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申请/专利权人:新疆农业大学
摘要:本发明属于植物检疫技术领域,涉及用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法。本发明根据杏褪绿卷叶植原体与其它植原体在16SrDNA基因序列上的差异,设计了特异性检测杏褪绿卷叶植原体的引物对ACLR‑F1ACLR‑R1和探针ACLR‑Probe,通过建立的杏褪绿卷叶植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值,依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准,即可实现对杏褪绿卷叶植原体的定性;再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中杏褪绿卷叶植原体16SrDNA基因片段拷贝浓度,据此得到样品中杏褪绿卷叶植原体的数量,从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点,可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。
主权项:1.一种用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法,其特征在于,所述一对特异性的PCR引物和荧光Taqman探针的寡聚核昔酸序列为:上游引物ACLR-F1:5’-CCCTGGTAGTCCACGCTGTAG-3’;下游引物ACLR-R1:5’-AGACCTGGTAAGGTTTTTCGTGTAC-3’;探针ACLR-Probe:5’-TTAATGTGTTAACTTCAGTACCG-3’;其中,所述引物对扩增片段大小为190bp;该探针的5’端具有报告荧光染料FAM标记,3’端具有淬灭荧光染料TAMRA标记。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 新疆农业大学 用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法
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