至约40mgkg、约0·1至约30mgkg、约0.25至约30mgkg、约0.5至约30mgkg、约0.75至约30mgkg、约1至约30mgkg、约1.5至约30mgkg、约2至约30mgkg、约2.5至约30mgkg、约3至约30mgkg、约3.5至约30mgkg、约4至约30mgkg、约4.5至约30mgkg、约5至约30mgkg、约7·5至约30mgkg、约10至约30mgkg、约15至约30mgkg、约20至约30mgkg、约20至约30mgkg、约25至约30mgkg、约0·1至约20mgkg、约0·25至约20mgkg、约0·5至约20mgkg、约0·75至约20mgkg、约1至约20mgkg、约1·5至约20mgkg、约2至约20mgkg、约2·5至约20mgkg、约3至约20mgkg、约3.5至约20mgkg、约4至约20mgkg、约4.5至约20mgkg、约5至约20mgkg、约7.5至约20mgkg、约10至约20mgkg、或约15至约20mgkg的剂量于一方面中，当本发明的组合物是包含本文披露的dsRNA及N-乙酰基半乳胺糖时，可对受试者给药治疗量的约10至约30mgkg的dsRNA处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0638]举例而言，可对受试者给药治疗量的iRNA，如约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0·8、0·9、1、1·1、1·2、1·3、1·4、1·5、1·6、1·7、1·8、1·9、2、2·1、2·2、2·3、2·4、2·5、2·6、2·7、2·8、2·9、3、3·1、3·2、3·3、3·4、3·5、3·6、3·7、3·8、3·9、4、4·1、4·2、4·3、4·4、4·5、4·6、4·7、4·8、4·9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6·8、6·9、7、7·1、7·2、7·3、7·4、7·5、7·6、7·7、7·8、7·9、8、8·1、8·2、8·3、8·4、8·5、8·6、8·7、8·8、8·9、9、9·1、9·2、9·3、9·4、9·5、9·6、9·7、9·8、9·9、10、10·5、11、11·5、12、12·5、13、13·5、14、14·5、15、15·5、16、16·5、17、17·5、18、18·5、19、19·5、20、20·5、21、21·5、22、22·5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29、29.5、30、31、32、33、34、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或约5011^1^。处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0639]于本发明的某些方面中，举例而言，当双链RNAi剂是包括修饰如，一个或多个位于三个接续核苷酸上的三个相同修饰的基序且一个此基序是位于该剂的裂解位点或邻近该裂解位点处、6个硫磷酸酯键联、以及配体时，该剂是以约0.01至约0.5mgkg、约0.01至约0.411^1^、约0.01至约0.311^1^、约0.01至约0.211^1^、约0.01至约0.111^1^、约0.0111^1^至约0.09mgkg、约0.01mgkg至约0.08mgkg、约0.01mgkg至约0.07mgkg、约0.01mgkg至约0·06mgkg、约0·01mgkg至约0·05mgkg、约0·02至约0·5mgkg、约0·02至约0·4mgkg、约0·02至约0·3mgkg、约0·02至约0·2mgkg、约0·02至约0·lmgkg、约0·02mgkg至约0·09mgkg、约0·02mgkg至约0·08mgkg、约0·02mgkg至约0·07mgkg、约0·02mgkg至约0·06mgkg、约0·02mgkg至约0·05mgkg、约0·03至约0·5mgkg、约0·03至约0·4mgkg、约0·03至约0·3mgkg、约0·03至约0·2mgkg、约0·03至约0·lmgkg、约0·03mgkg至约0·09mgkg、约0·03mgkg至约0·08mgkg、约0·03mgkg至约0·07mgkg、约0·03mgkg至约0·06mgkg、约0·03mgkg至约0·05mgkg、约0·04至约0·5mgkg、约0·04至约0·4mgkg、约0·04至约0·3mg1^、约0.04至约0.211^1^、约0.04至约0.111^1^、约0.0411^1^至约0.0911^1^、约0.0411^1^至约0·08mgkg、约0·04mgkg至约0·07mgkg、约0·04mgkg至约0·06mgkg、约0·05至约0·5mgkg、约0·05至约0·4mgkg、约0·05至约0·3mgkg、约0·05至约0·2mgkg、约0·05至约0·lmgkg、约0.05mgkg至约0.09mgkg、约0.05mgkg至约0.08mgkg、或约0.05mgkg至约0.07mgkg的剂量给药。处于所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分，如，该RNAi剂可以约0.015mgkg至约0.45mgkg的剂量给药至受试者D[0640]举例而言，该RNAi剂，如药物组合物中的RNAi剂，可以约0.01mgkg、0.0125mgkg、0·015mgkg、0·0175mgkg、0·02mgkg、0·0225mgkg、0·025mgkg、0·0275mgkg、0·03mgkg、0·0325mgkg、0·035mgkg、0·0375mgkg、0·04mgkg、0·0425mgkg、0·045mgkg、0.0475mgkg、0.05mgkg、0.0525mgkg、0.055mgkg、0.0575mgkg、0.06mgkg、0.0625mgkg、0·065mgkg、0·0675mgkg、0·07mgkg、0·0725mgkg、0·075mgkg、0·0775mgkg、0·08mgkg、0·0825mgkg、0·085mgkg、0·0875mgkg、0·09mgkg、0·0925mgkg、0·095mgkg、0·0975mgkg、0·lmgkg、0·125mgkg、0·15mgkg、0·175mgkg、0·2mgkg、0·225mgkg、0·25mgkg、0·275mgkg、0·3mgkg、0·325mgkg、0·35mgkg、0·375mgkg、0·4mgkg、0.425mgkg、0.45mgkg、0.475mgkg、或约0.5mgkg的剂量给药D处于前述所述值之间的值及范围也意在作为本发明的一部分。[0641]于某些方面中，该RNAi剂可以界于约IOOmg至约900mg之间的固定剂量给药，如界于约IOOmg至约850mg之间、界于约IOOmg至约800mg之间、界于约IOOmg至约750mg之间、界于约IOOmg至约700mg之间、界于约IOOmg至约650mg之间、界于约IOOmg至约600mg之间、界于约IOOmg至约550mg之间、界于约IOOmg至约500mg之间、界于约200mg至约850mg之间、界于约200mg至约800mg之间、界于约200mg至约750mg之间、界于约200mg至约700mg之间、界于约200mg至约650mg之间、界于约200mg至约600mg之间、界于约200mg至约550mg之间、界于约200mg至约500mg之间、界于约300mg至约850mg之间、界于约300mg至约800mg之间、界于约300mg至约750mg之间、界于约300mg至约700mg之间、界于约300mg至约650mg之间、界于约300mg至约600mg之间、界于约300mg至约550mg之间、界于约300mg至约500mg之间、界于约400mg至约850mg之间、界于约400mg至约800mg之间、界于约400mg至约750mg之间、界于约400mg至约700mg之间、界于约400mg至约650mg之间、界于约400mg至约600mg之间、界于约400mg至约550mg之间、或界于约400mg至约500mg之间。[0642]于某些方面中，该RNAi剂可以约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、200mg、约225mg、约250mg、约275mg、约300mg、约325mg、约350mg、约375mg、约400mg、约425mg、约450mg、约475mg、约500mg、约525mg、约550mg、约575mg、约600mg、约625mg、约650mg、约675mg、约700mg、约725mg、约750mg、约775mg、约800mg、约825mg、约850mg、约875mg、或约900mg的固定剂量给药。[0643]该iRNA可借由一段时间的静脉输液给药，如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、或约25分钟的时间。该给药可定期重复，举例而言，每周一次、每双周一次（即，每两周一次），持续一个月、两个月、三个月、四个月或更久。于初始治疗方案后，该治疗可减少给药频次。举例而言，于每周或每双周给药一次治疗三个月后，可每月给药一次治疗6个月或一年或更久。[0644]该iRNA的给药可降低血清和或肝脏HDVDNA、血清和或肝脏HDV抗原于诸如患者细胞、组织、血液、尿液或其他隔室中的存在，例如，降低至少约5%、6%、7%、8%、9%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或至少约99%或更多，至低于该试验的侦检含量。[0645]于给药全剂量的iRNA前，可对患者给药较小剂量，如5%输液，并监控副作用如过敏反应。于另一实例中，可监控患者的非期望的免疫刺激效应，如增加的细胞介素如，TNF-α或INF-α含量。[0646]这些治疗HDV的方法可进一步包含使用本领域中熟知的任意方法治疗HBV。于某些方面中，治疗HBV的方法是包含给药iRNA化合物，如本文中提供的以HBV基因为靶向的iRNA剂。[0647]因为对于HDV表达的抑制效应，根据本发明的组合物或由其制备的药物组合物可提升生命质量。[0648]本发明的iRNA可以“裸”型给药，其中，经修饰或未经修饰iRNA剂是直接悬浮于水性溶剂或适宜的缓冲剂中，作为“游离iRNA”。