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申请/专利权人:山东发现生物技术有限公司
摘要:本发明公开了一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法,包含如下步骤:采取20例健康志愿者和某省肿瘤医院血液科20例AML患者外周血25ml,运用常规单个核细胞提取法提取单个核细胞,分别放于培养基的培养孔中培养;运用流式细胞仪检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d的细胞数量及细胞存活率,采用该方法能进一步提高NK细胞的纯度、绝对值、功能表型及分泌IFNγ的能力。
主权项:1.一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法,其特征在于,包含如下步骤:(1)采取20例健康志愿者和某省肿瘤医院血液科20例AML患者外周血25ml,运用常规单个核细胞提取法提取单个核细胞,分别放于培养基的培养孔中培养,前5d加入一定量ulCD3McAb,在培养的第5d,倒掉含有CD3McAb的培养液,即加入含有rhIL-2的SCGM培养基,隔日补充一次培养液,直至25d;(2)运用流式细胞仪检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d的细胞数量及细胞存活率;(3)运用流式细胞仪检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d细胞中的NK细胞百分率和T细胞百分率;(4)采用比色法检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d分选出的NK细胞对K562细胞和RPMI8226细胞的杀伤活性。
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