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申请/专利权人：华东医院;宁波海尔施基因科技有限公司

申请日：2015-10-14

公开（公告）日：2019-09-10

公开（公告）号：CN105368825B

专利技术分类：..DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H21/00）[2006.01]

专利摘要：本发明提供了一种幽门螺杆菌抗生素耐药性分析试剂盒以及利用所述试剂盒进行幽门螺杆菌抗生素耐药性检测的方法，所述试剂盒包括引物，所述引物包括针对幽门螺杆菌抗生素耐药基因以及鉴定基因16SrRNA设计的引物。本发明基于多重基因分析，各诊断基因独立分明，能够实现在同一个反应体系内对幽门螺杆菌的快速鉴定及其多种抗生素耐药性的分析，避免传统培养方法和药敏检测耗时长、阳性率低、费用高等缺点。

专利权项：1.一种幽门螺杆菌抗生素耐药性分析试剂盒，其特征在于，采用多重PCR和毛细电泳方法，同步多重检测针对幽门螺杆菌HP抗生素耐药相关基因23SrRNA、gyrA、porD以及鉴定基因16SrRNA，可在鉴定HP感染的同时，提供HP菌株对抗生素是否耐药的信息；根据所述检测基因设计的特异性引物；在正向特异性引物5’端连接正向通用Tag序列，反向特异性引物5’端连接反向通用Tag序列；其中，所述正向通用Tag序列为：5’-AGGTGACACTATAGAATA-3’；其中，所述反向通用Tag序列为：5’-GTACGACTCACTATAGGGA-3’；所述特异性引物包括针对幽门螺杆菌鉴定基因16SrRNA基因、以及抗生素耐药相关基因23SrRNA、gyrA、porD设计的引物；针对23SrRNA基因设计的引物序列为：SEQIDNo.1：5’-AACCGCGGCAAGACGGCA-3’；SEQIDNo.2：5’-GATCTAACCGCGGCAAGACGGTG-3’；SEQIDNo.3：5’-GGTATCTCAAGGATGGCTCC-3’；针对gyrA基因设计的引物序列为：SEQIDNo.4：5’-AGACACTAGCGCATCATAAACCGAR-3’；SEQIDNo.5：5’-CTAGCGCATCATAAACCGTY-3’；SEQIDNo.6：5’-TAGAAGTGGGGATTGATTCT-3’；针对porD基因设计的引物序列为：SEQIDNo.7：5’-GAACAAATTGAGCCTGCYGC-3’；SEQIDNo.8：5’-ACCAAGAACAAATTGAGCCTGCYCD-3’；SEQIDNo.9：5’-GCGTTGATGGGGTGATAGCA-3’；针对16SrRNA基因设计的引物序列为：SEQIDNo.10：5’-CTGGAGAGACTAAGCCCTCC-3’；SEQIDNo.11：5’-ATTACTGAAGCTGATTGCGC-3’。

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