游离iRNA是于药物组合物的缺席下给药。该游离iRNA可处于适宜的缓冲溶液中。该缓冲溶液可包含醋酸盐、柠檬酸盐、醇溶蛋白prolamine、碳酸盐、或磷酸盐、或其任意组合。于一方面中，该缓冲溶液是磷酸盐缓冲溶液PBS。含有该iRNA的缓冲溶液的pH及渗透压可经调解，以使该溶液适用于给药至受试者D[0649]可替代地，本发明的iRNA是作为药物组合物给药，如dsRNA脂质体性配制品。[0650]将受益于HDV基因表达的下降和或抑制的受试者是那些患有HDV感染和或本文中披露的HDV相关疾病或病症者。[0651]对于将受益于HDV基因表达的下降和或抑制的受试者的治疗是包括治疗性及预防性治疗。[0652]本发明复提供iRNA剂或其药物组合物用于治疗经受益于HDV基因表达的下降和或抑制的受试者如患有HDV相关疾病的受试者的方法及用途，其是与其他药剂和或其它治疗方法合用，如与熟知药剂和或熟知治疗方法合用，例如，举例而言，当前用于治疗此类疾病者。[0653]举例而言，对经给药以HDV为靶向的第一RNAi剂或第一及第二RNAi剂的受试者，可进一步给药一种或多种以HBV为靶向的iRNA剂和或一种或多种借由非iRNA机制而起作用且可用于治疗HBV和或HDV感染的剂。例示性剂是包括免疫调节剂，其是借由诸如提升T-细胞辅助者活性、熟化B淋巴细胞、抑制T细胞压制剂、及提升I型HLA表达而刺激免疫系统的免疫调节剂。适宜的免疫调节剂是包括干扰素，其是具有多种特性，包括抗病毒效应、免疫调节效应、及抗增殖效应。[0654]举例而言，当前对于慢性B型肝炎的治疗是干扰素疗法。干扰素疗法是给药至已证实患有HBV感染至少6个月且其血液中肝脏酶AST及ALT含量上升及分裂能力旺盛的病毒的含量上升HBeAg和或HBVDNA阳性测试）。干扰素-α疗法是对约35%的患有慢性B型肝炎者产生长期且持续的疾病缓解，且肝脏酶正常化，活性感染的三种标记物HBeAg、HBVDNA、及HBsAg减少。患有急性HBV感染者、末期病人或其他主要医疗问题典型是不使用干扰素治疗。[0655]此外，对于患有HBV相关肝硬化的患者的干扰素疗法是显著减少特别是具有较大量血清HBVDNA的患者的肝细胞癌HCC比率。对于患有HBeAg阳性补偿性肝硬化的患者，于干扰素疗法后产生与存活率改善相关联的病毒学及生化学缓解。对于患有慢性HBV感染的患者，于使用干扰素治疗后的HBeAg的清除是与改善的临床结果相关联。[0656]疗法的标准持续时间为16周。于标准方案结束时显现低含量的病毒复制的患者从延长治疗中获得的益处最大。[0657]因此，于某些方面中，以一种或多种HDV基因为靶向的iRNA是与诸如可用于治疗本文中他处披露的HDV相关疾病的剂合用。[0658]举例而言，适用于治疗将受益于HDV表达的下降的受试者如患有HDV相关疾病的受试者的额外治疗剂及治疗方法是包括，以HDV基因组的不同部分为靶向的iRNA剂、抗病毒剂、核苷酸类似物、核苷类似物、逆转录酶抑制剂如，富马酸替诺福韦酯TDF、替诺福韦埃拉酸胺（Tenofoviralafenamide、拉米夫定（Lamivudine、阿德福韦二匹伏酯（Adefovirdipivoxil、恩替卡韦（EntecavirETV、替比夫定Telbivudine、AGX_1009、恩曲他滨emtricitabine、克来夫定clevudine、利托那韦酯ritonavirdipivoxil、洛布卡韦Iobucavir、泛昔洛韦（famvir、FTC、N_乙酰基-半脫氨酸NAC、PC1323、theradigm_HBV、胸腺素_α、及更昔洛韦（ganciclovir、免疫刺激剂如，聚乙二醇化干扰素a2aPEG-IFN_a2a、干扰素a-2b、重组人介白素-7、及类Toll受体7TLR7促效剂）、治疗性疫苗（如，GS-4774、DV-601、及TG1050、病毒进入抑制剂如，Myrcludex、抑制HbsAg的分泌或释放的寡核苷酸（如，REP9AC、壳蛋白抑制剂（如，Bay41-4109及NVR-1221、cccDNA抑制剂（如，IHVR-25、或用于治疗HBV相关疾病的其他治疗剂和或过程，如肝脏移植、化疗、前述任意者的组合。[0659]于某些方面中，以一种或多种HDV基因为靶向的第一iRNA剂是与以该HDV基因组的不同部分为靶向的第二iRNA剂组合给药。举例而言，该第一RNAi剂是包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，且该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及，该第二RNAi剂是包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，且该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物;其中，该第一正义链包含选自表11、12、31、及32任一者中任一正义序列所组成组的序列（或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列），以及，该第一反义链包含选自表11、12、31、及32任一者中任一反义序列所组成组的序列（或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列）；其中，该第二正义链包含选自表11、12、31、及32任一者中任一正义序列所组成组的序列或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列），以及，该第一反义链包含选自表11、12、31、及32任一者中任一反义序列所组成组的序列（或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列）。[0660]于一方面中，该第一及第二正义链是各自独立包含选自由来自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1中的任一正义序列所组成组的序列（或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列）。[0661]于另一方面中，该第一及第二反义链是各自独立包含选自由来自六0-70260.1、八0-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一反义序列所组成组的序列（或，其整体长度的至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%与前述核苷酸序列相同的核苷酸序列）。[0662]于一方面中，该第一及第二正义链的全部核苷酸和或该第一及第二反义链的全部核苷酸是包含修饰。[0663]于一方面中，这些经修饰的核苷酸的至少一者选自下组，该组由以下各项组成：3’-端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0-甲基修饰核苷酸、2氟修饰核苷酸、2脱氧修饰核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰核苷酸、2’-O-烯丙基修饰核苷酸、2’-C-烷基修饰核苷酸、2’-羟基修饰核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰核苷酸、2’-0-烷基修饰核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢卩比喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己稀基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。[0664]对经给药第一RNAi剂或第一及第二RNAi剂的受试者可进一步给药一种或多种以HBV为靶向的iRNA剂、抗病毒剂、逆转录酶抑制剂如，富马酸替诺福韦酯TDF、替诺福韦埃拉酸胺（Tenofoviralafenamide、拉米夫定（Lamivudine、阿德福韦二匹伏酯（Adefovirdipivoxil、恩替卡韦EntecavirETV、替比夫定Telbivudine及AGX-1009、免疫刺激剂如，聚乙二醇化干扰素a2aPEG-IFN_a2a、干扰素a-2b、重组人介白素-7、及类Toll受体7TLR7促效剂）、治疗性疫苗（如，GS-4774、DV-601、及TG1050、病毒进入抑制剂（如，Myrcludex、抑制HbsAg的分泌或释放的寡核苷酸如，REP9AC、壳蛋白抑制剂如，Bay41-4109及NVR-1221、cccDNA抑制剂如，IHVR-25或用于治疗HBV相关疾病的其他治疗剂和或过程，如肝脏移植、化疗、前述任意的组合。[0665]于一方面中，本发明的方法是包括对患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者给药逆转录酶抑制剂。于另一方面中，本发明的方法是包含对患有HDV感染和或HDV相关疾病的受试者给药逆转录酶抑制剂及免疫刺激剂。[0666]该iRNA剂及额外治疗剂和或治疗可同时给药和或于相同组合中给药，如肠道外给药，或该额外治疗剂可作为独立组合物的一部分而给药或独立给药和或借由本领域中熟知或本文中披露的方法给药。[0667]本发明还提供使用本发明的iRNA剂和或含有本发明的iRNA剂的组合物来降低和或抑制细胞内HDV基因表达的方法。于其他方面，本发明是提供本发明的iRNA和或含有本发明的iRNA的组合物于降低和或抑制细胞内HDV基因表达中的用途。于再其他方面，是提供本发明的iRNA和或包含本发明的iRNA的组合物于制造用于降低和或抑制细胞内HDV基因表达的药品中的用途。于又其他方面，本发明是提供本发明的iRNA和或包含本发明的iRNA的组合物于降低和或抑制细胞内HDV复制中的用途。于再其他方面，是提供本发明的iRNA和或包含本发明的iRNA的组合物于制造用于降低和或抑制细胞内HDV复制中的用途。这些方法及用途是包括使细胞与本发明的iRNA如dsRNA接触，并将该细胞保持足够时间以获得HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制细胞内HDV基因的表达或抑制细胞内HDV复制。[0668]基因表达的下降可借由本领域中熟知的任意方法评测的。举例而言，可借由下述方法测定HDV表达的下降:使用具有该技艺通常知识者熟知的常规方法如北方墨点术、qRT-PCR测定HDV的mRNA表达含量;使用具有该技艺通常知识者熟知的常规方法如西方墨点术、免疫学技术、流动式细胞量测方法、ELISA测定HDV的蛋白质含量;和或测定HDV的生物学活性。[0669]于本发明的方法及用途中，该细胞可于体外或体内接触，S卩，该细胞可处于受试者体内。[0670]适用于使用本发明的方法治疗的细胞可以是表达HDV基因的任意细胞，如感染HDV的细胞或包含表达载体的细胞，该表达载体是包含HDV基因组或HDV基因的片段。适用于本发明的方法及用途的细胞可以是哺乳动物细胞，如灵长类动物细胞如，人细胞或非人灵长类动物细胞，如猴细胞或黑猩猩细胞）、非灵长类动物细胞如，牛细胞、猪细胞、胳盤细胞、骆马细胞、马细胞、山羊细胞、兔细胞、绵阳细胞、仓鼠细胞、豚鼠细胞、猫细胞、狗细胞、大鼠细胞、小鼠细胞、狮细胞、虎细胞、熊细胞或水牛细胞）、鸟细胞如，鸭细胞或鹅细胞）、或鲸细胞。于一方面中，该细胞是人细胞，如人肝脏细胞。[0671]细胞内HDV基因表达可被抑制至少约5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、或约100%，8口，至低于试验的侦检含量。[0672]细胞内HDV复制可被抑制至少约5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、或约100%，8卩，至低于试验的侦检含量。[0673]本发明的体内方法及用途可包括对受试者给药含有iRNA的组合物，其中，该iRNA是包括核苷酸序列，该序列与待治疗的哺乳动物的HDV基因的RNA转录本的至少一部分互补。当待治疗的生物为人时，可借由本领域中熟知的任意手段给药，这些手段是包括，但不限于，皮下、静脉内、经口、腹膜内、或肠道外途径，包括颅内（如，心室内、薄壁组织内、及鞘内）、肌肉内、透皮、气道气溶胶）、鼻腔内、直肠内、及外用包括颊内及舌下给药。于某些方面中，这些组合物是借由皮下注射给药。于某些方面中，这些组合物是借由静脉输液或注射给药。于其他方面中，这些组合物是借由肌肉注射给药。[0674]于某些方面中，是经由积存注射depotinjection给药。积存注射可在长时间段内以一致的途径释放iRNA。因此，积存注射可降低获得所欲效果如对于HDV的所欲抑制、或治疗性或预防性效果所需的用药频率。积存注射亦可提供更一致的血清浓度。积存注射可包括皮下注射或肌肉注射。于优选的方面中，积存注射是皮下注射。[0675]于某些方面中，是经由栗给药。该栗可以是外加栗或经手术内植的栗。于某些方面中，该栗是皮下内植的渗透栗。于其他方面中，该栗是输液栗。输液栗可用于静脉、皮下、动脉或硬膜输液。于优选的方面中，输液栗是皮下输液栗。于其他方面中，该栗是将iRNA递送至肝脏的经手术内植的栗。[0676]可基于所希望的为局部或全身性治疗且基于待治疗的区域而选择给药模式。可选择给药路径及位点亦提升靶向。[0677]—方面，本发明还提供抑制哺乳动物如人体内的HDV基因表达的方法。本发明还提供包含以哺乳动物细胞内HDV基因为靶向的iRNA如dsRNA的组合物，其是用于抑制该哺乳动物体内的HDV基因表达。另一方面，本发明是提供以哺乳动物细胞内HDV基因为靶向的iRNA如dsRNA在制造用于抑制哺乳动物体内HDV基因表达的药品中的用途。[0678]这些方法及用途是包括对哺乳动物如人给药包含以该哺乳动物细胞内HDV基因为靶向的iRNA如dsRNA的组合物，并维持该哺乳动物足够的时间以获得该HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制该哺乳动物体内的HDV基因表达。[0679]可借由本领域中熟知的任意方法如本文中披露的qRT-PCR，评估经给药iRNA的受试者的末梢血液样本中基因表达的下降。可借由该技艺汇总熟知的任意方法，且借由本文中披露的方法如ELISA或西方墨点术，评估蛋白质生产的下降。于一方面中，穿刺肝活组织检查样本是作为组织材料而用于监控HDV基因和或蛋白质表达的下降。于另一方面中，血液样本是作为组织材料用于监控HDV基因和或蛋白质表达的下降。[0680]于一方面中，借由施行如本领域中熟知策略的5’-RACE或修饰，完成于给药iRNA剂后的体内革G标的RISC介导的裂解的验证LashamAetal.，（2010NucleicAcidRes.，383p-el9Zimmermannetal·2006Nature441:111-4〇[0681]本发明是借由下述实施例进一步例示性说明，但这些实施例不应解释为限制。本申请通篇所引用的全部参考文献、专利及已公开的专利申请案的整体内容以及所列图式及序列是借由引用方式而并入本文。[0682]实例[0683]实例I:iRNA的合成[0684]试剂的来源[0685]本文中，若试剂的来源未具体提供，则该试剂可自任意分子生物学用试剂的供货商以用于分子生物学应用的质量纯度而获得。[0686]转录本[0687]siRNA设计[0688]对于以HBV为靶向的siRNA设计的选择是由两个主要因素驱动:采用与全部已知血清型的大量公共HBV序列A至H的超过90%分数近乎完美匹配的SiRNA的a潜能及b期望。对于siRNA选择的备选者是关于NCBIHBV参考基因组序列NC_003977.IGenBankAccessionNo.GI:21326584SEQIDNO:1而确定。SEQIDNO:1的反向互补是提供于SEQIDNO:2中。设计、合成并体外筛选出含有结构活性修饰、包括多种2’-0-甲基及2’-氟取代方案、且以编码表面抗原HbSAg及HBV聚合酶的HBV基因组的两相邻区域为中心的第一套siRNA。设计、合成并筛选第二套siRNA，其亦额外靶标区域为靶向，且尤其关注SEQIDNO:1的位置1581至1599，这些位置是除了编码HbSAg及聚合酶外，亦编码X基因。[0689]B型肝炎病毒基因组DNA的序列、完整序列、单离22Y04HCCGenBankAccessionNo.，GI:3582357及其反向互补是分别提供于SEQIDNO.3及SEQIDNO.4中。[0690]未经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表3、14、24、及27中。[0691]经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表4、6、15、25、及28中。[0692]siRNA合成[0693]使用固体支撑物介导的亚磷酰胺化学于Mermade192合成器BioAutomation上以1微摩尔ymol规格合成HBVSiRNA序列。该固体支撑物是载有订制GalNAc配体的控制孔玻璃500埃A或通用固体支撑物AMbiochemical。辅助合成试剂2’-FRNA、2’-0-甲基RNA、及脱氧亚磷酰胺是自Thermo-FisherMilwaukee，WI及HongeneChina获得。2’-F、2’-0-甲基、GNA二醇核酸）、5’-磷酸酯、及无碱基修饰是采用相应亚磷酰胺而引入。接合单链的3’-GaINAc的合成是于经GaINAc修饰的CPG支撑物上施行。订制CPG通用固体支撑物是用于反义单链的合成。全部亚磷酰胺（IOOmM乙腈溶液）的偶合时间是5分钟min，采用5-乙基硫-IH-四唑ETT作为活化剂0.6M乙腈溶液）。使用3-二甲基氨基-亚甲基氨基-3H-1，2,4_二噻卩坐-3-硫酮（DDTT，自ChemgenesWilmington,MA,USA获得）于无水乙腈卩比啶1:lvv中的50mM溶液生成硫磷酸酯。氧化时间为3分钟。全部序列是合成为最终DMT基团被移除（“DMT去除”）。[0694]固相合成完成后，寡核糖核苷酸是自该固体支撑物裂解，并使用200微升μ〇水性甲胺试剂于60°C于密闭的96深孔盘中去保护20分钟。于裂解及去保护步骤结束时，将该合成板带至室温，并借由加入1毫升mL的乙腈：乙醇混合物9:1而沈淀的。将这些板于-80°C冷却2小时，于多通道移液管的辅助下小心倾析上清液。寡核苷酸团块是再次悬浮于20mMNaOAc缓冲液中，使用5mLHiTrap尺寸排阻管柱GEHealthcare于配备A905自动取样器及Frac950分级收集器的AKTA纯化器系统上脱盐。于96孔板中收集经脱盐的样本。来自每一序列的样本是借由LC-MS分析以证实其本体，以UV260nm进行定量，且借由IEX色层分析术分析所选套组的样本以测定纯度。[0695]HBV单链的黏合annealing是于Tecan自动移液器上施行。正义单链与反义单链的等摩尔混合物是经合并，且于96孔盘中黏合。于合并这些互补性单链后，将该96孔板紧紧密封，于烘箱内于l〇〇°C加热10分钟，并使其在2至3小时内缓慢冷却至室温。每一双螺旋于IXPBS中的浓度是标准化至ΙΟμΜ。[0696]实例2.siRNA双螺旋的体外筛选[0697]细胞培养及转染[0698]Cos7细胞ATCC，Manassas，VA是于37°C、5%⑶2气氛下、以10%FBS补充的DMEMATCC中生长至接近合流，再借由胰蛋白酶化作用自该板释放。使用Lipofectamine2000Invitrogen,CarlsbadCA.cat#11668_019，将在含有约I.Ikb的HBV基因组序列的psiCHECK2质体中生成的荧光素酶构造转染至15xl04细胞内。对于96孔盘的每孔，是将〇·2μ1的Lipofectamine加入处于14.8μ1的Opti-MEM中的IOng质体载体中，将该复合物于室温放置15分钟。随后将该混合物加入这些细胞中，这些细胞是再次悬浮于80μ1的新鲜完整培养基中。约24小时后，移除培养基，以siRNA再次转染这些细胞。每一siRNA是转染至先前已经以psiCHECK2-HBV载体转染的细胞中，这些载体是与该siRNA完美匹配。siRNA转染是借由下述者进行：将14.8μ1的Opti_MEM加上0·2μ1的LipofectamineRNAiMax每孔Invitrogen,CarlsbadCA.cat#13778-150加入5μ1的siRNA双螺旋每孔，置于96孔盘中，并于室温培育15分钟。随后，将该混合物加入先前已经以psiCHECK2-HBV质体转染的细胞中，该质体是与该siRNA序列完美匹配。将细胞培育24小时，再进行荧光素酶量测。[0699]以IOnM及0.OlnM最终双螺旋浓度施行单剂实验。[0700]Z_-C7〇®荧光素酶试验[0701]将siRNA转染24小时后，进行萤火虫转染对照）及RinelIa融合至HBV靶标序列）荧光素酶量测。首先，自细胞移除培养基。随后，借由将等于培养基体积的75μ1的荧光素酶试剂加入每一孔中并混合，而量测萤火虫荧光素酶活性。该混合物是于室温培育30分钟后，于SpectramaxMolecularDevices上量测发光（500nm，以侦检萤火虫荧光素酶讯号。Renilla荧光素酶活性是借由下述量测：将75μ1的室温试剂加入每一孔中，培育该盘10至15分钟后，再次量测发光以测定Renilla荧光素酶讯号。该试剂是淬灭萤火虫荧光素酶讯号并维持Renilla荧光素酶反应的发光。借由将每孔的RenillaHBV讯号与每孔的标准化萤火虫对照讯号比较而测定siRNA活性。随后，相对于以相同载体转染但未经siRNA处理或以非靶向siRNA处理的细胞而评估siRNA活性的规模。全部转染是以η为2或更大者进行。[0702]基本上相同的方法是用以筛选以HDV为靶向的siRNA。[0703]表5是显示以经培育的HBViRNA转染的Cos7细胞的单剂筛选结果。数据是表达为剩余mRNA相对于负对照的百分比。[0704]表2.于核酸序列表述中使用的核苷酸单体的缩写。应理解，当此类单体存在于寡核苷酸中时，这些单体是借由5’-3磷酸二酯键相互键联。[0731][0732]表5.使用Dual-Gloi荧光素酶试验的HBV单剂筛选[0738][0739]实例3.额外的iRNA双螺旋的合成及体外筛选[0740]如上所述合成以HBV基因组为靶向的额外iRNA分子。额外经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表6中。[0741]如上所述，借由将此类双螺旋转染入HepG2.215及Hep3B细胞中并进行萤火虫转染对照）及Rinella融合至HBV靶标序列）荧光素酶量测而施行这些双螺旋的单剂筛选。于HepG2.2.15细胞中的试验的结果是显示于表7中，而于Hep3B细胞中的试验的结果是提供于表8中。[0743][0744]表7.使用Dua丨-Gh®荧光素酶试验于HepG2.2.15细胞中的HBV单剂筛选[0746]表8.使用Dual-GlO命荧光素酶试验于Hep3B细胞中的HBV单剂筛选[0747][0748][0749]亦使用两种分析方法，即去污溶酶体tritosome稳定性试验及胞质液稳定性试验，来试验此类双螺旋的子集的体外稳定性。[0750]对于去污溶酶体稳定性试验，是将大鼠肝脏去污溶酶体（Xeη〇tech订制产品PR14044融化至室温，并于20mM柠檬酸钠pH5.0缓冲液中稀释至0.5单位mL酸磷酸酯酶。借由将IOOyL的0.5单位mL酸磷酸酯酶去污溶酶体与25yL的0.4mgmLsiRNA样本于微量离心管中混合，并于设定为37°C及300rpm的埃朋道夫热混器（eppendorfThermomixer套件中培育24小时，而制备24小时样本。于培育24小时后，将300yL的Phenomenex裂解加样缓冲液Cat.#AL0-8498及12.5yL的0.4mgmL内标siRNA加入每一样本中。借由将IOOyL的0.5单位mL酸磷酸酯酶去污溶酶体与25yL的0.4mgmLsiRNA样本、300yL的Phenomenex裂解加样缓冲液及12.5yL的0.4mgmL内标siRNA混合，而制备时间0小时样本。使用PhenomenexClarityOTX启动套组Cat.#KS0-8494自24小时样本及0小时样本萃取siRNA。这些样本经萃取后，将这些样本转移至微量离心管，并使用LabconcoCentriVap浓缩器（Cat.#7810010干燥。随后，将这些样本再次悬浮于500yL的无核酸酶的水中。50yL的每一样本是于具有安捷伦AgilentTechnologies6130四极LCMS的安捷伦1260亲和双相LC上运行。遵循下述时间表以〇.40〇111171]1；[11运行12.20分钟的四栗方法：[0752]遵循下述时间表以0.700mLmin运行12.20min的双栗方法：[0754]左右两栏皆设定为75.00°CWV讯号是于260nm波长量测。使用下述等式计算每链剩余的百分比：[0755]%链剩余=100*峰面积链24h峰面积御h*峰面积雛24h峰面积雛Qh。[0756]对于胞质液稳定性试验，是将雌性大鼠肝脏胞质液XenotechCat·#R1500·C融化至室温，并于50mMTris缓冲液:HC1pH7.4、5mMMgC12中稀释至lmgmL。借由将IOOyL的lmgmL胞质液与25yL的0.4mgmLsiRNA样本于微量离心管中混合，并于设定为37°C及300rpm的埃朋道夫热混器中培育24小时，制备24小时样本。于培育24小时后，将300yL的Phenomenex裂解加样缓冲液Cat·#AL0_8498及12·5yL的0·4mgmL内标siRNA加入每一样本中。借由将IOOyL的lmgmL胞质液与25yL的0·4mgmLsiRNA样本、300yL的Phenomenex裂解加样缓冲液、及12·5yL的0·4mgmL内标8丨1?财混合，制备0小时样本。使用？11611〇1116116叉ClarityOTX启动套组Cat.#KS0-8494自24小时样本及0小时样本萃取siRNA。这些样本经萃取后，将这些样本转移至微量离心管，并使用LabconcoCentriVap浓缩器（Cat.#7810010干燥。随后，将这些样本再次悬浮于500yL的无核酸酶的水中。50yL的每一样本是于具有安捷伦6130四极LCMS的安捷伦1260亲和双相LC上运行。遵循下述时间表以0.400mLmin运行12.20分钟的四栗方法：[0757][0758]遵循下述时间表以0.700mLmin运行12.20min的双栗方法：[0759][0760]左右两栏皆设定为75.00°CWV讯号是于260nm波长量测。使用下述等式计算每链剩余的百分比：[0761]%链剩余=100*峰面积链24h峰面积_h*峰面积雛24h峰面积雛Qh。[0762]24小时去污溶酶体稳定性试验的结果是提供于表9中，而24小时胞质液稳定性试验的结果是提供于表10中。[0763]表9.24小时去污溶酶体稳定性试验[0764][0765][0766]表10.24小时胞质液稳定性试验[0767][0768][0769]实例4.以HDV为靶向的iRNA双螺旋的合成及体外筛选[0770]对于以HDV为靶向的SiRNA设计的选择是由两个主要因素驱动:采用与全部已知血清型的大量公共HDV序列（I至VIII或1至8的超过90%分数近乎完美匹配的siRNA的a潜能及b期望。然而，由于多个HDV分支及小基因组之间的低含量保存，难以作出有效以多个HDV分支为靶向的序列的选择。用于多个HDV分支1至8的例示性序列是提供于SEQIDN0:29、31、33、35、37、39、41、及43中。其反向互补是提供于SEQIDN0:30、32、34、36、38、40、42、及44中。[0771]如上所述合成以HDV基因组为靶向的iRNA分子。未经修饰的HDV正义及反义链序列的详细列述是显示于表11中，而经修饰的HDV正义及反义链序列的详细列述是显示于表12中。上述的使用Dual-Glow;荧光素酶试验对于此类剂的单剂筛选的结果是显示于表13中。[0775][0776]表13.使用Dua丨-Glo®荧光素酶试验进行HDV单剂筛选[0777][0778]实例5.以HBV为靶向的额外siRNA双螺旋的合成及体外筛选[0779]如上所述设计并合成以HBV基因组为靶向的额外iRNA分子。额外的未经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表14中，且经修饰的HBV正义及反义链序列是显示于表15中D[0780][0781][0782]如上所述，使川Dual-Glo®荧光素酶试验施行此类iRNA双螺旋的初步单剂筛选。在以培育的HBViRNA转染的Cos7细胞中的此筛选结果是显示于表16中。数据是表达为24小时剩余mRNA相对于负对照的百分比。[0783]表16.使用Dual-_Glft®荧光素酶试验的Cos7细胞中的HBV单剂初步筛选[0785]ND-未测试[0786]亦如上述者使用Dual-Glo㊣荧光素酶试验分析测试此类双螺旋对于使病毒RNA沉默的剂量响应。此类试验中使用的双螺旋的剂量是50nM、8.333333333nM、1.388888889nM、0.23148148InM、0.038580247nM、0.006430041nM、0.001071674nM、0.000178612nM、2·97687χ10_5ηΜ、4·96145χ10_6ηΜ、8·26909χ10_7nM、及1.37818EX10_7nM，其是表示此类双螺旋自50nM起始的1比6倍逐级稀释的12个剂量。在以指定的HBViRNA转染的Cos7细胞内的筛选结果是显示于表17中。数据是表达为24小时剩余mRNA相对于负对照的百分比。[0787]表17.使用Dual-Glo®荧光素酶试验于C〇s7细胞内的剂量响应筛选[0788][0789]1来自5至7个生物学副本的三次平行试验的平均值[0790]ND-未测试[0791]亦试验此类双螺旋的体外效能及潜力。特别地，测定此类双螺旋对于使经转染的HepG2.2.15及Hep3B细胞溶解产物中病毒RNA沉默及使HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg沉默的剂量响应。细胞是以自50nM至lx10_7nM范围的12个独立剂量转染，于转染72小时后，使用引物探针对测定病毒RNA的含量以侦检PORF和或S0RF。使用ELISA试验测定HBsAg的含量。[0792]使用指定的双螺旋使PORF病毒RNA于HepG2.2.15细胞中沉默的结果是提供于表18中。使用指定的双螺旋使SORF病毒RNA于HepG2.2.15细胞中沉默的结果是提供于表19中。HBsAg于H印G2.2.15中沉默的结果是提供于表20中。[0793]使用指定的双螺旋使PORF病毒RNA于Hep3B细胞中沉默的结果是提供于表21中。[0794]表18.于HepG2.2.15细胞中的剂量响应筛选[0796][0797]ND-未测试[0798]表19.于HepG2.2.15细胞中的剂量响应筛选[0800]ND-未进行[0801]表20.于HepG2.2.15细胞中的剂量响应筛选[0802][0804]ND-未测试[0805]表21.于Hep3B细胞内的剂量响应筛选[0803][0806][0807]ND-未测试[0808]如上所述，亦使用两种试验，即去污溶酶体稳定性试验及胞质液稳定性试验，来分析测试此类双螺旋的体外稳定性。此类试验的结果是提供于表22中。[0809]表22.24小时去污溶酶体稳定性试验及胞质液稳定性试验[0810][0811]亦于HepG2.215细胞内施行此类双螺旋的多种组合的剂量响应筛选。用于此类试验的这些双螺旋的剂量是50nM、8.333333333nM、1·388888889ηΜ、0·231481481nM、0·038580247ηΜ、0·006430041ηΜ、0·001071674ηΜ、0·000178612ηΜ、2·97687χ10_5nM、4·96145χ10_6ηΜ、8·26909χ10_7nM、及1.37818EX10_7nM，其是表示此类双螺旋自50nM起始的1比6倍逐级稀释的12个剂量。于此类双螺旋转染72小时之后，如上所述测定病毒RNAPORF及S0RF的含量及所分泌的HBsAg的含量。此类试验的结果是提供于表23中。[0812][0813]实例6.以HBV为靶向的额外siRNA双螺旋的合成及体外筛选[0814]如上所述，设计且合成以HBV基因组的XORF为靶向的额外iRNA分子。额外未经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表24中。额外经修饰的HBV正义及反义链序列的详细列述是显示于表25中。[0815]唆r备舉«¥!mm§^92表]soX§$$-^,¾]6722880O1_II_I[0828][0829]1被沉默的病毒RNA的数目[0830]实例6.iRNA双螺旋的体内筛选[0831]使用上述的AAV-HBV小鼠模型评估引导iRNA剂子集的体内效能。对AAV-HBV小鼠给药3mgkg的单剂AD-66019、AD-65375、AD-65047、AD-65377、AD-66111、AD-65421、或AD-66110,且于给药前及给药5天后及10天后，测定这些动物血清内的HBsAg含量。作为对照，对AAV-HBV小鼠给药3mgkg的以小鼠大鼠转甲状腺素蛋白（mrTTR为靶向的单剂dsRNA。此类实验的结果表明，在单独给药此类剂之后，HBsAg的血清含量下降。[0832]在给药3mgkg的单剂5天及10天后，测定给药前HBsAg剩余的百分比。在给药5天及10天后，皆观察到HBsA的显著下降，下降值为至少AD-eSSTSjD-eSAOSJD-eSAOTjD-eSASI、AD-66019、及AD-66111。[0833]至少部分地基于上揭体外及体内试验结果，是选择使3HBVRNA沉默的AD-65403以及使X基因沉默的AD-66810,进一步分析其在HBV单一疗法或组合疗法中的用途。[0834]于HBV感染的AAV-HBV小鼠模型中，3mgkg的单剂AD-65403是达成潜力及对HBsAg的具体减量。特别地，3mgkg的皮下单剂AD-65403是对HBsAg含量达成高达3.91〇g1Q的降低，且在给药单剂5至10天后，HBsAg平均降低1.81ogi〇。[0835]于HBV感染的AAV-HBV小鼠模型中，0·3mgkg、lmgkg、3mgkg、或9mgkg单剂的AD-66810是达成潜力及对HBsAg的具体减量，尤其是较高剂量的AD-66810。[0836]于HBV感染的AAV-HBV小鼠模型中，每周以3mgkg给药三次AD-66810，是于超过4个月的期间内达成潜力及对HBsAg的具体减量。[0837]实例7.以HDV为靶向的额夕卜iRNA双螺旋的体外筛选[0838]体外筛选：[0839]细胞培养及转染：[0840]Cos7细胞ATCC，Manassas，VA是于37°C、5%⑶2气氛下、以10%FBS补充的DMEMATCC中生长至接近合流，再借由胰蛋白酶化作用自该板释放。使用Lipofectamine2000Invitrogen，CarlsbadCA.cat#11668-019，将在含有HDVAY633627衍生序列（表30的psiCHECK2质体中生成的Dual-G丨ο®荧光素酶构建构建体转染至4xIO3细胞内。对于384孔板的每孔，〇.15μ1的Lipofectamine、4ng的载体、及适宜量的表32中提供的一种经修饰的siRNA剂混合于15μ1最终体积的Opti-MEM中，并使该复合物于室温放置15分钟。接着，该混合物是随后以细胞的悬浮液补充35μ1，于完全介质中）。于进行荧光素酶量测之前，细胞是经培育48小时。[0841]提供于表32中的这些剂的未经修饰序列是提供于表3中，这些序列是如上所述合成。[0842]Dual-Glo®荧光素酶试验[0843]使用Dual-Glo®焚光素酶试验（Promega，Madison，Wisconsin，#E2980量测萤火虫转染对照）及Renilla融合至HBV靶标序列）荧光素酶。首先，自细胞移除培养基。随后，借由每孔加入Ι0μ1的完全培养基与Ι0μ1的Dual-Glo_荧光素酶试剂的混合物而量测萤火虫焚光素酶活性。该混合物于室温培育10至15分钟，再于SpectramaxMolecularDevices上量测发光500nm以侦检萤火虫荧光素酶讯号。借由下述者量测Renilla荧光素酶活性：将IOyl的室温Dual-Glo®St〇pGlo®试剂加入每一孔中，并将该板培育10至15分钟，再次量测发光以测定Renilla荧光素酶讯号。该Dual-Glo®St〇pGlo知试剂是淬灭萤火虫荧光素酶讯号并维持Renilla荧光素酶反应的发光。借由将每孔的RenillaHDV讯号与每孔的标准化萤火虫（对照）讯号比较而测定siRNA活性。随后，相对于以相同载体转染但未经siRNA处理的细胞假而评估siRNA活性的规模。全部转染是以η为2或更大者进行。借由上揭方法测定，足以将相关Renilla荧光素酶表达抑制50%IC5q的siRNA浓度是一定范围的浓度40fM至IOnM。[0844]单剂量筛选的结果是提供于表33中，且剂量响应筛选的结果是提供于表34中。[0845]表30.用于荧光素酶质体中的HDV序列[0846][0870][0871]表34.于Cos7细胞中的剂量响应筛选[0872][0873]等效物[0874]那些熟识该技艺者应知悉或能使用不超出例行试验者而探知多种等同于本文中披露的的具体方面及方法。此类等效者是倾向于为后附申请专利范围的范畴所涵盖。

权利要求：1.一种双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达，其中，该双链RNAi剂包含形成双链区域的选自下组的正义链及反义链，该组由以下各项组成a正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:29的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:30的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:31的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:32的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；c正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:33的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:34的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:35的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:36的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；e正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:37的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:38的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；f正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:39的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:40的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；g正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:41的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:42的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:43的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:44的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；以及⑴正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:2551的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:2552的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；其中，该正义链的实质上全部的核苷酸及该反义链的实质上全部的核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。2.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该反义链中的错配核苷酸。3.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该正义链中的错配核苷酸。4.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是经修饰的核苷酸。5.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该区域包含至少15个连续核苷酸，其与表11、12、31及32任一者中列述的任一序列差异不多于3个核苷酸。6.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该区域包含至少15个连续核苷酸，其与40-70260.1、40-70232.1、40-70249.1、40-70244.1、八0-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199·I、AD-67202·I、AD-67208·I、AD-67210·I、AD-70259·I、AD-70267·I、AD-70272·I、AD-70271·I、AD-70268·I、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、及AD-70275·I的任意一个正义链及反义链差异不多于3个核苷酸。7.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该区域包含至少15个连续核苷酸，其与40-70260.1、40-70232.1、40-70249.1、40-70244.1、八0-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、及AD-70295.1的任意一个正义链及反义链差异不多于3个核苷酸。8.如权利要求1至7中任一项所述的双链RNAi剂，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成:3’_末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0_甲基修饰的核苷酸、2氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。9.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，至少一个链包含至少1个核苷酸的3’突出端。10.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，至少一个链包含至少2个核苷酸的3’突出端。11.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是15至30对核苷酸对。12.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是17至23对核苷酸对。13.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是17至25对核苷酸对。14.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是23至27对核苷酸对。15.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是19至21对核苷酸对。16.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该双链区域的长度是21至23对核苷酸对。17.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，每一链是具有15至30个核苷酸。18.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，每一链是具有19至30个核苷酸。19.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该配体是20.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是如以下方案所示的接合至该配体其中，X是O或S。21.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是选自表11、12、31及32的任一者中列述的RNAi剂组。22.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一者所组成的组。23.—种双链RNAi剂，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内的表达，其中，该双链RNAi剂包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含表11、12、31及32的任一者中提供的任一正义序列，该反义链包含表11、12、31及32的任一者中提供的任一反义序列，其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。24.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一者所组成的组。25.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.l、AD-70244.UAD-70272.UAD-70228.UAD-70255.l、AD-70278.1、及AD-70295.1的任一者所组成的组。26.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸包含修饰。27.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成:3’_末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0_甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。28.如权利要求27所述的双链RNAi剂，其中，该5’-磷酸酯模拟物是5’-乙烯基磷酸酯5,-VP〇29.如权利要求23至28中任一项所述的双链RNAi剂，其中，该配体是30.如权利要求29所述的双链RNAi剂，其中，该RNAi剂是如以下方案所示的接合至该配体其中，X是O或s。31.—种组合物，其包含两种或更多种用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达的双链RNAi剂，其中，每一双链RNAi剂是独立包含形成双链区域的选自下组的正义链及反义链，该组由以下各项组成a正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:29的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:30的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:31的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:32的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；c正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:33的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:34的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:35的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:36的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；e正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:37的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:38的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；f正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:39的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:40的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；g正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:41的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:42的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；⑹正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDN0:43的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:44的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；以及⑴正义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:2551的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸;且反义链包含至少15个连续核苷酸，与SEQIDNO:2552的核苷酸序列差异不多于3个核苷酸；其中，该每一正义链的实质上全部的核苷酸及该每一反义链的实质上全部的核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该每一正义链是独立接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。32.如权利要求31所述的组合物，其中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该反义链中的错配核苷酸。33.如权利要求31所述的组合物，其中，该反义链的核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个或多个是该正义链中的错配核苷酸。34.如权利要求31所述的组合物，其中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸是经修饰的核苷酸。35.如权利要求31所述的组合物，其中，该正义链及该反义链包含互补性区域，该区域包含至少15个连续核苷酸，其与表11、12、31及32的任一者中提供的任一序列差异不多于3个核苷酸。36.如权利要求31所述的组合物，其中，该RNAi剂是选自六0-70260.10-70232.1、八0-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232.1、AD-70256.1、AD-70257.1、或AD-70275.1的任一者所组成的组。37.如权利要求31所述的组合物，其中，该RNAi剂是选自40-70260.10-70232.1、八0-70249·I、AD-70244·I、AD-70272·I、AD-70228·I、AD-70255·I、AD-70278·1、及AD-70295·1的任一者所组成的组。38.如权利要求31至37中任一项所述的组合物，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成:3’_末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-0_甲基修饰的核苷酸、2氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。39.—种组合物，用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中的表达，该组合物包含：a第一双链RNAi剂，包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及⑹第二双链RNAi剂，包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；其中，该第一正义链及第二正义链各自独立包含选自表11、12、31及32的任一者中提供的任一正义序列所组成组的序列，以及其中，该第一反义链及第二反义链各自独立包含选自表11、12、31及32的任一者中提供的任一反义序列所组成组的序列。40.如权利要求39所述的组合物，其中，该第一正义链及第二正义链各自独立包含选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275·I的任一正义序列所组成组的序列。41.如权利要求39所述的组合物，其中，该第一反义链及第二反义链各自独立包含选自AD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269.1、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275·I的任一反义序列所组成组的序列。42.如权利要求39所述的组合物，其中，该第一及第二正义链的全部核苷酸和或该第一及第二反义链的全部核苷酸包含修饰。43.如权利要求39所述的组合物，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成:3’-末端脱氧胸腺嘧啶dT核苷酸、2’-O-甲基修饰的核苷酸、2’-氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-0-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5_脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。44.一种双链RNAi剂，包含表11、12、31及32的任一者中提供的RNAi剂。45.—种载体，用于表达权利要求1或23所述的双链RNAi剂。46.—种细胞，含有权利要求1或20所述的双链RNAi剂。47.—种药物组合物，包含权利要求1及23中任一项所述的双链RNAi剂，或权利要求31及39的任一项的组合物，或权利要求45的载体。48.如权利要求47所述的药物组合物，其中，该双链RNAi剂是以非缓冲溶液形式给予。49.如权利要求48所述的药物组合物，其中，该非缓冲溶液为生理盐水或水。50.如权利要求47所述的药物组合物，其中，该双链RNAi剂是与缓冲溶液一起给予。51.如权利要求50所述的药物组合物，其中，该缓冲溶液包含醋酸盐、柠檬酸盐、醇溶蛋白、碳酸盐、或磷酸盐、或其任意组合。52.如权利要求51所述的药物组合物，其中，该缓冲溶液是磷酸盐缓冲液PBS。53.—种抑制D型肝炎病毒HDV基因于细胞内表达的方法，该方法包含：a使该细胞与权利要求1及23任一者所述的双链RNAi剂、或权利要求31及39任一者的组合物、或权利要求45的载体、或权利要求47至52任一者所述的药物组合物接触；以及⑹将步骤a中制造的细胞保持一段时间，该时间足以获得HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制HDV基因于该细胞中的表达。54.如权利要求53所述的方法，其中，该HDV是选自HDV-l、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、HDV-8、及其组合所组成的组。55.如权利要求53或54所述的方法，进一步包含抑制HBV基因于细胞中的表达。56.如权利要求55所述的方法，其中，该细胞是与表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的双链iRNA剂接触。57.—种抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中复制的方法，该方法包含：a使该细胞与权利要求1及23任一者所述的双链RNAi剂、或权利要求31及39任一者所述的组合物、或权利要求45的载体、或权利要求47至52任一者所述的药物组合物接触；以及⑹将步骤a中制造的细胞保持一段时间，该时间足以获得HDV基因的mRNA转录本的降解，从而抑制HDV基因于该细胞中的复制。58.如权利要求57所述的方法，其中，该HDV是选自HDV-l、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、HDV-8、及其组合所组成的组。59.如权利要求57或58所述的方法，进一步包含抑制HBV于细胞中的复制。60.如权利要求57所述的方法，其中，该细胞是与表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的双链iRNA剂接触。61.如权利要求54或57所述的方法，其中，该细胞是位于受试者体内。62.如权利要求61所述的方法，其中，该受试者是人。63.如权利要求54所述的方法，其中，该HDV基因表达是被抑制至少约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约98%、或约100%。64.如权利要求47所述的方法，其中，该HDV于细胞中的复制被抑制至少约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%、约90%、约95%、约98%、或约100%。65.—种降低感染有D型肝炎病毒HDV的受试者体内HDV抗原含量的方法，包含对该受试者给予治疗有效量的权利要求1及23中任一项所述的双链RNAi剂、或权利要求31及39中任一项所述的组合物、或权利要求45所述的载体、或权利要求47至52中任一项所述的药物组合物，从而降低该受试者体内HBV抗原的含量。66.—种降低感染有HBV的受试者体内D型肝炎病毒HDV的病毒负载的方法，包含对该受试者给予治疗有效量的权利要求1及23中任一项所述的双链RNAi剂、或权利要求31及39中任一项所述的组合物、或权利要求45所述的载体、或权利要求47至52中任一项所述的药物组合物，从而降低该受试者体内HDV抗原的病毒负载。67.如权利要求65或66所述的方法，其中，该HDV是选自HDV-l、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、HDV-8、及其组合所组成的组。68.如权利要求65至67中任一项所述的方法，进一步包含抑制HBV于细胞中的复制。69.如权利要求68所述方法，其中，该细胞是与表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的双链iRNA剂接触。70.—种治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法，包含对该受试者给予治疗有效量的权利要求1或23中任一项所述的双链RNAi剂、或权利要求31及39中任一项所述的组合物、或权利要求45所述的载体、或权利要求47至52中任一项所述的药物组合物，从而治疗该受试者。71.—种治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法，包含对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，从而治疗该受试者，其中，该双链RNAi剂包含形成双链区域的正义链及反义链，其中，该正义链包含表11、12、31及32任一者中提供的正义序列的任一者，且该反义链包含表11、12、31及32任一者中提供的反义序列的任一者，以及，其中，该正义链的实质上全部核苷酸及该反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物。72·如权利要求71所述的方法，其中，该HDV是选自HDV-1、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、HDV-8、及其组合所组成的组。73.如权利要求71或72所述的方法，进一步包含抑制HBV于细胞内的复制。74.如权利要求73所述的方法，其中，该细胞是与表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的双链iRNA剂接触。75.如权利要求71至74中任一项所述的方法，其中，该正义链的全部核苷酸及该反义链的全部核苷酸包含修饰。76.如权利要求71至74中任一项所述的方法，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’_末端脱氧胸腺嘧啶（dT核苷酸、2’-0_甲基修饰的核苷酸、2氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。77.如权利要求76所述的方法，其中，该5’-磷酸酯模拟物是5’-乙烯基磷酸酯5’-VP。78.如权利要求71至74中任一项所述的方法，其中，该配体是79.如权利要求78所述的方法，其中，该RNAi剂是如以下方案所示的接合至该配体其中，X是O或S。80.—种治疗患有D型肝炎病毒HDV感染的受试者的方法，包含对该受试者给予治疗有效量的用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞中表达的组合物，从而治疗该受试者，所述组合物包含a第一双链RNAi剂，包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及⑹第二双链RNAi剂，包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；其中，该第一正义链及第二正义链各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中提供的任一正义序列所组成组的序列，以及其中，该第一反义链及第二反义链各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中提供的任一反义序列所组成组的序列。81.—种治疗患有D型肝炎病毒HDV相关病症的受试者的方法，该方法包含对该受试者给予治疗有效量的用于抑制D型肝炎病毒HDV于细胞内表达的组合物，从而治疗该受试者，该组合物包含a第一双链RNAi剂，包含形成双链区域的第一正义链及第一反义链，其中，该第一正义链的实质上全部核苷酸及该第一反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第一正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；以及⑹第二双链RNAi剂，包含形成双链区域的第二正义链及第二反义链，其中，该第二正义链的实质上全部核苷酸及该第二反义链的实质上全部核苷酸是经修饰的核苷酸，其中，该第二正义链是接合至附接于3’-末端的配体，以及其中，该配体是通过二价或三价分支链连接子附接的一个或多个GalNAc衍生物；其中，该第一正义链及第二正义链各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中提供的任一正义序列所组成组的序列，以及其中，该第一反义链及第二反义链各自独立包含选自表11、12、31、及32任一者中提供的任一反义序列所组成组的序列。82.如权利要求80及81中任一项所述的方法，其中，该第一及第二正义链的全部核苷酸及该第一及第二反义链的全部核苷酸包含修饰。83.如权利要求80及81中任一项所述的方法，其中，该经修饰的核苷酸中的至少一个选自下组，该组由以下各项组成：3’_末端脱氧胸腺嘧啶（dT核苷酸、2’-0_甲基修饰的核苷酸、2氟修饰的核苷酸、2脱氧修饰的核苷酸、锁核苷酸、未锁核苷酸、构型限定的核苷酸、约束性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基修饰的核苷酸、2’-C-烷基修饰的核苷酸、2’-羟基修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-0-烷基修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1，5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基磷酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、以及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。84.如权利要求80及81中任一项所述的方法，其中，该配体是85.如权利要求84所述的方法，其中，该RNAi剂是如以下方案所示的接合至该配体其中，X是O或s。86.如权利要求80及81所述的方法，其中，该受试者是人。87.如权利要求80或81所述的方法，其中，该HDV是选自HDV-l、HDV-2、HDV-3、HDV-4、HDV-5、HDV-6、HDV-7、HDV-8、及其组合所组成的组。88.如权利要求80或81所述的方法，其中，该第一及第二正义链各自独立包含选自由来gAD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、或AD-70275·I的任一正义序列所组成组的序列。89.如权利要求80或81所述的方法，其中，该第一及第二反义链各自独立包含选自由来gAD-70260.1、AD-70232.1、AD-70249.1、AD-70244.1、AD-70272.1、AD-70228.1、AD-70255.1、AD-70278.1、AD-70295.1、AD-67200.1、AD-67211.1、AD-67199.1、AD-67202.1、AD-67208.1、AD-67210.1、AD-70259.1、AD-70267.1、AD-70272.1、AD-70271.1、AD-70268.1、AD-70269·I、AD-70232·I、AD-70256·I、AD-70257·I、orAD-70275·I的任一反义序列所组成组的序列。90.如权利要求80或81所述的方法，进一步包含抑制HBV于细胞中的复制。91.如权利要求90所述的方法，其中，该细胞是与表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的任一双链iRNA剂接触。92.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约0.01mgkg至约10mgkg或约0.5mgkg至约50mgkg的剂量给予。93.如权利要求92所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约IOmgkg至约30mgkg的剂量给予。94.如权利要求92所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约3mgkg的剂量给予。95.如权利要求92所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约10mgkg的剂量给予。96.如权利要求92所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约0.5mgkg的剂量每周给予二次。97.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该双链RNAi剂是以约50mg至200mg的固定剂量给予。98.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该双链RNAi剂是经皮下给予。99.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该双链RNAi剂是经静脉给予。100.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该RNAi剂是以两剂或更多剂给予。101.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该RNAi剂是以选自下述所组成组的间隔给予:每约12小时一次、每约24小时一次、每约48小时一次、每约72小时一次、及每约96小时一次。102.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该RNAi剂是每周给予两次。103.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，其中，该RNAi剂是每两周给予一次。104.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，进一步包含对该受试者给予额外的治疗剂。105.如权利要求104所述的方法，其中，该额外的治疗剂是选自抗病毒剂、逆转录抑制剂、免疫刺激剂、治疗性疫苗、病毒进入抑制剂、抑制HbsAg的分泌或释放的寡核苷酸、壳蛋白抑制剂、共价闭合环状cccHBVDNA抑制剂、以HBV为靶向的双链iRNA剂、及前述任意者的组合所组成的组。106.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，进一步包含对该受试者给予逆转录抑制剂。107.如权利要求71、80或81中任一项所述的方法，进一步包含对该受试者给予逆转录抑制剂及免疫刺激剂。108.如权利要求106或107所述的方法，其中，该逆转录抑制剂是选自富马酸替诺福韦酯（TDF、替诺福韦埃拉酚胺、拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦（ETV、替比夫定、及AGX-1009所组成的组。109.如权利要求107所述的方法，其中，该免疫刺激剂是选自聚乙二醇化干扰素a2aPEG-IFN_a2a、干扰素a-2b、重组人介白素-7、及类Tol1受体7TLR7促进剂所组成的组。110.如权利要求105所述的方法，其中，该以HBV为靶向的双链iRNA剂是表3、4、6、14、15、24、25、27、及28任一者中提供的任一剂。111.如权利要求110所述的方法，其中，该剂是AD-65403、AD-66810、或其组合。

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